摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
中英文对照及英文缩写词表 | 第6-10页 |
第一章 前言 | 第10-25页 |
1.1 半乳糖凝集素概述 | 第10-19页 |
1.1.1 凝集素 | 第10-11页 |
1.1.2 半乳糖凝集素的表达分布 | 第11-12页 |
1.1.3 半乳糖凝集素的结构 | 第12-15页 |
1.1.4 半乳糖凝集素的功能 | 第15-17页 |
1.1.5 半乳糖凝集素的亲和配体 | 第17-19页 |
1.2 半乳糖凝集素-13 研究进展 | 第19-23页 |
1.2.1 半乳糖凝集素-13 的表达分布 | 第19页 |
1.2.2 半乳糖凝集素-13 的计算机模拟结构 | 第19-21页 |
1.2.3 半乳糖凝集素-13 的基因突变 | 第21-22页 |
1.2.4 半乳糖凝集素-13 的功能 | 第22页 |
1.2.5 半乳糖凝集素-13 与妊娠相关疾病的关系 | 第22-23页 |
1.3 选题依据和研究意义 | 第23-25页 |
第二章 半乳糖凝集素-13 表达载体的构建 | 第25-34页 |
2.1 材料、试剂与仪器 | 第25-27页 |
2.1.1 实验材料 | 第25页 |
2.1.2 实验试剂 | 第25-26页 |
2.1.3 试剂配制方法 | 第26页 |
2.1.4 实验仪器 | 第26-27页 |
2.2 实验方法 | 第27-30页 |
2.2.1 引物设计 | 第27页 |
2.2.2 目的片段的扩增以及回收 | 第27-28页 |
2.2.3 感受态细胞的制备 | 第28页 |
2.2.4 半乳糖凝集素-13 的T-A克隆 | 第28-29页 |
2.2.5 Gal13pET28a重组质粒构建 | 第29-30页 |
2.3 实验结果 | 第30-32页 |
2.3.1 引物序列 | 第30页 |
2.3.2 目的基因的PCR | 第30-31页 |
2.3.3 T-A克隆阳性菌落检验 | 第31页 |
2.3.4 重组质粒阳性菌株检验 | 第31-32页 |
2.4 讨论 | 第32-34页 |
第三章 半乳糖凝集素-13 表达纯化 | 第34-46页 |
3.1 材料、试剂与仪器 | 第34-36页 |
3.1.1 实验材料 | 第34页 |
3.1.2 实验试剂 | 第34-35页 |
3.1.3 试剂配置方法 | 第35-36页 |
3.1.4 实验仪器 | 第36页 |
3.2 实验方法 | 第36-39页 |
3.2.1 诱导表达目的蛋白 | 第36-37页 |
3.2.2 蛋白透析 | 第37页 |
3.2.3 蛋白浓缩 | 第37-38页 |
3.2.4 蛋白质检测 | 第38页 |
3.2.5 蛋白质稳定性检测 | 第38-39页 |
3.3 实验结果 | 第39-44页 |
3.3.1 目的蛋白的诱导表达 | 第39-41页 |
3.3.2 蛋白质的稳定性检测 | 第41-44页 |
3.4 讨论 | 第44-46页 |
第四章 半乳糖凝集素-13 晶体结构与生物活性分析 | 第46-69页 |
4.1 材料、试剂与仪器 | 第46-49页 |
4.1.1 实验材料 | 第46页 |
4.1.2 实验试剂 | 第46-47页 |
4.1.3 实验试剂及配制 | 第47-48页 |
4.1.4 实验仪器 | 第48-49页 |
4.2 实验方法 | 第49-53页 |
4.2.1 半乳糖凝集素-13 蛋白结晶 | 第49-50页 |
4.2.2 半乳糖凝集素-13 二聚化检测 | 第50页 |
4.2.3 半乳糖凝集素-13 红细胞凝集实验 | 第50-51页 |
4.2.4 生物膜干涉检测 | 第51页 |
4.2.5 糖修饰琼脂糖凝胶检测 | 第51-52页 |
4.2.6 半乳糖凝集素-13 细胞转染 | 第52-53页 |
4.3 实验结果 | 第53-65页 |
4.3.1 半乳糖凝集素-13 蛋白结晶 | 第53-58页 |
4.3.2 半乳糖凝集素-13 的二聚化 | 第58-61页 |
4.3.3 半乳糖凝集素-13 与糖的相互作用 | 第61-64页 |
4.3.4 半乳糖凝集素-13 在细胞中的分布 | 第64-65页 |
4.4 讨论 | 第65-69页 |
全文总结 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
在读期间公开发表论文及著作情况 | 第78页 |