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MicroRNA-27通过靶向于抗增殖蛋白抑制脂肪干细胞分化及线粒体功能

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
中英文缩略词表第10-11页
第1章 引言第11-13页
第2章 材料与方法第13-26页
    2.1 实验细胞、试剂与设备第13-16页
        2.1.1 实验细胞第13页
        2.1.2 主要的实验试剂第13-14页
        2.1.3 主要的实验设备第14-15页
        2.1.4 主要的试剂配制第15-16页
    2.2 实验方法第16-26页
        2.2.1 体外细胞培养第16页
        2.2.2 实验设计第16-17页
        2.2.3 质粒制备第17-18页
        2.2.4 慢病毒制备第18-19页
        2.2.5 慢病毒转染第19页
        2.2.6 慢病毒滴度测定(GFP 荧光)第19页
        2.2.7 诱导 ASC 细胞脂肪分化第19-20页
        2.2.8 油红 O 染色第20页
        2.2.9 DAPI 染色第20页
        2.2.10 总蛋白提取及蛋白浓度测定第20-21页
        2.2.11 Western Blot第21页
        2.2.12 荧光素酶活性检测第21-22页
        2.2.13 引物设计、合成第22页
        2.2.14 RNA 提取第22页
        2.2.15 实时荧光定量 PCR 分析第22-24页
        2.2.16 线粒体结构与功能的检测第24-25页
        2.2.17 统计学分析第25-26页
第3章 结果第26-33页
    3.1 定向诱导 ASC 脂肪分化模型的建立第26页
    3.2 miR-27 对 ASC 脂肪细胞分化的抑制作用第26-28页
        3.2.1 脂肪形成过程中 miR-27 的变化第26-27页
        3.2.2 验证慢病毒的转染效率第27页
        3.2.3 过表达 miR-27 对 ASC 脂肪细胞分化的影响第27-28页
    3.3 PHB 是 miR-27 的直接靶基因第28-30页
        3.3.1 荧光报告载体验证 PHB 是 miR-27 的直接靶基因第28-29页
        3.3.2 过表达 PHB 对受 miR-27 抑制的脂肪分化的影响第29-30页
    3.4 miR-27 对分化过程中 ASC 细胞线粒体的影响第30-33页
第4章 讨论第33-37页
    4.1 脂肪细胞发育的模型第33页
    4.2 PHB 和脂肪发育第33-34页
    4.3 miR-27 在脂肪发育中的调控第34-37页
第5章 结论第37-38页
致谢第38-39页
参考文献第39-42页
攻读学位期间的研究成果第42-43页
综述第43-46页
    参考文献第45-46页

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