| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-21页 |
| 1.1 精原干细胞研究进展 | 第10-12页 |
| 1.1.1 精原细胞 | 第10页 |
| 1.1.2 精原干细胞生物学 | 第10-12页 |
| 1.2 长链非编码 RNA 研究进展 | 第12-17页 |
| 1.2.1 长链非编码 RNA 简介 | 第12-13页 |
| 1.2.2 lncRNA 与 mRNA 的异同点 | 第13页 |
| 1.2.3 长链非编码 RNA 分类 | 第13-14页 |
| 1.2.4 lncRNA 数据库 | 第14页 |
| 1.2.5 lncRNA 作用模式研究 | 第14页 |
| 1.2.6 长链非编码 RNA 功能研究 | 第14-16页 |
| 1.2.7 长链非编码 RNA 与疾病 | 第16-17页 |
| 1.2.8 lncRNA 与精原干细胞 | 第17页 |
| 1.3 NEAT1 功能研究 | 第17-19页 |
| 1.3.1 lncRNA NEATl 简介 | 第17页 |
| 1.3.2 NEAT1 作为细胞核的构成组分 | 第17-18页 |
| 1.3.3 NEAT1 与人胚胎干细胞分化 | 第18-19页 |
| 1.3.4 NEAT1 与 MALAT1 | 第19页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第19-21页 |
| 第二章 NEAT1 干扰载体构建和病毒包装 | 第21-35页 |
| 2.1 材料与方法 | 第21-29页 |
| 2.1.1 实验动物及实验细胞系 | 第21页 |
| 2.1.2 实验试剂及相关耗材 | 第21-22页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第22页 |
| 2.1.4 RNA 提取 | 第22-23页 |
| 2.1.5 反转录 PCR | 第23-24页 |
| 2.1.6 PCR | 第24页 |
| 2.1.7 干扰载体构建 | 第24-28页 |
| 2.1.8 慢病毒包装 | 第28页 |
| 2.1.9 慢病毒滴度测定 | 第28-29页 |
| 2.2 实验结果 | 第29-33页 |
| 2.2.1 NEAT1 基础生物信息 | 第29-30页 |
| 2.2.2 NEAT1 在小鼠睾丸及细胞系中的表达验证 | 第30页 |
| 2.2.3 成功构建出 NEAT1 的干扰载体 | 第30-32页 |
| 2.2.4 成功包装慢病毒并测定其滴度 | 第32页 |
| 2.2.5 干扰效率检测确定慢病毒的干扰效果 | 第32-33页 |
| 2.3 讨论 | 第33-35页 |
| 2.3.1 在睾丸组织中表达的 lncRNA | 第33-34页 |
| 2.3.2 shRNA 序列的设计与筛选 | 第34页 |
| 2.3.3 第三代慢病毒包装系统 | 第34页 |
| 2.3.4 NEAT1 干扰效果检测 | 第34-35页 |
| 第三章 NEAT1 在小鼠精子发生过程中的作用 | 第35-42页 |
| 3.1 材料与方法 | 第35-37页 |
| 3.1.1 实验用动物 | 第35页 |
| 3.1.2 实验用相关试剂及配方 | 第35-36页 |
| 3.1.3 实验相关仪器 | 第36页 |
| 3.1.4 小鼠睾丸曲细精管病毒注射 | 第36页 |
| 3.1.5 小鼠睾丸取材，固定及石蜡包埋 | 第36-37页 |
| 3.1.6 实验材料切片及 H.&E.染色 | 第37页 |
| 3.1.7 精子发生曲细精管比例统计 | 第37页 |
| 3.2 结果 | 第37-40页 |
| 3.2.1 实验组和 NC 组小鼠睾丸重量 | 第37-38页 |
| 3.2.2 睾丸指数检测 | 第38页 |
| 3.2.3 病毒注射对精子发生的影响 | 第38-39页 |
| 3.2.4 睾丸曲细精管精子发生统计 | 第39-40页 |
| 3.3 讨论 | 第40-42页 |
| 3.3.1 NEAT1 对小鼠睾丸重量及精子发生的影响 | 第40页 |
| 3.3.2 NEAT1 发挥功能的潜在机制 | 第40-42页 |
| 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 作者简介及在硕士阶段发表论文、拟发表论文 | 第50页 |