| 摘要 | 第14-16页 |
| ABSTRACT | 第16-17页 |
| 前言 | 第18-27页 |
| 参考文献 | 第25-27页 |
| 第一章 牛血清白蛋白分析方法的建立 | 第27-36页 |
| 一 材料与仪器 | 第27页 |
| 二 方法与结果 | 第27-33页 |
| 1 牛血清白蛋白分析方法的建立 | 第27-32页 |
| 1.1 最大吸收波长的选择 | 第27-28页 |
| 1.2 CBBG及CBBG-BSA复合物的吸收曲线 | 第28页 |
| 1.3 不同质量浓度BSA溶液标准曲线的制备 | 第28-32页 |
| 2 牛血清白蛋白溶液稳定性的考察 | 第32-33页 |
| 2.1 温度的影响 | 第32页 |
| 2.2 超声的影响 | 第32-33页 |
| 2.3 光照的影响 | 第33页 |
| 三 讨论与小结 | 第33-35页 |
| 1 讨论 | 第33-34页 |
| 2 小结 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-36页 |
| 第二章 牛血清白蛋白脂质体的设计和制备 | 第36-57页 |
| 一 材料与仪器 | 第36页 |
| 二 方法与结果 | 第36-54页 |
| 1 蛋白类药物脂质体在包封率测定时需要考虑的问题 | 第36-38页 |
| 2 离心-参照法的建立及确证 | 第38-40页 |
| 2.1 线性关系考察 | 第38-39页 |
| 2.2 稳定性考察 | 第39页 |
| 2.3 精密度考察 | 第39页 |
| 2.4 回收率考察 | 第39页 |
| 2.5 离心-参照法测定脂质体的包封率 | 第39-40页 |
| 3 其他四种常用方法测定BSA脂质体的包封率 | 第40-42页 |
| 3.1 凝胶过滤法 | 第40页 |
| 3.2 超速离心法 | 第40-41页 |
| 3.3 超滤法 | 第41页 |
| 3.4 透析法 | 第41-42页 |
| 4 牛血清白蛋白脂质体的处方研究 | 第42-48页 |
| 4.1 逆向蒸发法制备牛血清白蛋白脂质体 | 第42页 |
| 4.2 处方因素考察 | 第42-46页 |
| 4.3 工艺因素考察 | 第46-48页 |
| 5 牛血清白蛋白脂质体处方的优化 | 第48-54页 |
| 5.1 处方优化实验结果 | 第49-50页 |
| 5.2 牛血清白蛋白脂质体的基本性质考察 | 第50-54页 |
| 三 讨论与小结 | 第54-55页 |
| 1 讨论 | 第54页 |
| 2 小结 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-57页 |
| 第三章 荆豆凝集素基本性质的考察 | 第57-71页 |
| 一 材料与仪器 | 第57页 |
| 二 方法与结果 | 第57-67页 |
| 1 荆豆凝集素含量测定方法的建立 | 第57-59页 |
| 1.1 高浓度UEAI溶液标准曲线的制备 | 第57-58页 |
| 1.2 低浓度UEAI溶液标准曲线的制备 | 第58-59页 |
| 2 荆豆凝集素凝集活性的检测 | 第59-61页 |
| 2.1 实验红细胞悬液的配制 | 第59页 |
| 2.2 实验红细胞悬液标准曲线的绘制 | 第59-60页 |
| 2.3 实验红细胞在悬液中的沉降监测 | 第60页 |
| 2.4 UEAI凝集活性的测定 | 第60-61页 |
| 3 荆豆凝集素的稳定性考察 | 第61-63页 |
| 3.1 温度 | 第61-62页 |
| 3.2 酸、碱稳定性 | 第62-63页 |
| 4 荆豆凝集素的安全性评价 | 第63-64页 |
| 4.1 急性毒性实验 | 第63页 |
| 4.2 毒性反应情况 | 第63页 |
| 4.3 给药前后体重变化情况 | 第63页 |
| 4.4 内脏结构观察 | 第63页 |
| 4.5 组织学考察 | 第63-64页 |
| 5 荆豆凝集素细胞毒性的研究 | 第64-67页 |
| 5.1 试验用溶液的配制 | 第64-65页 |
| 5.2 Caco-2细胞模型的建立 | 第65-66页 |
| 5.3 体外细胞毒活性试验 | 第66-67页 |
| 三 讨论与小结 | 第67-69页 |
| 1 讨论 | 第67-68页 |
| 2 小结 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-71页 |
| 第四章 荆豆凝集素修饰的牛血清白蛋白脂质体的制备 | 第71-91页 |
| 一 材料与仪器 | 第71-72页 |
| 二 方法与结果 | 第72-86页 |
| 1 胆固醇半琥珀酸酯(CHS)的合成 | 第72-73页 |
| 1.1 合成方法 | 第72页 |
| 1.2 CHS的表征 | 第72-73页 |
| 2 荆豆凝集素修饰的牛血清白蛋白脂质体(UEAI-LIP)的制备 | 第73-75页 |
| 2.1 含有胆固醇半琥珀酸酯的脂质体制备(CHS-LIP) | 第73-74页 |
| 2.2 荆豆凝集素在脂质体表面的修饰 | 第74-75页 |
| 3 荆豆凝集素修饰脂质体的连接率测定方法的建立 | 第75-77页 |
| 3.1 琼脂糖凝胶柱Sepharose4B的制备 | 第75页 |
| 3.2 专属性考察 | 第75-76页 |
