摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-7页 |
第1章 绪论 | 第12-22页 |
1.1 概述 | 第12-15页 |
1.1.1 谷胱甘肽结构,性质和分布 | 第12-14页 |
1.1.2 谷胱甘肽的生理功能 | 第14页 |
1.1.3 谷胱甘肽应用 | 第14-15页 |
1.2 谷胱甘肽的工业化现状 | 第15-17页 |
1.2.1 萃取法 | 第15-16页 |
1.2.2 化学合成法 | 第16页 |
1.2.3 发酵法 | 第16页 |
1.2.4 酶法 | 第16-17页 |
1.3 谷胱甘肽的检测方法 | 第17-19页 |
1.3.1 碘量法 | 第17-18页 |
1.3.2 分光光度法 | 第18页 |
1.3.3 高效液相色谱法 | 第18-19页 |
1.4 国内外研究概况 | 第19-20页 |
1.4.1 氨基酸与氧胁迫 | 第19页 |
1.4.2 ATP再生系统 | 第19-20页 |
1.5 研究意义与内容 | 第20-22页 |
1.5.1 研究意义 | 第20-21页 |
1.5.2 主要实验内容 | 第21-22页 |
第2章 响应面优化GSH合成条件 | 第22-34页 |
2.1 引言 | 第22页 |
2.2 实验原料和仪器 | 第22-24页 |
2.2.1 菌种 | 第22页 |
2.2.2 试剂 | 第22-23页 |
2.2.3 主要仪器 | 第23-24页 |
2.2.4 所配制溶液 | 第24页 |
2.3 实验方法 | 第24-26页 |
2.3.1 GSH标准曲线 | 第24-25页 |
2.3.2 细胞培养 | 第25页 |
2.3.3 GSH测定方法 | 第25-26页 |
2.3.4 单因素实验 | 第26页 |
2.4 结果与讨论 | 第26-33页 |
2.4.1 单因素对酶法合成GSH转化率的影响 | 第26-28页 |
2.4.2 响应面优化酶法合成谷胱甘肽反应液条件 | 第28-33页 |
2.4.3 响应面最优值预测 | 第33页 |
2.4.4 回归模型结果验证 | 第33页 |
2.5 本章小结 | 第33-34页 |
第3章 能量策略对酶法合成谷胱甘肽效率影响 | 第34-45页 |
3.1 引言 | 第34页 |
3.2 原料和方法 | 第34-36页 |
3.2.1 菌种 | 第34页 |
3.2.2 试剂 | 第34-35页 |
3.2.3 主要仪器 | 第35-36页 |
3.2.4 酶反应液和所配制溶液 | 第36页 |
3.3 实验方法 | 第36-37页 |
3.3.1 葡萄糖标准曲线 | 第36页 |
3.3.2 细胞培养 | 第36页 |
3.3.3 不同碳源和浓度对酶催化合成GSH的影响 | 第36-37页 |
3.3.4 葡萄糖及其添加策略对酶催化合成GSH的影响 | 第37页 |
3.3.5 添加不同浓度腺苷对酶催化合成GSH的影响 | 第37页 |
3.3.6 组合添加腺苷和流加葡萄糖对酶催化合成GSH的影响 | 第37页 |
3.4 结果与讨论 | 第37-43页 |
3.4.1 酶法反应液里残糖浓度的测量 | 第37-38页 |
3.4.2 不同碳源和浓度对GSH合成的影响 | 第38-39页 |
3.4.3 葡萄糖能量供应策略对酶催化合成GSH的影响 | 第39-42页 |
3.4.3.1 不同初始葡萄糖浓度对酶催化合成GSH的影响 | 第39页 |
3.4.3.2 过程补加葡萄糖对酶催化合成GSH的影响 | 第39-40页 |
3.4.3.3 葡萄糖补加时机对酶催化合成GSH的影响 | 第40-41页 |
3.4.3.4 葡萄糖多点流加策略对酶催化合成GSH的影响 | 第41-42页 |
3.4.4 添加能量前体腺苷对酶催化合成GSH的影响 | 第42-43页 |
3.4.5 组合腺苷添加和葡萄糖流加能量策略对酶催化合成GSH影响 | 第43页 |
3.5 本章小结 | 第43-45页 |
第4章 前体氨基酸添加方式对酶法合成GSH影响 | 第45-56页 |
4.1 引言 | 第45页 |
4.2 实验原料和仪器 | 第45-47页 |
4.2.1 菌种 | 第45页 |
4.2.2 试剂 | 第45-46页 |
4.2.3 主要仪器 | 第46-47页 |
4.2.4 所配制溶液 | 第47页 |
4.3 实验方法 | 第47-48页 |
4.3.1 不同时间添加不同浓度氨基酸对酶法合成GSH含量的影响 | 第47页 |
4.3.2 前体氨酸添加策略 | 第47页 |
4.3.3 验证实验 | 第47-48页 |
4.4 结果与讨论 | 第48-55页 |
4.4.1 初始前体氨基酸添加量对酶法合成GSH影响 | 第48页 |
4.4.2 反应过程不同时间补加不同量谷氨酸对酶法合成GSH影响 | 第48-50页 |
4.4.3 反应过程不同时间补加不同量半胱氨酸对酶法合成GSH影响 | 第50-51页 |
4.4.4 反应过程不同时间补加不同量氨基酸对酶法合成GSH影响 | 第51-52页 |
4.4.5 反应过程前体氨基酸补加策略对酶法合成GSH影响 | 第52-54页 |
4.4.6 实验结果验证 | 第54-55页 |
4.5 本章小结 | 第55-56页 |
第5章 两阶段酶法合成GSH的研究 | 第56-63页 |
5.1 引言 | 第56页 |
5.2 实验原料和仪器 | 第56-58页 |
5.2.1 菌种 | 第56页 |
5.2.2 试剂 | 第56-57页 |
5.2.3 主要仪器 | 第57-58页 |
5.3 实验方法 | 第58-59页 |
5.3.1 GSH浓度对γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶活性的影响 | 第58页 |
5.3.2 甘氨酸延迟添加时间研究 | 第58页 |
5.3.3 两阶段反应实验设计 | 第58-59页 |
5.4 结果与讨论 | 第59-62页 |
5.4.1 GSH浓度对γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶活性的影响 | 第59-60页 |
5.4.2 甘氨酸延迟添加时间对GSH转化率的影响 | 第60-61页 |
5.4.3 两阶段反应对酶法合成GSH转化率的影响 | 第61-62页 |
5.5 本章小结 | 第62-63页 |
第6章 结论与展望 | 第63-65页 |
6.1 结论 | 第63-64页 |
6.2 进一步工作方向 | 第64-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-70页 |
硕士研究生期间研究成果 | 第70页 |