摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
中英文缩略词表 | 第10-11页 |
第1章 引言 | 第11-13页 |
第2章 材料与方法 | 第13-26页 |
2.1 实验细胞、试剂与设备 | 第13-16页 |
2.1.1 实验细胞 | 第13页 |
2.1.2 主要的实验试剂 | 第13-14页 |
2.1.3 主要的实验设备 | 第14-15页 |
2.1.4 主要的试剂配制 | 第15-16页 |
2.2 实验方法 | 第16-26页 |
2.2.1 体外细胞培养 | 第16页 |
2.2.2 实验设计 | 第16-17页 |
2.2.3 质粒制备 | 第17-18页 |
2.2.4 慢病毒制备 | 第18-19页 |
2.2.5 慢病毒转染 | 第19页 |
2.2.6 慢病毒滴度测定(GFP 荧光) | 第19页 |
2.2.7 诱导 ASC 细胞脂肪分化 | 第19-20页 |
2.2.8 油红 O 染色 | 第20页 |
2.2.9 DAPI 染色 | 第20页 |
2.2.10 总蛋白提取及蛋白浓度测定 | 第20-21页 |
2.2.11 Western Blot | 第21页 |
2.2.12 荧光素酶活性检测 | 第21-22页 |
2.2.13 引物设计、合成 | 第22页 |
2.2.14 RNA 提取 | 第22页 |
2.2.15 实时荧光定量 PCR 分析 | 第22-24页 |
2.2.16 线粒体结构与功能的检测 | 第24-25页 |
2.2.17 统计学分析 | 第25-26页 |
第3章 结果 | 第26-33页 |
3.1 定向诱导 ASC 脂肪分化模型的建立 | 第26页 |
3.2 miR-27 对 ASC 脂肪细胞分化的抑制作用 | 第26-28页 |
3.2.1 脂肪形成过程中 miR-27 的变化 | 第26-27页 |
3.2.2 验证慢病毒的转染效率 | 第27页 |
3.2.3 过表达 miR-27 对 ASC 脂肪细胞分化的影响 | 第27-28页 |
3.3 PHB 是 miR-27 的直接靶基因 | 第28-30页 |
3.3.1 荧光报告载体验证 PHB 是 miR-27 的直接靶基因 | 第28-29页 |
3.3.2 过表达 PHB 对受 miR-27 抑制的脂肪分化的影响 | 第29-30页 |
3.4 miR-27 对分化过程中 ASC 细胞线粒体的影响 | 第30-33页 |
第4章 讨论 | 第33-37页 |
4.1 脂肪细胞发育的模型 | 第33页 |
4.2 PHB 和脂肪发育 | 第33-34页 |
4.3 miR-27 在脂肪发育中的调控 | 第34-37页 |
第5章 结论 | 第37-38页 |
致谢 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-42页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第42-43页 |
综述 | 第43-46页 |
参考文献 | 第45-46页 |