| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 1 前言 | 第10-26页 |
| 1.1 橡胶树概述 | 第10-12页 |
| 1.1.1 橡胶树的经济价值 | 第10页 |
| 1.1.2 橡胶树的生长习性 | 第10页 |
| 1.1.3 我国橡胶树育种进展 | 第10-12页 |
| 1.1.4 橡胶树育种面临的问题 | 第12页 |
| 1.2 植物开花调控机理 | 第12-18页 |
| 1.2.1 开花决定 | 第13-17页 |
| 1.2.2 花的发端 | 第17-18页 |
| 1.2.3 花器官的发育 | 第18页 |
| 1.3 橡胶树开花机制研究进展 | 第18-19页 |
| 1.4 FCA基因的研究现状 | 第19-23页 |
| 1.4.1 FCA蛋白结构特点 | 第19-20页 |
| 1.4.2 FCA基因剪切方式多样性 | 第20-22页 |
| 1.4.3 FCA基因调控植物开花机理 | 第22-23页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第23-25页 |
| 1.6 技术路线 | 第25-26页 |
| 2 实验器材 | 第26-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第26页 |
| 2.2 实验试材 | 第26-29页 |
| 2.3 主要实验仪器 | 第29-30页 |
| 3 实验方法 | 第30-44页 |
| 3.1 比较两种橡胶树RNA提取方法 | 第30-31页 |
| 3.1.1 橡胶树RNA提取 | 第30页 |
| 3.1.2 总RNA样品中DNA的去除 | 第30-31页 |
| 3.1.3 RNA质量检测 | 第31页 |
| 3.2 HbFCA核酸序列及其启动子的扩增 | 第31-38页 |
| 3.2.1 HbFCA-γ cDNA 3’RACE | 第31-34页 |
| 3.2.2 HbFCA-γ cDNA 5’RACE | 第34页 |
| 3.2.3 HbFCA-β cDNA 3’RACE | 第34页 |
| 3.2.4 HbFCA高保真全长cDNA扩增 | 第34-35页 |
| 3.2.5 扩增HbFCA DNA全长 | 第35-36页 |
| 3.2.6 HbFCA启动子扩增 | 第36-38页 |
| 3.3 FCA进化分析 | 第38页 |
| 3.4 HbFCA表达分析 | 第38-39页 |
| 3.4.1 定量模板的准备 | 第38页 |
| 3.4.2 引物的设计及阳性菌体的确定 | 第38页 |
| 3.4.3 质粒的提取 | 第38页 |
| 3.4.4 标准曲线的制备 | 第38-39页 |
| 3.4.5 实时荧光定量 | 第39页 |
| 3.5 HbFCA遗传转化 | 第39-44页 |
| 3.5.1 表达载体的构建 | 第39-42页 |
| 3.5.2 电击转化 | 第42页 |
| 3.5.3 侵染 | 第42-44页 |
| 3.5.4 转化植株鉴定 | 第44页 |
| 4 实验结果及分析 | 第44-69页 |
| 4.1 RNA提取方法的确定 | 第44-46页 |
| 4.1.1 RNA沉淀方法的比较 | 第44-45页 |
| 4.1.2 CTAB-NaAc法在橡胶树其它组织总RNA提取中应用 | 第45-46页 |
| 4.2 HbFCA基因序列分析 | 第46-56页 |
| 4.2.1 RACE结果 | 第46-47页 |
| 4.2.2 HbFCA多变剪切模式图 | 第47-49页 |
| 4.2.3 HbFCA多变剪切序列ORF预测 | 第49-52页 |
| 4.2.4 HbFCA生物信息学分析 | 第52-56页 |
| 4.3 HbFCA与其它物种的同源性分析 | 第56-62页 |
| 4.3.1 氨基酸序列比对分析 | 第56-61页 |
| 4.3.2 进化树结果分析 | 第61-62页 |
| 4.4 HbFCA启动子扩增结果及序列分析 | 第62-65页 |
| 4.5 HbFCA荧光定量表达 | 第65-66页 |
| 4.6 载体构建结果及转化分析 | 第66-69页 |
| 4.6.1 表达载体构建结果 | 第66-67页 |
| 4.6.2 表达载体pXCSHAStrep-35S：HbFCAγ1转化结果 | 第67-68页 |
| 4.6.3 表达载体pCAMBIA2300-HbFCA启动子：Gus-NOS转化结果 | 第68-69页 |
| 5 讨论 | 第69-73页 |
| 5.1 HbFCA剪切的多样性及保守性探讨 | 第69-70页 |
| 5.2 关于橡胶树HbFCA启动子功能的讨论 | 第70-71页 |
| 5.3 关于HbFCA表达的探讨 | 第71-72页 |
| 5.4 关于HbFCA遗传转化结果的探讨 | 第72页 |
| 5.5 关于HbFCA在橡胶研究中应用的讨论 | 第72-73页 |
| 6 结论 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
