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东亚飞蝗早期感知蝗绿僵菌的机制研究

中文摘要第3-6页
英文摘要第6-8页
1 绪论第11-21页
    1.1 引言第11-12页
    1.2 研究背景及研究进展第12-19页
        1.2.1 昆虫的免疫防卫系统第12-15页
        1.2.2 昆虫的酚氧化酶系统第15-16页
        1.2.3 蝗虫免疫系统的研究进展第16页
        1.2.4 昆虫固有免疫的发生时间第16-17页
        1.2.5 高通量测序的原理及其应用第17-19页
    1.3 研究目的第19页
    1.4 研究内容和技术路线第19-20页
        1.4.1 主要研究内容第19-20页
        1.4.2 技术路线第20页
    1.5 本研究创新之处第20-21页
2 材料与方法第21-33页
    2.1 材料第21-23页
        2.1.1 供试菌株第21页
        2.1.2 供试昆虫第21页
        2.1.3 主要设备和仪器第21-22页
        2.1.4 主要试剂第22页
        2.1.5 培养基和溶液第22页
        2.1.6 主要使用的软件第22-23页
    2.2 东亚飞蝗免疫组织的转录组分析第23-27页
        2.2.1 蝗绿僵菌孢悬液的制备及东亚飞蝗的侵染第23页
        2.2.2 东亚飞蝗免疫组织的分离第23页
        2.2.3 免疫组织总RNA的提取及其质量的检测第23-25页
        2.2.4 东亚飞蝗免疫组织转录组高通量测序、注释及其序列分析第25-27页
    2.3 差异表达基因中免疫相关基因的分析第27页
    2.4 测序数据的定量验证第27-29页
    2.5 PPO上游丝氨酸蛋白酶基因的干扰第29-33页
        2.5.1 丝氨酸蛋白酶基因dsRNA的合成第29-31页
        2.5.2 dsRNA的注射第31-33页
3 结果与分析第33-49页
    3.1 蝗绿僵菌在东亚飞蝗体表的生长分化和侵染阶段的确定第33-34页
    3.2 RNA样品的制备及质量检测第34-36页
        3.2.1 脂肪体总RNA的提取及质量检测第34-35页
        3.2.2 血细胞总RNA的提取及质量检测第35-36页
    3.3 Illumina测序及其质量评估第36-37页
    3.4 基因的鉴定、功能注释及分类第37-39页
    3.5 蝗绿僵菌侵染不同阶段免疫组织的差异表达基因分析第39-46页
        3.5.1 脂肪体在蝗绿僵菌侵染不同时期的差异表达基因分析第39-43页
        3.5.2 血细胞在蝗绿僵菌侵染不同时期的差异表达基因分析第43-46页
    3.6 免疫相关基因的RT-qPCR验证第46-47页
    3.7 PPO通路上游丝氨酸蛋白酶基因的干扰第47-49页
4 讨论第49-54页
    4.1 蝗绿僵菌诱导的东亚飞蝗免疫反应过程中侵染时期的确定第49页
    4.2 蝗绿僵菌侵染过程中宿主脂肪体差异基因的变化第49-51页
    4.3 蝗绿僵菌侵染过程中宿主血细胞差异表达基因的变化第51-53页
    4.4 关于PPO通路上游丝氨酸蛋白酶基因的干扰第53-54页
5 结论以及后续工作建议第54-56页
致谢第56-57页
参考文献第57-63页
附录第63页
    作者在攻读硕士期间发表的论文第63页

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