| 中文摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 符号说明 | 第11-13页 |
| 上篇 文献综述 | 第13-25页 |
| 第一章 细胞凋亡和自噬 | 第13-20页 |
| 1 细胞凋亡 | 第13-16页 |
| 1.1 内源性途径 | 第13-14页 |
| 1.2 外源性途径 | 第14-15页 |
| 1.3 Caspase家族/Bcl-2家族 | 第15-16页 |
| 2 细胞自噬 | 第16-18页 |
| 2.1 自噬的过程 | 第16-18页 |
| 2.2 自噬过程的调控 | 第18页 |
| 3 凋亡与自噬 | 第18-20页 |
| 第二章 玉米赤霉烯酮研究进展 | 第20-25页 |
| 1 ZEA的简介 | 第20-22页 |
| 1.1 ZEA的结构 | 第20-21页 |
| 1.2 ZEA的污染状况 | 第21-22页 |
| 2 ZEA的一般毒性 | 第22-23页 |
| 2.1 生殖发育毒性 | 第22页 |
| 2.2 免疫毒性 | 第22-23页 |
| 2.3 遗传毒性 | 第23页 |
| 2.4 ZEA对肿瘤发生的影响 | 第23页 |
| 2.5 ZEA的细胞毒性 | 第23页 |
| 3 ZEA的雄性生殖毒性及其机理 | 第23-25页 |
| 下篇 实验部分 | 第25-63页 |
| 第三章 ZEA诱导大鼠LEYDIG细胞凋亡 | 第25-34页 |
| 1 材料 | 第25-26页 |
| 1.1 实验动物 | 第25页 |
| 1.2 主要试剂 | 第25页 |
| 1.3 主要仪器 | 第25-26页 |
| 2 方法 | 第26-29页 |
| 2.1 溶液的配制 | 第26页 |
| 2.2 Leydig细胞原代培养 | 第26-27页 |
| 2.3 分离大鼠Leydig细胞的计数与活率鉴定 | 第27页 |
| 2.4 分离大鼠Leydig细胞的纯度鉴定 | 第27页 |
| 2.5 MTT法 | 第27-28页 |
| 2.6 Hochest 33258染色 | 第28页 |
| 2.7 透射电镜观察 | 第28页 |
| 2.8 流式细胞术检测凋亡 | 第28-29页 |
| 2.9 统计学分析 | 第29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-32页 |
| 3.1 细胞活率及纯度 | 第29页 |
| 3.2 ZEA对大鼠睾丸间质细胞活力的影响 | 第29-30页 |
| 3.3 Hoches 33258染色 | 第30-31页 |
| 3.4 透射电镜观察 | 第31页 |
| 3.5 流式细胞术定量测定细胞凋亡 | 第31-32页 |
| 4 讨论 | 第32-33页 |
| 5 小结 | 第33-34页 |
| 第四章 ZEA诱导LEYDIG细胞凋亡信号转导通路 | 第34-48页 |
| 1 材料 | 第34-35页 |
| 1.1 实验动物 | 第34页 |
| 1.2 主要试剂 | 第34页 |
| 1.3 主要仪器 | 第34-35页 |
| 2 方法 | 第35-37页 |
| 2.1 免疫印迹 | 第35-37页 |
| 2.2 JC-1测定线粒体膜电位 | 第37页 |
| 2.3 统计学分析 | 第37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-46页 |
| 3.1 线粒体膜电位额变化 | 第37-38页 |
| 3.2 ZEA对Leydig细胞中的Bax和Bcl-2表达的影响 | 第38-39页 |
| 3.3 细胞色素C的释放 | 第39-40页 |
| 3.4 Caspase级联反应在ZEA诱导大鼠Leydig细胞凋亡中的作用 | 第40-41页 |
| 3.5 Z-VAD-fmk对Leydig细胞的保护作用 | 第41-42页 |
| 3.6 Z-VAD-fmk对Leydig细胞凋亡的影响 | 第42-44页 |
| 3.7 Z-VAD-fmk对ZEA诱导Lyedig细胞Caspase-9,-3活性的影响 | 第44-45页 |
| 3.8 Z-VAD-fmk对ZEA诱导Lyedig细胞PARP活性影响 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-47页 |
| 5 小结 | 第47-48页 |
| 第五章 ZEA诱导大鼠LEYDIG细胞自噬 | 第48-56页 |
| 1 材料 | 第48-49页 |
| 1.1 主要试剂 | 第48页 |
| 1.2 主要仪器 | 第48-49页 |
| 2 方法 | 第49-50页 |
| 2.1 酸性囊泡(AVOs)镜检观察 | 第49页 |
| 2.2 AO染色后FCM定量分析AVOs | 第49页 |
| 2.3 ZEA处理后对Leydig细胞自噬相关蛋白表达的影响 | 第49页 |
| 2.4 ZEA处理后的Leydig细胞中自噬LC3转移与定位 | 第49-50页 |
| 2.5 透射电镜观察自噬泡 | 第50页 |
| 3 结果 | 第50-54页 |
| 3.1 AVOs镜检观察 | 第50页 |
| 3.2 AO染色后FCM定量分析 | 第50-52页 |
| 3.3 ZEA处理Leydig细胞后标志性自噬蛋白的表达 | 第52-53页 |
| 3.4 ZEA处理后的Leydig细胞中自噬LC3转移与定位 | 第53-54页 |
| 3.5 透射电镜观察ZEA处理Leydig细胞机构变化 | 第54页 |
| 4 讨论 | 第54-55页 |
| 5 小结 | 第55-56页 |
| 第六章 自噬在ZEA诱导LEYDIG细胞凋亡中的作用 | 第56-63页 |
| 1 材料 | 第56页 |
| 1.1 主要试剂 | 第56页 |
| 1.2 主要仪器 | 第56页 |
| 2 方法 | 第56-57页 |
| 2.1 RAP和CQ对ZEA处理的Leydig细胞LC3蛋白的影响 | 第56-57页 |
| 2.2 自噬延迟凋亡的作用 | 第57页 |
| 3 结果 | 第57-61页 |
| 3.1 自噬诱导剂RAP对ZEA处理的Leydig细胞LC3蛋白的影响 | 第57-58页 |
| 3.2 自噬抑制剂CQ对ZEA处理的Leydig细胞LC3蛋白的影响 | 第58-59页 |
| 3.3 自噬延迟凋亡的作用 | 第59-61页 |
| 4 讨论 | 第61-62页 |
| 5 小结 | 第62-63页 |
| 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第75-76页 |
