摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
目录 | 第8-11页 |
第1章 前言 | 第11-21页 |
1.1 地下鼠 | 第11-14页 |
1.1.1 地下鼠概述 | 第11页 |
1.1.2 地下鼠低氧适应研究进展 | 第11-14页 |
1.2 甘肃鼢鼠 | 第14-15页 |
1.2.1 甘肃鼢鼠概述 | 第14页 |
1.2.2 甘肃鼢鼠低氧适应研究进展 | 第14-15页 |
1.3 促红细胞生成素 | 第15-17页 |
1.3.1 促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)概述 | 第15-16页 |
1.3.2 EPO在低氧适应中的研究概述 | 第16-17页 |
1.4 生物信息学相关概述 | 第17-18页 |
1.5 研究目的和内容 | 第18-21页 |
1.5.1 研究目的 | 第18页 |
1.5.2 研究内容 | 第18-21页 |
第2章 实时定量RT-PCR技术研究甘肃鼢鼠脑组织EPO mRNA表达 | 第21-33页 |
2.1 实验材料 | 第21-22页 |
2.1.1 实验动物 | 第21页 |
2.1.2 主要实验仪器和试剂 | 第21-22页 |
2.1.3 实验取材 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22-25页 |
2.2.1 总RNA的提取 | 第22页 |
2.2.2 第一链cDNA的制备 | 第22-23页 |
2.2.3 SYBR Geen实时定量PCR实验 | 第23-25页 |
2.3 结果与分析 | 第25-27页 |
2.4 讨论 | 第27-33页 |
第3章 甘肃鼢鼠EPO基因克隆 | 第33-43页 |
3.1 实验材料 | 第33-34页 |
3.1.1 实验动物 | 第33页 |
3.1.2 实验设备以及耗材 | 第33-34页 |
3.1.3 主要实验试剂 | 第34页 |
3.1.4 主要试剂配方 | 第34页 |
3.2 实验方法 | 第34-39页 |
3.2.1 总RNA提取 | 第34-35页 |
3.2.2 总RNA质量鉴定 | 第35-36页 |
3.2.3 第一链cDNA合成 | 第36页 |
3.2.4 引物设计 | 第36-37页 |
3.2.5 扩增甘肃鼢鼠EPO基因所用的体系和程序 | 第37页 |
3.2.6 PCR扩增产物的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第37-38页 |
3.2.7 扩增片段的回收纯化 | 第38页 |
3.2.8 PCR纯化产物的克隆测序 | 第38-39页 |
3.3 结果与分析 | 第39-42页 |
3.3.1 甘肃鼢鼠总RNA的提取 | 第39-40页 |
3.3.2 甘肃鼢鼠EPO基因cDNA序列的扩增 | 第40-41页 |
3.3.3 甘肃鼢鼠EPO基因序列开放阅读框分析 | 第41-42页 |
3.4 讨论 | 第42-43页 |
第4章 甘肃鼢鼠EPO蛋白序列的生物信息学分析 | 第43-65页 |
4.1 方法 | 第43-46页 |
4.1.1 甘肃鼢鼠EPO蛋白理化性质分析 | 第43页 |
4.1.2 信号肽分析 | 第43页 |
4.1.3 疏水性分析 | 第43-44页 |
4.1.4 蛋白质的功能基序分析 | 第44页 |
4.1.5 蛋白质跨膜结构区分析 | 第44页 |
4.1.6 蛋白质二级结构分析 | 第44页 |
4.1.7 蛋白质三级结构分析 | 第44-45页 |
4.1.8 EPO核苷酸和氨基酸的同源性分析 | 第45页 |
4.1.9 甘肃鼢鼠EPO的遗传距离和进化树分析 | 第45页 |
4.1.10 甘肃鼢鼠EPO的功能分化分析 | 第45-46页 |
4.1.11 选择压力分析 | 第46页 |
4.2 结果与分析 | 第46-62页 |
4.2.1 甘肃鼢鼠EPO蛋白理化性质分析 | 第46-47页 |
4.2.2 信号肽分析 | 第47-49页 |
4.2.3 疏水性分析 | 第49页 |
4.2.4 蛋白质的功能基序分析 | 第49-50页 |
4.2.5 蛋白质跨膜结构区分析 | 第50-51页 |
4.2.6 蛋白质二级结构分析 | 第51-52页 |
4.2.7 蛋白质三级结构分析 | 第52-53页 |
4.2.8 EPO核苷酸和氨基酸的同源性分析 | 第53-59页 |
4.2.9 甘肃鼢鼠EPO的遗传距离和进化树分析 | 第59-60页 |
4.2.10 甘肃鼢鼠EPO的功能分化分析 | 第60-61页 |
4.2.11 选择压力分析 | 第61-62页 |
4.3 讨论 | 第62-65页 |
第5章 总结 | 第65-67页 |
参考文献 | 第67-77页 |
致谢 | 第77-79页 |
研究生期间发表的论文 | 第79页 |