| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 1 引言 | 第12-32页 |
| ·Ghrelin 研究概述 | 第12页 |
| ·Ghrelin 的发现 | 第12页 |
| ·Ghrelin 的分子结构及其在组织中的分布 | 第12-15页 |
| ·Ghrelin 的分子结构 | 第12-13页 |
| ·Ghrelin 的分布 | 第13-15页 |
| ·Ghrelin 受体及定位 | 第15-16页 |
| ·Ghrelin 受体 | 第15页 |
| ·Ghrelin 受体定位 | 第15-16页 |
| ·Ghrelin 的作用机制 | 第16页 |
| ·Ghrelin 的生理功能 | 第16-23页 |
| ·促进GH 释放 | 第16-17页 |
| ·影响神经内分泌 | 第17页 |
| ·促进摄食，调节体重，参与能量平衡的调节 | 第17-18页 |
| ·对胃肠功能和胃酸分泌的影响 | 第18页 |
| ·对细胞增殖的影响 | 第18页 |
| ·Ghrelin 对胰岛功能的影响 | 第18-19页 |
| ·Ghrelin 与学习和记忆功能 | 第19页 |
| ·Ghrelin 与睡眠 | 第19页 |
| ·Ghrelin 在生殖系统中的作用 | 第19-21页 |
| ·Ghrelin 与人类疾病的关系 | 第21-23页 |
| ·MAPK 信号通路 | 第23-28页 |
| ·MAPK 信号通路概述 | 第24-26页 |
| ·MAPK 信号通路与卵母细胞 | 第26-28页 |
| ·绵羊Ghrelin | 第28页 |
| ·Ghrelin 前景与展望 | 第28-30页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第30页 |
| ·本论文的实验路线设计 | 第30-32页 |
| 2 实验一 Ghrelin 对绵羊卵母细胞体外成熟的影响 | 第32-45页 |
| ·材料与方法 | 第32-37页 |
| ·材料及卵母细胞的体外成熟培养 | 第32-33页 |
| ·仪器和试剂 | 第33页 |
| ·卵母细胞Ghrelin 受体（GHS-R）的检测 | 第33-35页 |
| ·卵母细胞体外成熟的判定标准 | 第35-36页 |
| ·Ghrelin、D-Lys3-GHRP-6对绵羊卵母细胞成熟的影响 | 第36页 |
| ·统计分析 | 第36-37页 |
| ·结果 | 第37-43页 |
| ·不同成熟培养时间COCs 状态 | 第37页 |
| ·成熟培养24h 具有明显极体的卵母细胞 | 第37页 |
| ·卵母细胞减数分裂各个时期的核相 | 第37-38页 |
| ·卵母细胞Ghrelin 受体（GHS-R）的检测 | 第38-39页 |
| ·不同浓度的Ghrelin对绵羊卵母细胞体外成熟的影响 | 第39-40页 |
| ·不同浓度D-Lys3-GHRP-6对绵羊卵母细胞体外成熟的影响 | 第40-41页 |
| ·Ghrelin与D-Lys3-GHRP-6协同对绵羊卵母细胞体外成熟的影响 | 第41-43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 3 实验二 Ghrelin、D-Lys3-GHRP-6 在绵羊卵母细胞体外成熟过程中对 MAPK(ERK1/2)mRNA 及蛋白表达的影响 | 第45-74页 |
| ·材料与方法 | 第45-59页 |
| ·实验材料 | 第45页 |
| ·仪器和试剂 | 第45-46页 |
| ·实时荧光定量PCR检测Ghrelin、D-Lys3-GHRP-6对绵羊卵母细胞MAPK(ERK1/2 mRNA表达的影响 | 第46-54页 |
| ·Western blotting 检测 Ghrelin、D-Lys3-GHRP-6 对绵羊卵母细胞体外成熟 过程中 MAPK(ERK1/2)蛋白的表达 | 第54-59页 |
| ·结果 | 第59-70页 |
| ·实时荧光定量PCR 检测Ghrelin、D-Lys3-GHRP-6对绵羊卵母细胞MAPK(ERK1/2) mRNA表达的影响 | 第59-67页 |
| ·Western blotting 检测 Ghrelin、D-Lys3-GHRP-6 对绵羊卵母细胞体外成熟 过程中 MAPK(ERK1/2)蛋白的表达 | 第67-70页 |
| ·讨论 | 第70-72页 |
| ·小结 | 第72-74页 |
| 4 实验三 Ghrelin、D-Lys3-GHRP-6 在绵羊卵母细胞体外成熟过程中对 p90rsk mRNA、 蛋白表达的影响 | 第74-93页 |
| ·材料与方法 | 第74-81页 |
| ·实验材料 | 第74页 |
| ·仪器和试剂 | 第74-75页 |
| ·实时荧光定量PCR 检测Ghrelin、D-Lys3-GHRP-6对绵羊卵母细胞p90rsk mRNA 表达的影响 | 第75-80页 |
| ·Western blotting 检测 Ghrelin、D-Lys3-GHRP-6 对绵羊卵母细胞体外成熟 过程中 p90rsk蛋白的表达 | 第80-81页 |
| ·结果 | 第81-91页 |
| ·实时荧光定量PCR 检测Ghrelin、D-Lys3-GHRP-6对绵羊卵母细胞p90rsk mRNA 表达的影响 | 第81-87页 |
| ·Western blotting 检测 Ghrelin、D-Lys3-GHRP-6 对绵羊卵母细胞体外成熟 过程中 p90rsk-1蛋白的表达 | 第87-91页 |
| ·讨论 | 第91-92页 |
| ·小结 | 第92-93页 |
| 5 实验四 Ghrelin 在绵羊卵母细胞体外成熟过程中对 Bcl-2、Bax 的mRNA 表达的影响 | 第93-113页 |
| ·材料与方法 | 第93-99页 |
| ·实验材料 | 第93页 |
| ·仪器和试剂 | 第93-94页 |
| ·绵羊卵母细胞的体外成熟培养及卵母细胞的获得 | 第94页 |
| ·绵羊卵母细胞总RNA 的提取及检测 | 第94页 |
| ·实时荧光定量PCR（Real Time PCR） | 第94-97页 |
| ·实时荧光定量PCR 产物cDNA 的序列测定 | 第97-98页 |
| ·Ghrelin、D-Lys3-GHRP-6对绵羊卵母细胞Bcl-2、Bax mRNA表达的影响 | 第98-99页 |
| ·结果 | 第99-111页 |
| ·绵羊卵母细胞不同培养时间绵羊卵母细胞总RNA 的检测 | 第99页 |
| ·Bcl-2、Bax、β-actin 的实时荧光定量 PCR 产物的特异性及鉴定 | 第99-102页 |
| ·质粒的酶切分析 | 第102-103页 |
| ·实时荧光定量PCR 产物的测序 | 第103-107页 |
| ·实时荧光定量PCR 检测Ghrelin、D-Lys3-GHRP-6对绵羊卵母细胞Bcl-2 mRNA 表达的影响 | 第107-109页 |
| ·实时荧光定量PCR 检测Ghrelin、D-Lys3-GHRP-6对绵羊卵母细胞Bax mRNA表 达的影响 | 第109-111页 |
| ·讨论 | 第111页 |
| ·小结 | 第111-113页 |
| 6 全文总结 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114-115页 |
| 参考文献 | 第115-126页 |
| 作者简介 | 第126页 |