| 3.3 柱回收率考察 | 第76-77页 |
| 3.4 连接率的测定 | 第77页 |
| 4 荆豆凝集素修饰的牛血清白蛋白脂质体的处方研究 | 第77-79页 |
| 4.1 活化时间的选择 | 第77-78页 |
| 4.2 孵化时间的选择 | 第78页 |
| 4.3 UEAI浓度的选择 | 第78-79页 |
| 5 UEAI-LIP基本性质的考察 | 第79-86页 |
| 5.1 形态观察 | 第79页 |
| 5.2 粒径测定 | 第79-80页 |
| 5.3 Zeta电位测定 | 第80页 |
| 5.4 荆豆凝集素修饰于脂质体表面后的活性检测 | 第80-81页 |
| 5.5 释放度的测定 | 第81-83页 |
| 5.6 单糖抑制体外凝集实验 | 第83-84页 |
| 5.7 UEAI-LIP长期放置稳定性考察 | 第84页 |
| 5.8 UEAI-LIP酶解稳定性考察 | 第84-86页 |
| 三 讨论与小结 | 第86-89页 |
| 1 讨论 | 第86-88页 |
| 2 小结 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-91页 |
| 第五章 荆豆凝集素修饰脂质体的粘附性评价 | 第91-109页 |
| 一 材料与仪器 | 第91-92页 |
| 二 方法与结果 | 第92-105页 |
| 1 NBD-PE含量测定方法的建立 | 第92-93页 |
| 1.1 荧光光谱的测定 | 第92页 |
| 1.2 标准曲线的绘制 | 第92页 |
| 1.3 精密度考察 | 第92-93页 |
| 1.4 回收率考察 | 第93页 |
| 2 荧光标记脂质体的制备与性质 | 第93-95页 |
| 2.1 荧光标记脂质体(NBD-LIP)的制备 | 第93页 |
| 2.2 荧光标记荆豆凝集素修饰脂质体(NBD-UEAI-LIP)的制备 | 第93页 |
| 2.3 荧光标记脂质体的性质 | 第93-95页 |
| 3 体内外粘附性评价 | 第95-105页 |
| 3.1 生物样品荧光分析方法的建立 | 第95-100页 |
| 3.2 体外粘附性实验 | 第100-103页 |
| 3.3 体内粘附性实验 | 第103-105页 |
| 三 讨论与小结 | 第105-107页 |
| 1 讨论 | 第105-106页 |
| 2 小结 | 第106-107页 |
| 参考文献 | 第107-109页 |
| 第六章 荆豆凝集素修饰脂质体的免疫学研究 | 第109-125页 |
| 一 材料与仪器 | 第109页 |
| 二 方法与结果 | 第109-119页 |
| 1 酶联免疫间接法的建立 | 第109-112页 |
| 1.1 间接法试剂的备 | 第110页 |
| 1.2 间接法的建立 | 第110-111页 |
| 1.3 标准曲线的制备 | 第111-112页 |
| 2 口服脂质体的制备及性质的考察 | 第112-113页 |
| 2.1 口服脂质体的制备 | 第112页 |
| 2.2 脂质体基本性质的考察 | 第112-113页 |
| 3 免疫实验的建立 | 第113-115页 |
| 3.1 免疫程序 | 第113-114页 |
| 3.2 免疫方案 | 第114页 |
| 3.3 生物样本的采集 | 第114-115页 |
| 4 小鼠体内的免疫应答 | 第115-119页 |
| 4.1 抗原BSA以不同载体口服免疫后小鼠产生的免疫应答 | 第115-116页 |
| 4.2 不同粒径脂质体口服免疫后小鼠产生的免疫应答 | 第116-117页 |
| 4.3 考察以包裹不同抗原的脂质体口服免疫后小鼠的免疫应答 | 第117-118页 |
| 4.4 考察BSA抗原以肌注和口服途径免疫后小鼠的免疫应答 | 第118-119页 |
| 三 讨论与小结 | 第119-123页 |
| 1 讨论 | 第119-123页 |
| 2 小结 | 第123页 |
| 参考文献 | 第123-125页 |
| 第七章 荆豆凝集素修饰脂质体装载出血热疫苗的验证 | 第125-134页 |
| 一 材料与仪器 | 第125页 |
| 二 方法与结果 | 第125-131页 |
| 1 酶联免疫双抗体夹心法的建立 | 第125-127页 |
| 1.1 双抗体夹心法的原理 | 第125-126页 |
| 1.2 双抗体夹心法中的试剂准备 | 第126页 |
| 1.3 双抗体夹心法的建立 | 第126页 |
| 1.4 标准曲线的制备 | 第126-127页 |
| 2 装载出血热疫苗的口服脂质体制备 | 第127-128页 |
| 3 免疫实验的建立 | 第128-129页 |
| 3.1 免疫方案 | 第128页 |
| 3.2 生物样本的采集 | 第128-129页 |
| 4 小鼠体内的免疫应答 | 第129-131页 |
| 三 讨论与小结 | 第131-132页 |
| 1 讨论 | 第131-132页 |
| 2 小结 | 第132页 |
| 参考文献 | 第132-134页 |
| 全文结论 | 第134-136页 |
| 创新点与展望 | 第136-137页 |
| 攻读博士学位期间发表论文情况 | 第137-138页 |
| 致谢 | 第138-139页 |
| 缩略词表 | 第139-141页 |
| 附录 | 第141-146页 |
