摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
缩略词 | 第14-15页 |
第一章 前言 | 第15-37页 |
1.1 引言 | 第15-16页 |
1.2 枇杷果实品质研究 | 第16-22页 |
1.2.1 枇杷果实品质划分 | 第16-17页 |
1.2.2 枇杷果实品质相关研究 | 第17-22页 |
1.2.2.1 外观品质 | 第17-18页 |
1.2.2.2 质地品质 | 第18页 |
1.2.2.3 风味品质 | 第18-20页 |
1.2.2.4 营养品质 | 第20-22页 |
1.3 分子标记在果树上的应用 | 第22-35页 |
1.3.1 常见分子标记及特点 | 第22-25页 |
1.3.1.1 SSR标记 | 第22页 |
1.3.1.2 ISSR标记 | 第22-23页 |
1.3.1.3 SRAP标记 | 第23页 |
1.3.1.4 RAPD标记 | 第23-24页 |
1.3.1.5 SNP标记 | 第24页 |
1.3.1.6 RFLP标记 | 第24页 |
1.3.1.7 AFLP标记 | 第24-25页 |
1.3.2 分子标记在果树上的应用 | 第25-35页 |
1.3.2.1 种质资源保存 | 第25页 |
1.3.2.2 品种鉴定 | 第25-26页 |
1.3.2.3 亲缘关系确定 | 第26-28页 |
1.3.2.4 遗传多样性分析 | 第28-31页 |
1.3.2.5 遗传图谱构建 | 第31-32页 |
1.3.2.6 指纹图谱构建 | 第32-33页 |
1.3.2.7 基因定位 | 第33-34页 |
1.3.2.8 分子标记辅助选择 | 第34-35页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第35页 |
1.5 研究内容 | 第35-37页 |
第二章 枇杷突变体生物学特性及果实品质分析 | 第37-51页 |
2.1 材料与方法 | 第38-40页 |
2.1.1 试验材料 | 第38页 |
2.1.2 试验方法 | 第38-40页 |
2.1.2.1 物候期记录及叶片形态指标分析测定 | 第38-39页 |
2.1.2.2 果实品质测定 | 第39-40页 |
2.1.3 数据分析 | 第40页 |
2.2 结果与分析 | 第40-48页 |
2.2.1 物候期 | 第40-41页 |
2.2.2 叶形态分析 | 第41-42页 |
2.2.3 果实品质分析 | 第42-48页 |
2.2.3.1 外观品质 | 第42页 |
2.2.3.2 质地品质 | 第42-43页 |
2.2.3.3 风味品质 | 第43-46页 |
2.2.3.4 营养品质 | 第46-47页 |
2.2.3.5 TBY-1与TBW-1的果实品质 | 第47-48页 |
2.3 讨论 | 第48-51页 |
第三章 枇杷突变体分子标记鉴定 | 第51-71页 |
3.1 试验材料 | 第52页 |
3.2 主要仪器设备 | 第52-53页 |
3.3 试验方法 | 第53-61页 |
3.3.1 DNA提取 | 第53-54页 |
3.3.2 引物选择 | 第54-58页 |
3.3.2.1 SSR引物 | 第54-57页 |
3.3.2.2 ISSR引物 | 第57页 |
3.3.2.3 SRAP引物及扩增 | 第57-58页 |
3.3.3 PCR扩增 | 第58-59页 |
3.3.3.1 SSR-PCR扩增 | 第58-59页 |
3.3.3.2 ISSR-PCR扩增 | 第59页 |
3.3.4 电泳检测 | 第59-60页 |
3.3.5 差异片段回收、纯化 | 第60页 |
3.3.5.1 割胶、检测 | 第60页 |
3.3.5.2 PCR扩增及回收纯化 | 第60页 |
3.3.6 差异片段克隆、测序 | 第60-61页 |
3.3.6.1 受体菌培养 | 第60页 |
3.3.6.2 目的DNA片段与pEASYTM-T3(TransGen Biotech)载体的连接 | 第60-61页 |
3.3.6.3 质粒转化 | 第61页 |
3.3.6.4 重组菌落PCR鉴定检测目的片段是否连接到克隆载体上,重组菌落进行PCR鉴定 | 第61页 |
3.3.6.5 质粒提取及测序 | 第61页 |
3.4 结果分析 | 第61-68页 |
3.4.1 DNA检测结果分析 | 第61-62页 |
3.4.2 分子标记多态性分析 | 第62-64页 |
3.4.2.1 SSR多态性分析 | 第62-63页 |
3.4.2.2 ISSR多态性分析 | 第63-64页 |
3.4.2.3 SRAP多态性分析 | 第64页 |
3.4.3 多态性片段的扩增和克隆 | 第64-68页 |
3.5 讨论 | 第68-71页 |
第四章 NAD~+-SDH基因CDS序列克隆及QPCR相对表达 | 第71-83页 |
4.1 试验材料 | 第72页 |
4.2 试验方法 | 第72-76页 |
4.2.1 样品采集与处理 | 第72-73页 |
4.2.2 果糖和山梨醇含量测定 | 第73页 |
4.2.3 NAD-SDH酶活性测定 | 第73页 |
4.2.4 总RNA提取 | 第73-74页 |
4.2.4.1 总RNA提取 | 第73-74页 |
4.2.4.2 总RNA浓度检测 | 第74页 |
4.2.5 NAD~+-SDH基因CDS片段克隆 | 第74-75页 |
4.2.5.1 引物设计 | 第74-75页 |
4.2.5.2 RT-PCR扩增 | 第75页 |
4.2.5.3 NAD~+-SDH基因CDS克隆与鉴定 | 第75页 |
4.2.5.4 测序 | 第75页 |
4.2.6 实时荧光定量PCR分析 | 第75-76页 |
4.2.6.1 总RNA提取 | 第75页 |
4.2.6.2 总RNA反转录 | 第75-76页 |
4.2.6.3 引物设计 | 第76页 |
4.2.6.4 实时荧光PCR反应 | 第76页 |
4.3 结果分析 | 第76-81页 |
4.3.1 总RNA浓度检测 | 第76页 |
4.3.2 枇杷NAD~+-SDH基因的克隆 | 第76-78页 |
4.3.3 枇杷成熟果实NAD~+-SDH基因的表达 | 第78页 |
4.3.4 枇杷NAD-SDH酶活性变化 | 第78-79页 |
4.3.5 枇杷果实山梨醇和果糖含量变化 | 第79-81页 |
4.4 讨论 | 第81-83页 |
第五章 创新点与下一步工作设想 | 第83-87页 |
5.1 创新点 | 第83-85页 |
5.2 下一步工作设想 | 第85页 |
5.3 展望 | 第85-87页 |
参考文献 | 第87-103页 |
致谢 | 第103-104页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第104页 |