| 摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-15页 |
| 本文缩略词表 | 第16-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-31页 |
| 1 果树花药离体培养研究进展 | 第17-20页 |
| 1.1 果树花药离体培养的发生途径研究进展 | 第17-18页 |
| 1.2 影响果树花药离体培养的因素 | 第18-20页 |
| 2 农杆菌介导的果树遗传转化研究进展 | 第20-24页 |
| 2.1 农杆菌介导成功的转基因果树 | 第20-21页 |
| 2.2 果树遗传转化改进的性状 | 第21-23页 |
| 2.3 受体系统 | 第23页 |
| 2.4 抗生素的选择 | 第23页 |
| 2.5 遗传转化植株检测 | 第23-24页 |
| 3 低温胁迫对果树生理影响的研究进展 | 第24-28页 |
| 3.1 低温对果树细胞壁和超微结构的影响 | 第24-25页 |
| 3.2 低温对果树细胞膜的影响 | 第25-26页 |
| 3.3 低温对果树保护酶活性的影响 | 第26-27页 |
| 3.4 低温胁迫对果树渗透调节物质的影响 | 第27-28页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第28-29页 |
| 5 主要研究内容 | 第29-30页 |
| 5.1 火龙果花药培养及再生体系的建立与优化 | 第29页 |
| 5.2 火龙果茎段及愈伤组织内源激素含量的研究 | 第29页 |
| 5.3 农杆菌介导LTP基因导入火龙果胚性愈伤组织的遗传转化研究 | 第29页 |
| 5.4 农杆菌介导LTP基因导入火龙果茎段的遗传转化研究 | 第29页 |
| 5.5 转LTP基因火龙果再生植株的抗寒生理研究 | 第29-30页 |
| 6 技术路线 | 第30-31页 |
| 第二章 火龙果花药培养及再生体系建立 | 第31-50页 |
| 1 材料与方法 | 第32-36页 |
| 1.1 材料 | 第32页 |
| 1.2 方法 | 第32-36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-46页 |
| 2.1 火龙果花蕾及花药发育动态变化 | 第36-37页 |
| 2.2 不同发育时期火龙果小孢子细胞学特征变化 | 第37-39页 |
| 2.3 小孢子发育时期对花药培养诱导率的影响 | 第39-41页 |
| 2.4 低温预处理对花药培养诱导率的影响 | 第41页 |
| 2.5 不同生长调节剂及蔗糖浓度对花药诱导的影响 | 第41-42页 |
| 2.6 花药愈伤组织增殖 | 第42-43页 |
| 2.7 愈伤组织再分化不定芽 | 第43-44页 |
| 2.8 生根培养 | 第44-45页 |
| 2.9 炼苗与移栽 | 第45页 |
| 2.10 不定芽SRAP分子标记分析 | 第45-46页 |
| 3 讨论 | 第46-48页 |
| 3.1 火龙果小孢子发育期的固定 | 第46页 |
| 3.2 不同小孢子发育时期对应的形态特征 | 第46-47页 |
| 3.3 火龙果胚状体的诱导 | 第47页 |
| 3.4 火龙果花药培养 | 第47-48页 |
| 3.5 不同外植体对火龙果愈伤组织诱导和增殖的影响 | 第48页 |
| 3.6 火龙果花药愈伤组织再分化率较低 | 第48页 |
| 3.7 花药愈伤组织再分化的不定芽的遗传稳定性 | 第48页 |
| 4 小结 | 第48-50页 |
| 第三章 火龙果茎段及花药愈伤组织内源激素含量的研究 | 第50-62页 |
| 1 材料与方法 | 第50-52页 |
| 1.1 试验材料 | 第50-51页 |
| 1.2 测定方法 | 第51-52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-60页 |
| 2.1 标准曲线 | 第52-53页 |
| 2.2 不同部位愈伤组织内源ABA含量 | 第53-54页 |
| 2.3 不同部位愈伤组织内源IAA含量 | 第54-55页 |
| 2.4 不同部位愈伤组织内源GA_3含量 | 第55-56页 |
| 2.5 不同部位愈伤组织内源ZT含量 | 第56-57页 |
| 2.6 不同愈伤组织内源激素的总离子流 | 第57-59页 |
| 2.7 火龙果不同材料的内源激素含量综合评价 | 第59-60页 |
| 3 讨论 | 第60-61页 |
| 3.1 内源激素对愈伤组织诱导率的影响 | 第60页 |
