| 摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 中文文摘 | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 绪论 | 第10-18页 |
| 1.1 红树植物内生真菌及其次级代谢产物的研究进展 | 第10-13页 |
| 1.1.1 红树植物及红树植物内生真菌 | 第10页 |
| 1.1.2 来源于红树植物内生真菌的次级代谢产物 | 第10-12页 |
| 1.1.3 红树内生真菌A123及其次级代谢产物的研究 | 第12-13页 |
| 1.2 真菌聚酮生物合成研究进展 | 第13-16页 |
| 1.2.1 聚酮化合物的重要地位 | 第13页 |
| 1.2.2 真菌聚酮生物合成基因簇克隆 | 第13-14页 |
| 1.2.3 基因簇功能验证策略 | 第14-16页 |
| 1.3 本课题研究背景、内容及意义 | 第16-18页 |
| 第一章 PKS1、PKS2基因干扰载体构建 | 第18-34页 |
| 第一节 材料与方法 | 第19-26页 |
| 1.1 实验材料 | 第19-20页 |
| 1.1.1 菌种和质粒 | 第19页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第19页 |
| 1.1.3 培养基与溶液 | 第19页 |
| 1.1.4 主要仪器 | 第19-20页 |
| 1.2 实验方法 | 第20-26页 |
| 1.2.1 PKS1、PKS2基因片段的克隆 | 第20-25页 |
| 1.2.2 含PKS1、PKS2目的片段的RNA干扰载体的构建 | 第25-26页 |
| 第二节 结果与分析 | 第26-33页 |
| 2.1 DAM产生菌中PKS1正向片段的克隆 | 第26-27页 |
| 2.2 DAM产生菌中PKS1反向片段的克隆 | 第27-29页 |
| 2.3 DAM产生菌中PKS2正向片段的克隆 | 第29-31页 |
| 2.4 DAM产生菌中PKS2反向片段的克隆 | 第31-33页 |
| 2.5 含PKS1、PKS2正反目的片段的干扰载体的构建 | 第33页 |
| 第三节 小结与讨论 | 第33-34页 |
| 第二章 PKS1、PKS2基因沉默突变株的获得及产物分析 | 第34-44页 |
| 第一节 材料与方法 | 第34-37页 |
| 1.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 1.1.1 菌种和质粒 | 第34页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第34页 |
| 1.1.3 培养基与溶液 | 第34-35页 |
| 1.1.4 主要仪器 | 第35页 |
| 1.2 实验方法 | 第35-37页 |
| 1.2.1 PKS1、PKS2基因沉默突变株的获得 | 第35-36页 |
| 1.2.2 阳性突变株的产物分析 | 第36-37页 |
| 第二节 结果与分析 | 第37-43页 |
| 2.1 PKS1、PKS2基因沉默突变株的获得 | 第37-40页 |
| 2.1.1 拟茎点霉G818原生质体的制备 | 第37页 |
| 2.1.2 pSilent-P1和pSilent-P2转化原生质体转化子抗性分离 | 第37-38页 |
| 2.1.3 pSilent-P1和pSilent-P2转化后干扰突变株的筛选及鉴定 | 第38-40页 |
| 2.2 干扰突变株产物分析 | 第40-43页 |
| 第三节 小结与讨论 | 第43-44页 |
| 第三章 PKS1和PKS2基因干扰的转录比较 | 第44-56页 |
| 第一节 材料与方法 | 第44-48页 |
| 1.1 实验材料 | 第44-45页 |
| 1.1.1 菌株 | 第44页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第44页 |
| 1.1.3 培养基 | 第44-45页 |
| 1.1.4 主要仪器 | 第45页 |
| 1.2 实验方法 | 第45-48页 |
| 1.2.1 原始高产菌株和阳性突变菌株总RNA的提取 | 第45-46页 |
| 1.2.2 RNA的反转录及半定量实验 | 第46-47页 |
| 1.2.3 RT-PCR(定量)实验 | 第47页 |
| 1.2.4 Phomopsis sp.G818中PKS1、PKS2基因表达差异分析 | 第47-48页 |
| 第二节 结果与分析 | 第48-51页 |
| 2.1 拟茎点霉G818和干扰突变株总RNA的提取及质量检测 | 第48-49页 |
| 2.2 干扰突变菌株干扰基因的转录 | 第49-50页 |
| 2.3 干扰突变菌株实时荧光定量PCR | 第50-51页 |
| 第三节 小结与讨论 | 第51-56页 |
| 第四章 结论 | 第56-58页 |
| 附录 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第64-66页 |
| 致谢 | 第66-68页 |
| 个人简历 | 第68-69页 |
