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多组学研究大西洋鲑抵御杀鲑气单胞菌的分子机制

摘要第5-8页
Abstract第8-11页
第一章 绪论第16-26页
    1.1 研究内容简介第16-18页
        1.1.1 大西洋鲑第16-17页
        1.1.2 杀鲑气单胞菌第17-18页
    1.2 杀鲑气单胞菌在大西洋鲑中的研究进展第18-19页
        1.2.1 杀鲑气单胞菌致病机制研究第18-19页
    1.3 代谢组学相关研究进展第19-20页
    1.4 蛋白质组学相关研究进展第20-21页
    1.5 磷酸化蛋白质组学的研究进展第21页
    1.6 本研究的目的意义与研究思路第21-26页
        1.6.1 目的与意义第21-22页
        1.6.2 科学问题第22页
        1.6.3 研究内容与技术路线第22-24页
        1.6.4 预期成果第24页
        1.6.5 本章小结第24-26页
第二章 ~1H核磁共振(NMR)光谱法分析感染A. salmonocida的大西洋鲑肾脏中差异代谢物的情况第26-42页
    2.1 前言第26页
    2.2 材料与方法第26-30页
        2.2.1 杀鲑气单胞菌的提取第26-27页
        2.2.2 杀鲑气单胞菌感染大西洋鲑并提取组织第27页
        2.2.3 实时定量PCR(RT-qPCR)定量杀鲑气单胞菌第27-28页
        2.2.4 ~1H核磁共振(NMR)光谱分析法分析大西洋鲑的肾脏组织第28-29页
        2.2.5 数据分析第29-30页
    2.3 实验结果第30-39页
        2.3.1 RT-q PCR检测大西洋鲑感染杀鲑气单胞菌的结果第30-31页
        2.3.2 ~1H核磁共振(NMR)光谱分析法分析肾脏组织第31-33页
        2.3.3 多元化分析第33-39页
    2.4 讨论第39-41页
    2.5 本章小结第41-42页
第三章 通过蛋白质组学中的iTRAQ技术分析感染A. salmonocida的大西洋鲑肾脏中差异蛋白的情况第42-68页
    3.1 前言第42页
    3.2 材料与方法第42-48页
        3.2.1 杀鲑气单胞菌的提取第42页
        3.2.2 大西洋鲑感染实验和肾脏组织的提取第42-43页
        3.2.3 RT-qPCR定量杀鲑气单胞菌第43页
        3.2.4 大西洋鲑肾脏组织中总蛋白的提取和胰蛋白酶水解蛋白第43-44页
        3.2.5 iTRAQ标记样品及蛋白质组学分析第44-45页
        3.2.6 构建蛋白功能网络互作图第45页
        3.2.7 实时定量PCR分析基因表达第45-48页
    3.3 实验结果第48-64页
        3.3.1 RT-qPCR检测大西洋鲑感染杀鲑气单胞菌的结果第48-49页
        3.3.2 蛋白的鉴定及功能注释第49-56页
        3.3.3 蛋白网络互作分析第56-62页
        3.3.4 RT-qPCR分析基因的转录表达第62-64页
    3.4 讨论第64-67页
        3.4.1 对蛋白互作图中筛选的9种蛋白的功能分析及预测第64-66页
        3.4.2 对蛋白互作图中其他蛋白进行功能分析及预测第66-67页
    3.5 本章小结第67-68页
第四章 研究ALDH7A1蛋白在感染A. salmonocida的大西洋鲑肾脏中的作用第68-98页
    4.1 前言第68页
    4.2 材料与方法第68-77页
        4.2.1 杀鲑气单胞菌的提取第68-69页
        4.2.2 实验所用大西洋鲑第69页
        4.2.3 序列分析第69页
        4.2.4 原核表达ALDH7A1蛋白第69-75页
        4.2.5 ELISA分析rALDH7A1与A. salmonicida的相互作用第75-76页
        4.2.6 定量大西洋鲑不同组织中ALDH7A1的基因表达量第76页
        4.2.7 大西洋鲑体外感染实验第76-77页
        4.2.8 大西洋鲑体累积死亡率实验分析第77页
    4.3 结果第77-94页
        4.3.1 ALDH7A1蛋白的序列分析第77-80页
        4.3.2 rALDH7A1蛋白的验证即其与A salmonicida的结合第80-81页
        4.3.3 ALDH7A1在大西洋鲑各组织中的表达情况第81-82页
        4.3.4 检测大西洋鲑中A. salmonicida的感染情况第82-84页
        4.3.5 NF-kB,P-38 MAPK,Caspase-3和TNF-α在大西洋鲑的肾、肝和脾三个组织中的基因相对表达量第84-92页
        4.3.6 rALDH7A1蛋白对感染杀鲑气单胞菌的大西洋鲑的影响(累积死亡率)第92-94页
    4.4 讨论第94-96页
    4.5 本章小结第96-98页
第五章 通过磷酸化蛋白质组学分析感染A. salmonocida的大西洋鲑肾脏中差异磷酸化蛋白及磷酸化位点的情况第98-122页
    5.1 前言第98页
    5.2 材料与方法第98-100页
        5.2.1 杀鲑气单胞菌的提取第98-99页
        5.2.2 大西洋鲑感染实验和肾脏组织的提取第99页
        5.2.3 RT-qPCR定量杀鲑气单胞菌第99页
        5.2.4 蛋白的提取和胰蛋白酶的肽段水解第99页
        5.2.5 TMT标记蛋白并进行磷酸化蛋白质组的数据分析第99-100页
        5.2.6 对磷酸化激酶和基序进行分析第100页
    5.3 实验结果第100-117页
        5.3.1 多元化分析磷酸化蛋白质组学第100-111页
        5.3.2 Motif和蛋白激酶分析第111-114页
        5.3.3 磷酸化蛋白网络分析第114-117页
    5.4 讨论第117-120页
    5.5 本章小结第120-122页
第六章 总结与展望第122-126页
    6.1 总结第122-123页
    6.2 创新性第123页
    6.3 存在问题第123-124页
    6.4 研究展望第124-126页
参考文献第126-138页
致谢第138-140页
作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果第140-141页

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