| 3.2 内源激素对再分化不定芽的影响 | 第60-61页 |
| 3.3 胚性愈伤组织的发生与内源激素含量 | 第61页 |
| 4 小结 | 第61-62页 |
| 第四章 农杆菌介导LTP基因导入火龙果愈伤组织的遗传转化研究 | 第62-79页 |
| 1 材料与方法 | 第63-68页 |
| 1.1 试验材料 | 第63-65页 |
| 1.2 方法 | 第65-68页 |
| 2 结果与分析 | 第68-77页 |
| 2.1 重组质粒活化、提取及双酶切 | 第68-70页 |
| 2.2 转化农杆菌结果 | 第70-71页 |
| 2.3 Kan选择压筛选试验结果 | 第71-72页 |
| 2.4 农杆菌浸染时间的筛选 | 第72页 |
| 2.5 共培养时间筛选 | 第72-73页 |
| 2.6 脱菌培养抗菌素的筛选 | 第73-74页 |
| 2.7 抗性愈伤组织的选择培养 | 第74-76页 |
| 2.8 抗性愈伤组织的PCR检测 | 第76页 |
| 2.9 抗性愈伤组织的分化 | 第76-77页 |
| 3 讨论 | 第77-78页 |
| 3.1 LTP表达载体的构建 | 第77页 |
| 3.2 火龙果抗性愈伤组织未能分化不定芽 | 第77页 |
| 3.3 胚状体途径 | 第77-78页 |
| 3.4 Kan选择压 | 第78页 |
| 4 小结 | 第78-79页 |
| 第五章 农杆菌介导LTP基因导入火龙果茎段的遗传转化研究 | 第79-95页 |
| 1 材料与方法 | 第79-84页 |
| 1.1 受体材料 | 第79页 |
| 1.2 重组质粒和相关菌株 | 第79页 |
| 1.3 试验仪器及药品 | 第79-80页 |
| 1.4 培养基及培养条件 | 第80-81页 |
| 1.5 方法 | 第81-84页 |
| 2 结果与分析 | 第84-93页 |
| 2.1 茎段对Kan的敏感性 | 第84-86页 |
| 2.2 农杆菌浸染时间的筛选 | 第86-87页 |
| 2.3 共培养时间筛选 | 第87-88页 |
| 2.4 脱菌培养Cef浓度的筛选 | 第88页 |
| 2.5 转基因过程及抗性芽生长 | 第88-89页 |
| 2.6 抗性芽的分子特征 | 第89-92页 |
| 2.7 增殖、生根、炼苗及移栽 | 第92-93页 |
| 3 讨论 | 第93-94页 |
| 3.1 转化体系对农杆菌介导的火龙果遗传转化的影响 | 第93页 |
| 3.2 农杆菌浸染时间对不同受体的影响 | 第93页 |
| 3.3 Southern杂交中探针的选择 | 第93页 |
| 3.4 火龙果抗性芽DNA提取 | 第93-94页 |
| 4 小结 | 第94-95页 |
| 第六章 转LTP基因火龙果再生植株的抗寒生理研究 | 第95-104页 |
| 1 材料和方法 | 第95-96页 |
| 1.1 实验材料 | 第95-96页 |
| 1.2 实验方法 | 第96页 |
| 1.3 数据分析与处理 | 第96页 |
| 2 结果与分析 | 第96-102页 |
| 2.1 低温胁迫下转基因植株的形态变化 | 第96-98页 |
| 2.2 低温胁迫下转基因植株的REC变化 | 第98页 |
| 2.3 低温胁迫下转基因植株的MDA含量变化 | 第98-99页 |
| 2.4 低温胁迫下转基因植株的Pro含量变化 | 第99-100页 |
| 2.5 低温胁迫下转基因植株的保护酶活性变化 | 第100-102页 |
| 3 讨论 | 第102-103页 |
| 3.1 转基因植株形态的变化 | 第102页 |
| 3.2 转基因植株REC的变化 | 第102页 |
| 3.3 转基因植株MDA含量的变化 | 第102页 |
| 3.4 转基因植株Pro含量的变化 | 第102-103页 |
| 3.5 转基因植株保护酶活性的变化 | 第103页 |
| 3.6 LTP基因对火龙果的影响 | 第103页 |
| 4 小结 | 第103-104页 |
| 第七章 结论、创新点及研究展望 | 第104-107页 |
| 1 结论 | 第104-105页 |
| 2 创新点 | 第105页 |
| 3 研究展望 | 第105-107页 |
| 参考文献 | 第107-127页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文和参加的主要学术活动 | 第127-129页 |
| 发表的文章 | 第127-128页 |
| 参编规划 | 第128页 |
| 学习培训 | 第128页 |
| 项目资助 | 第128-129页 |
| 致谢 | 第129页 |
