| 中文摘要 | 第7-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略词 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-26页 |
| 1 大豆耐盐性研究 | 第14-15页 |
| 1.1 盐胁迫对大豆的影响 | 第14-15页 |
| 1.2 大豆耐盐机制 | 第15页 |
| 2 NAC转录因子家族 | 第15-19页 |
| 2.1 NAC的结构域及其分类 | 第16页 |
| 2.2 NAC家族转录因子在植物生长发育中的作用 | 第16-17页 |
| 2.3 NAC家族转录因子在生物胁迫和非生物胁迫中的作用 | 第17页 |
| 2.4 NAC的调控 | 第17-19页 |
| 2.4.1 转录水平调控 | 第17-18页 |
| 2.4.2 转录后调控 | 第18页 |
| 2.4.3 翻译后调控 | 第18-19页 |
| 3 植物启动子研究 | 第19-22页 |
| 3.1 染色体的结构以及在转录中的作用 | 第19页 |
| 3.2 启动子的分类 | 第19-22页 |
| 3.2.1 组成型启动子 | 第19-20页 |
| 3.2.2 时空特异型启动子 | 第20-21页 |
| 3.2.3 诱导型启动子 | 第21-22页 |
| 3.2.4 合成启动子 | 第22页 |
| 4 启动子的分析方法 | 第22-26页 |
| 4.1 启动子的获得 | 第22-23页 |
| 4.2 启动子的生物信息学分析 | 第23-24页 |
| 4.3 启动子的功能分析 | 第24-26页 |
| 第二章 大豆GmST1基因盐诱导启动子研究及关键片段分析 | 第26-54页 |
| 2 大豆GmST1基因盐诱导启动子研究及关键片段分析 | 第26-54页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-29页 |
| 2.1.1 植物材料及培养条件 | 第26-27页 |
| 2.1.2 质粒载体和菌株 | 第27页 |
| 2.1.3 生化试剂及酶 | 第27页 |
| 2.1.4 分子生物学试剂盒 | 第27页 |
| 2.1.5 酶 | 第27页 |
| 2.1.6 相关引物合成及测序 | 第27页 |
| 2.1.7 实验仪器 | 第27-28页 |
| 2.1.8 培养基及试剂的配制 | 第28-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-39页 |
| 2.2.1 CTAB法提取大豆基因组DNA | 第29页 |
| 2.2.2 查询目的启动子序列,设计扩增引物 | 第29-30页 |
| 2.2.3 PCR反应克隆目的启动子 | 第30页 |
| 2.2.4 PCR反应产物回收(天根试剂盒) | 第30-31页 |
| 2.2.5 PCR回收产物与T载体连接 | 第31页 |
| 2.2.6 热激法转化大肠杆菌(E.coli)DH5α感受态 | 第31-32页 |
| 2.2.7 菌体PCR筛选转化阳性菌 | 第32页 |
| 2.2.8 质粒小提(天根试剂盒) | 第32页 |
| 2.2.9 目的启动子序列生物信息学分析 | 第32-33页 |
| 2.2.10 启动子GUS报告载体构建 | 第33页 |
| 2.2.11 农杆菌感受态制备(无菌操作) | 第33-34页 |
| 2.2.12 农杆菌的质粒转化(无菌操作) | 第34页 |
| 2.2.13 转化农杆菌的PCR验证阳性 | 第34页 |
| 2.2.14 花侵染法转化拟南芥 | 第34页 |
| 2.2.15 拟南芥种子的表面消毒 | 第34-35页 |
| 2.2.16 转基因拟南芥纯系的筛选 | 第35页 |
| 2.2.17 拟南芥基因组DNA粗提法 | 第35页 |
| 2.2.18 启动子GUS转基因拟南芥非生物胁迫处理 | 第35-36页 |
| 2.2.19 GUS组织染色 | 第36页 |
| 2.2.20 启动子LUC报告载体构建 | 第36-37页 |
| 2.2.21 启动子LUC报告载体的质粒大提 | 第37-38页 |
| 2.2.22 拟南芥原生质体制备和转化(PEG-Ca~(2+)转化法) | 第38-39页 |
| 2.2.23 启动子分段相对荧光素酶活性测定 | 第39页 |
| 2.3 结果分析 | 第39-50页 |
| 2.3.1 GmST1启动子克隆 | 第39-40页 |
| 2.3.2 GmST1启动子的序列分析 | 第40-42页 |
| 2.3.3 pGmST1：：GUS转基因拟南芥的获得 | 第42-43页 |
| 2.3.4 GmST1启动子全长的功能分析 | 第43-45页 |
| 2.3.4.1 GmST1启动子全长的活性及组织特异性分析 | 第43-44页 |
| 2.3.4.2 GmST1全长启动子的盐/ABA诱导特性分析 | 第44-45页 |
| 2.3.5 GmST1启动子不同5’缺失片段的启动子活性分析 | 第45-50页 |
| 2.3.5.1 GmST1启动子不同5’缺失片段植物表达载体的构建 | 第45-47页 |
| 2.3.5.2 利用GUS报告基因检测GmST1启动子不同5’缺失片段的活性 | 第47-49页 |
| 2.3.5.3 利用LUC报告基因定量检测GmST1启动子不同5’缺失片段的活性 | 第49-50页 |
| 2.4 讨论 | 第50-54页 |
| 第三章 大豆GmST2基因诱导型启动子的研究分析 | 第54-68页 |
| 3 大豆GmST2基因诱导型启动子的研究分析 | 第54-68页 |
| 3.1 材料与方法 | 第54页 |
| 3.1.1 材料与仪器 | 第54页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第54页 |
| 3.2 结果与分析 | 第54-65页 |
| 3.2.1 GmST2启动子克隆 | 第54-55页 |
| 3.2.2 GmST2启动子序列分析 | 第55-57页 |
| 3.2.3 pGmST2：：GUS转基因拟南芥的获得 | 第57-58页 |
| 3.2.4 GmST2启动子全长的功能分析 | 第58-60页 |
| 3.2.4.1 GmST2启动子全长的活性及组织特异性分析 | 第58页 |
| 3.2.4.2 GmST2启动子对盐和ABA的响应情况 | 第58-60页 |
| 3.2.5 GmST2启动子不同5’缺失片段的表达活性分析 | 第60-65页 |
| 3.2.5.1 GmST2启动子不同5’缺失片段植物表达载体的构建 | 第60-62页 |
| 3.2.5.2 利用GUS报告基因检测GmST2启动子不同5’缺失片段的活性 | 第62-64页 |
| 3.2.5.3 利用LUC报告基因定量检测GmST2启动子不同5’缺失片段的活性 | 第64-65页 |
| 3.3 讨论 | 第65-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 附表 论文所用引物 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 附件 | 第77页 |
