| 摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-19页 |
| 1.1 旋毛虫与旋毛虫病 | 第11-12页 |
| 1.2 丝氨酸蛋白酶抑制剂 | 第12-15页 |
| 1.2.1 丝氨酸蛋白酶抑制剂的分类 | 第12页 |
| 1.2.2 丝氨酸蛋白酶抑制剂的结构 | 第12-14页 |
| 1.2.3 丝氨酸蛋白酶抑制剂作用机制 | 第14-15页 |
| 1.3 寄生虫丝氨酸蛋白酶抑制剂研究进展 | 第15-17页 |
| 1.3.1 旋毛虫 | 第15-16页 |
| 1.3.2 捻转血矛线虫 | 第16页 |
| 1.3.3 简单异尖线虫 | 第16页 |
| 1.3.4 华支睾吸虫 | 第16-17页 |
| 1.3.5 卫氏并殖吸虫 | 第17页 |
| 1.3.6 棘球绦虫 | 第17页 |
| 1.4 研究的目的意义 | 第17-19页 |
| 2 材料和方法 | 第19-30页 |
| 2.1 材料 | 第19-21页 |
| 2.1.1 虫种 | 第19页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第19页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第19页 |
| 2.1.4 主要试剂配制 | 第19-20页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第20-21页 |
| 2.1.6 主要应用软件 | 第21页 |
| 2.2 试验方法 | 第21-30页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第21页 |
| 2.2.2 旋毛虫5日龄成虫收集 | 第21-22页 |
| 2.2.3 旋毛虫5日龄成虫总RNA提取 | 第22页 |
| 2.2.4 反转录 | 第22页 |
| 2.2.5 TsAd SPI基因的克隆 | 第22-24页 |
| 2.2.6 重组表达载体的构建 | 第24-26页 |
| 2.2.7 TsAd SPI重组蛋白的表达 | 第26页 |
| 2.2.8 表达条件的优化 | 第26-27页 |
| 2.2.9 TsAd SPI重组蛋白切胶纯化 | 第27页 |
| 2.2.10 Ts Ad SPI重组蛋白His标签western blot检测 | 第27页 |
| 2.2.11 多克隆抗体制备 | 第27-28页 |
| 2.2.12 抗体效价检测 | 第28页 |
| 2.2.13 免疫原性及反应原性分析 | 第28页 |
| 2.2.14 Ts Ad SPI重组蛋白活性分析 | 第28-29页 |
| 2.2.15 免疫组织化学法染色 | 第29-30页 |
| 3 结果 | 第30-38页 |
| 3.1 Ts Ad SPI基因的PCR扩增 | 第30页 |
| 3.2 重组克隆质粒DNA鉴定 | 第30-31页 |
| 3.3 表达载体的构建 | 第31页 |
| 3.4 重组蛋白诱导表达 | 第31-32页 |
| 3.5 重组蛋白IPTG诱导浓度优化 | 第32页 |
| 3.6 重组蛋白诱导温度优化 | 第32-33页 |
| 3.7 重组蛋白His标签检测 | 第33页 |
| 3.8 多克隆抗体效价检测 | 第33-34页 |
| 3.9 免疫原性分析 | 第34-35页 |
| 3.10 反应原性分析 | 第35页 |
| 3.11 免疫组织化学法染色 | 第35-36页 |
| 3.12 Ts Ad SPI重组蛋白抑制活性分析 | 第36-38页 |
| 3.12.1 胰蛋白酶活性抑制分析 | 第36页 |
| 3.12.2 弹性蛋白酶活性抑制分析 | 第36-37页 |
| 3.12.3 糜蛋白酶抑制活性分析 | 第37-38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| 4.1 Ts Ad SPI基因的原核表达 | 第38页 |
| 4.2 重组蛋白免疫原性与反应原性分析 | 第38-39页 |
| 4.3 重组蛋白组织定位及抑制活性分析 | 第39-40页 |
| 5 结论 | 第40-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-46页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第46页 |