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猪FcRn介导IgG转运及TGEV感染激活NF-κB信号通路调控FcRn表达的研究

摘要第9-11页
ABSTRACT第11-13页
缩略语表(Abbreviation)第14-16页
第1章 文献综述第16-34页
    1.1 FcRn的结构第16-17页
    1.2 FcRn的分布第17-18页
    1.3 FcRn的配体第18-20页
    1.4 FcRn的功能第20-26页
        1.4.1 FcRn介导IgG的双向转运第20-23页
        1.4.2 FcRn介导特异性IgG转运及抗原—抗体复合物的递呈第23-24页
        1.4.3 FcRn保护IgG和白蛋白免受降解的作用第24-26页
    1.5 FcRn在疾病治疗中的作用第26-27页
        1.5.1 调节配体与FcRn的结合能力第26-27页
        1.5.2 黏膜递呈作用第27页
    1.6 猪传染性胃肠炎病毒第27-30页
        1.6.1 TGEV的基因组结构第27-28页
        1.6.2 TGEV生物学特点第28页
        1.6.3 TGEV主要编码蛋白及功能第28-29页
        1.6.4 TGEV感染的致病机理第29-30页
    1.7 NF-κB信号通路第30-32页
        1.7.1 NF-κB/Rel家族第30-31页
        1.7.2 NF-κB的激活第31-32页
    1.8 MAPK信号通路第32-34页
第2章 猪小肠上皮细胞FcRn表达及功能研究第34-57页
    2.1 研究目的与意义第34页
    2.2 实验材料第34-38页
        2.2.1 细胞、毒株第34页
        2.2.2 主要试剂第34-35页
        2.2.3 抗体及Western blot所需实验材料第35页
        2.2.4 细胞胞转模型相关材料第35页
        2.2.5 细胞培养基及其配置第35页
        2.2.6 细菌培养基及其配置第35-36页
        2.2.7 主要缓冲液与相关试剂及其配置第36-37页
        2.2.8 主要实验仪器及设备第37-38页
        2.2.9 分子生物学分析软件第38页
        2.2.10 统计学方法第38页
    2.3 实验方法第38-44页
        2.3.1 猪FcRn的克隆第38-40页
        2.3.2 IgG和IgY的生物素标记第40页
        2.3.3 生物素标记的IgG(biotin-IgG)体外胞转实验第40-41页
        2.3.4 Western blot检测biotin-IgG跨膜转运第41页
        2.3.5 定量ELISA检测第41-42页
        2.3.6 激光共聚焦显微镜观察第42-43页
        2.3.7 间接免疫荧光实验第43页
        2.3.8 免疫共沉淀第43-44页
        2.3.9 猪传染性胃肠炎病毒的增殖第44页
        2.3.10 病毒滴度的测定第44页
    2.4 结果与分析第44-54页
        2.4.1 FcRn基因的克隆、序列分析与表达第44-47页
        2.4.2 FcRn的分布第47-48页
        2.4.3 猪FcRn介导IgG双向胞转作用第48-50页
        2.4.4 竞争性抑制FcRn介导IgG胞转作用第50-51页
        2.4.5 FcRn与IgG在IPEC-J2细胞系上的共定位第51页
        2.4.6 FcRn与IgG结合的pH依赖性第51-52页
        2.4.7 FcRn介导特异性IgG转运中和TGEV作用第52-54页
    2.5 讨论第54-57页
        2.5.1 FcRn的基因序列第54-55页
        2.5.2 FcRn在细胞上的分布第55页
        2.5.3 FcRn介导IgG的双向胞转作用第55-56页
        2.5.4 FcRn介导特异性IgG转运第56-57页
第3章 TGEV感染激活NF-κB信号通路调控FcRn表达研究第57-79页
    3.1 研究目的与意义第57页
    3.2 实验材料第57-60页
        3.2.1 细胞、毒株第57页
        3.2.2 主要试剂第57-58页
        3.2.3 抗体及Western blot所需实验材料第58页
        3.2.4 细胞转染相关材料第58页
        3.2.5 凝胶迁移(EMSA)实验相关材料第58页
        3.2.6 主要缓冲液与相关试剂及其配置第58页
        3.2.7 载体与质粒第58-59页
        3.2.8 主要实验仪器及设备第59-60页
        3.2.9 分子生物学信息软件第60页
    3.3 实验方法第60-65页
        3.3.1 猪传染性胃肠炎病毒的增殖第60页
        3.3.2 病毒滴度的测定第60页
        3.3.3 IPEC-J2细胞总RNA提取及反转录反应第60页
        3.3.4 荧光定量RT-PCR检测基因mRNA水平第60-61页
        3.3.5 Western blot实验第61页
        3.3.6 双荧光素酶报告实验第61页
        3.3.7 激光共聚焦显微镜观察第61页
        3.3.8 启动子荧光素酶报告载体的构建第61-62页
        3.3.9 染色质免疫共沉淀(CHIP)实验第62-63页
        3.3.10 凝胶迁移(EMSA)实验第63-65页
        3.3.11 统计学方法第65页
    3.4 结果与分析第65-76页
        3.4.1 TGEV感染IPEC-J2细胞诱导FcRn上调表达第65-66页
        3.4.2 TGEV感染IPEC-J2细胞激活NF-κB信号通路第66-67页
        3.4.3 TGEV感染上调FcRn的表达与NF-κB信号通路有关第67-69页
        3.4.4 FcRn转录起始位点的分析第69-70页
        3.4.5 FcRn启动子区域p65结合位点分析第70-71页
        3.4.6 猪FcRn启动子在IPEC-J2细胞中的转录激活分析第71-72页
        3.4.7 超表达猪p65能够激活FcRn启动子荧光素酶活性第72-73页
        3.4.8 CHIP实验分析FcRn基因启动子区p65结合位点第73-75页
        3.4.9 EMSA实验进一步验证p65结合位点第75-76页
    3.5 讨论第76-79页
        3.5.1 TGEV感染激活NF-κB信号通路第76-77页
        3.5.2 FcRn表达调控的研究第77-78页
        3.5.3 FcRn上调表达的生物学意义第78-79页
第4章 结论第79-80页
参考文献第80-96页
致谢第96-97页
附录第97-99页
个人资料第99页
教育经历第99页
在读期间发表的主要文章第99-100页

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