摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
缩略词表 | 第9-10页 |
1 前言 | 第10-17页 |
1.1 植物非生物逆境胁迫 | 第10-11页 |
1.2 非生物逆境诱导型启动子 | 第11-15页 |
1.2.1 植物中不同类型的启动子的分离和应用 | 第11-13页 |
1.2.2 植物中非生物逆境诱导型启动子的分离和应用 | 第13-14页 |
1.2.3 非生物逆境诱导型启动子的序列结构特征 | 第14-15页 |
1.3 水稻耐低温功能基因 | 第15-16页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
2 材料方法 | 第17-22页 |
2.1 水稻材料、菌株及载体 | 第17页 |
2.2 候选启动子和候选基因 | 第17页 |
2.3 引物 | 第17-18页 |
2.4 载体构建与水稻的遗传转化 | 第18-19页 |
2.4.1 载体构建 | 第18页 |
2.4.2 水稻遗传转化 | 第18-19页 |
2.5 候选启动子基因表达量分析的材料准备 | 第19页 |
2.6 基因表达分析 | 第19-20页 |
2.7 GUS活性分析 | 第20页 |
2.7.1 GUS染色 | 第20页 |
2.7.2 GUS定量分析 | 第20页 |
2.8 转基因水稻植株的苗期低温胁迫处理 | 第20-21页 |
2.9 细胞膜透性测定 | 第21页 |
2.10 亚细胞定位分析 | 第21页 |
2.11 生物信息学分析 | 第21-22页 |
3 结果与分析 | 第22-33页 |
3.1 逆境诱导型启动子的分离与鉴定 | 第22-27页 |
3.1.1 候选启动子汇总 | 第22-23页 |
3.1.2 Real-time PCR验证候选启动子受逆境诱导的情况 | 第23-24页 |
3.1.3 候选启动子的序列分析 | 第24-25页 |
3.1.4 候选启动子的组织GUS染色 | 第25-26页 |
3.1.5 候选启动子的逆境诱导GUS活性 | 第26-27页 |
3.2 水稻低温应答基因OsLCL3(PC1)的分离与鉴定 | 第27-33页 |
3.2.1 OsLCL3 属于DUF761 超家族 | 第27-30页 |
3.2.2 OsLCL3 定位于细胞核和细胞质 | 第30-31页 |
3.2.3 超量表达OsLCL3 可以提高转基因植株的耐低温能力 | 第31-33页 |
4 讨论 | 第33-37页 |
4.1 逆境诱导型启动子的探讨 | 第33-34页 |
4.1.1 候选启动子的选择 | 第33页 |
4.1.2 启动子的调控机理 | 第33-34页 |
4.1.3 启动子的应用 | 第34页 |
4.2 OsLCL3 基因的功能探讨 | 第34-37页 |
4.2.1 OsLCL3 与其他DUF761 超家族蛋白亚细胞定位的相似性 | 第34-35页 |
4.2.2 OsLCL3 参与植物对低温的应答与防御的可能机制 | 第35页 |
4.2.3 OsLCL3 后续工作的开展 | 第35-37页 |
参考文献 | 第37-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
附录Ⅰ 部分实验的详细操作程序 | 第49-58页 |
附录Ⅱ 作者简介 | 第58页 |