| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 综述 | 第10-16页 |
| 1.1 免疫系统研究 | 第10页 |
| 1.2 PGN肽聚糖 | 第10-11页 |
| 1.3 肽聚糖识别蛋白 | 第11-14页 |
| 1.3.1 肽聚糖识别蛋白的分类 | 第12页 |
| 1.3.2 肽聚糖识别蛋白的结构 | 第12-13页 |
| 1.3.3 肽聚糖识别蛋白的功能 | 第13-14页 |
| 1.3.4 肽聚糖识别蛋白的研究现状 | 第14页 |
| 1.4 本研究目的和意义 | 第14-16页 |
| 第二章 三角帆蚌肽聚糖识别蛋白基因的克隆及表达 | 第16-59页 |
| 1. 前言 | 第16页 |
| 2. 材料和方法 | 第16-29页 |
| 2.1 材料 | 第16-17页 |
| 2.2 主要仪器和试剂 | 第17页 |
| 2.2.1 菌株和质粒 | 第17页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第17页 |
| 2.2.3 主要仪器设备 | 第17页 |
| 2.3 实验方法 | 第17-29页 |
| 2.3.1 三角帆蚌总RNA的提取 | 第17-18页 |
| 2.3.2 HcPGRP short、HcPGRP long和HcPGRP S2基因的克隆 | 第18-21页 |
| 2.3.2.1 5'UTR的克隆 | 第18-20页 |
| 2.3.2.2 3'UTR的克隆 | 第20-21页 |
| 2.3.3 HcPGRP short、HcPGRP long和HcPGRP S2基因的序列分析 | 第21页 |
| 2.3.4 实时荧光定量PCR检测三角帆蚌HcPGRP short、HcPGRP long及HcPGRP S2基因在三角帆蚌不同组织中的表达 | 第21-22页 |
| 2.3.5 肽聚糖和嗜水气单胞菌刺激后HcPGRP short、HcPGRP long及HcPGRP S2基因的表达 | 第22页 |
| 2.3.6 HcPGRP S2和HcPGRP long基因的原核表达 | 第22-26页 |
| 2.3.6.1 重组质粒pET30- HcPGRP S2和pET30-HcPGRP long的构建 | 第23-25页 |
| 2.3.6.2 pET30- HcPGRP S2和pET30-HcPGRP long在大肠杆菌中的诱导表达 | 第25-26页 |
| 2.3.7 重组蛋白pET30- HcPGRP S2和pET30-HcPGRP long的纯化 | 第26-29页 |
| 2.3.7.1 pET30- HcPGRP S2包涵体的变性与复性 | 第26-27页 |
| 2.3.7.2 重组蛋白pET30- HcPGRP S2的纯化 | 第27-28页 |
| 2.3.7.3 pET30- HcPGRP long包涵体的变性溶解与纯化 | 第28-29页 |
| 2.3.7.4 pET30- HcPGRP long包涵体的复性 | 第29页 |
| 3、实验结果 | 第29-55页 |
| 3.1 三角帆蚌中总RNA的提取 | 第29-30页 |
| 3.2 基因的cDNA全长及氨基酸序列 | 第30-35页 |
| 3.2.1 HcPGRP short基因的cDNA序列及推导的氨基酸序列 | 第30-32页 |
| 3.2.2 HcPGRP long基因的cDNA序列及推导的氨基酸序列 | 第32-33页 |
| 3.2.3 HcPGRP S2基因的cDNA序列及推导的氨基酸序列 | 第33-35页 |
| 3.3 HcPGRP short、HcPGRP long、HcPGRP S2氨基酸序列的同源性比较 | 第35页 |
| 3.4 HcPGRP short、HcPGRP long、HcPGRP S2氨基酸序列特征 | 第35-38页 |
| 3.5 HcPGRP short、HcPGRP long、HcPGRP S2基因的系统进化树 | 第38-39页 |
| 3.6 HcPGRP short、HcPGRP long和HcPGRP S2基因的定量表达 | 第39-51页 |
| 3.6.1 HcPGRP short、HcPGRP long和HcPGRP S2基因的组织表达 | 第42页 |
| 3.6.2 PBS、肽聚糖和嗜水气单胞菌刺激三角帆蚌后HcPGRP short、HcPGRP long和HcPGRP S2基因的表达变化 | 第42-51页 |
| 3.6.2.1 PBS、肽聚糖和嗜水气单胞菌刺激后HcPGRP short的表达 | 第43-46页 |
| 3.6.2.2 PBS、肽聚糖和嗜水气单胞菌刺激后HcPGRP long的表达 | 第46-49页 |
| 3.6.2.3 PBS、肽聚糖和嗜水气单胞菌刺激后HcPGRP S2的表达 | 第49-51页 |
| 3.7 HcPGRP long和HcPGRP S2基因的原核表达及纯化 | 第51-55页 |
| 3.7.1 HcPGRP long基因的原核表达及纯化 | 第51-52页 |
| 3.7.2 HcPGRP S2基因的原核表达及纯化 | 第52-55页 |
| 4. 讨论 | 第55-57页 |
| 5. 结论与展望 | 第57-59页 |
| 5.1 结论 | 第57-58页 |
| 5.2 展望 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
