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MIR-378抑制人类结肠直肠癌细胞增殖及L-OHP-诱导的凋亡的研究

中文摘要第4-7页
abstract第7-9页
英文缩略词表第13-14页
第1章 绪论第14-32页
    1.1 MicroRNAs第14-17页
        1.1.1 MiRNAs 的发现第14-15页
        1.1.2 MiRNAs 的合成、转录与作用第15-16页
        1.1.3 miRNA 的变异第16-17页
        1.1.4 MiRNA 的研究方法第17页
    1.2 miRNA 在结肠直肠癌中的研究第17-26页
        1.2.1 MiRNA 与结肠直肠癌的发生第17-20页
        1.2.2 miRNA 与结肠直肠癌的转移第20-22页
        1.2.3 miRNA 与遗传性结肠直肠癌第22-23页
        1.2.4 miRNA 与结肠直肠癌的诊断第23-25页
        1.2.5 miRNA 与结肠直肠癌化疗第25-26页
        1.2.6 miRNA与结肠直肠癌的预后第26页
    1.3 MiR-378 与癌症第26-28页
    1.4 CDC40 的作用第28-29页
    1.5 结肠直肠癌药物奥沙利铂第29-31页
    1.6 研究假设第31页
    1.7 研究路线第31-32页
第2章 实验材料与方法第32-54页
    2.1 实验材料第32-36页
        2.1.1 组织及血清样本第32页
        2.1.2 细胞系第32页
        2.1.3 实验用鼠第32页
        2.1.4 主要试剂第32-35页
        2.1.5 主要实验仪器第35-36页
    2.2 实验方法第36-53页
        2.2.1 细胞培养第36页
        2.2.2 RNA 提取、反转录和实时定量 PCR第36-37页
        2.2.3 反转录及实时荧光定量 PCR 检测第37-39页
        2.2.4 MiRNA 及 siRNA 转染第39页
        2.2.5 Western Blotting第39-42页
        2.2.6 克隆形成实验第42-43页
        2.2.7 MTT 活性检测第43页
        2.2.8 流式检测细胞周期第43-44页
        2.2.9 Annexin-V/7-AAD 凋亡检测第44-45页
        2.2.10 质粒构建第45-48页
        2.2.11 双荧光素酶报告分析系统第48-49页
        2.2.12 过表达 CDC40第49页
        2.2.13 原位末端标记法(TUNNEL)检测细胞凋亡第49-50页
        2.2.14 裸鼠成瘤步骤第50-51页
        2.2.15 组织免疫组化第51-53页
    2.3 数据分析第53-54页
第3章 实验结果第54-74页
    3.1 miR-378 在人类结肠直肠癌中的表达及生物学意义第54-58页
        3.1.1 MiR-378 在结肠直肠癌组织及细胞中的表达第54-56页
        3.1.2 过表达 miR-378 抑制细胞生长第56-57页
        3.1.3 过表达 miR-378 阻抑结肠直肠癌细胞周期的进程第57-58页
    3.2 miR-378 通过 CDC40 调节结肠直肠癌细胞的生长及周期第58-69页
        3.2.1 靶基因鉴定第58-59页
        3.2.2 过表达miR-378抑制 CDC40的蛋白和 mRNA的 表达第59-60页
        3.2.3 miR-378 靶向结合 CDC40 mRNA 的 3’UTR第60-62页
        3.2.4 siRNA 抑制 CDC40 蛋白及 RNA 水平第62-63页
        3.2.5 敲减 CDC40 抑制细胞生长及周期第63-65页
        3.2.6 过表达 CDC40 恢复 CDC40 的表达水平第65-66页
        3.2.7 miR-378 通过 CDC40 调控细胞生长第66-67页
        3.2.8 结肠直肠癌组织中 miR-378 与 CDC40 的表达反相关第67-69页
    3.3 过表达 miR-378 提高 L-OHP 诱导的凋亡第69-72页
        3.3.1 过表达 miR-378 对凋亡无显著性影响第69-70页
        3.3.2 过表达 miR-378 提高 L-OHP 对细胞的抑制第70-71页
        3.3.3 过表达 miR-378 提高 L-OHP 诱导的凋亡第71-72页
    3.4 体内动物实验验证 miR-378 对直肠结肠癌细胞生长的影响第72-74页
        3.4.1 过表达 miR-378 抑制肿瘤的生长第72-74页
第4章 讨论第74-78页
第5章 结论第78-79页
参考文献第79-91页
综述第91-100页
    参考文献第96-100页
作者简介及在读期间科研成果第100-102页
致谢第102页

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