| 摘要 | 第14-16页 |
| ABSTRACT | 第16-18页 |
| 缩略表 | 第26-27页 |
| 第一章 绪论 | 第27-49页 |
| 1.1 肺癌研究现状 | 第27-32页 |
| 1.1.1 肺癌的致病因素 | 第27-29页 |
| 1.1.2 肺癌病理类型 | 第29页 |
| 1.1.3 非小细胞肺癌治疗现状 | 第29-32页 |
| 1.2 抗肿瘤药物的来源-合成小分子 | 第32-35页 |
| 1.2.1 小分子化合物的获得 | 第33-34页 |
| 1.2.2 合成小分子的抗肿瘤研究进展 | 第34-35页 |
| 1.3 天然产物与新药发现 | 第35-38页 |
| 1.3.1 天然产物-抗肿瘤药物的另一个来源 | 第35-37页 |
| 1.3.2 天然产物在癌症治疗中的运用 | 第37-38页 |
| 1.4 抗肿瘤药物作用机制 | 第38-47页 |
| 1.4.1 细胞凋亡与癌症治疗 | 第39-40页 |
| 1.4.2 细胞凋亡通路 | 第40-47页 |
| 1.5 研究的主要目的、内容与意义 | 第47-49页 |
| 第二章 小分子化合物库筛选 | 第49-59页 |
| 2.1 引言 | 第49-50页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第50页 |
| 2.2.1 主要试剂 | 第50页 |
| 2.2.2 主要仪器设备 | 第50页 |
| 2.3 实验方法 | 第50-52页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第50-51页 |
| 2.3.2 MTT实验 | 第51-52页 |
| 2.4 实验结果 | 第52-57页 |
| 2.4.1 小分子化合物库筛选总结 | 第52-53页 |
| 2.4.2 小分子化合物的筛选 | 第53-54页 |
| 2.4.3 哌啶并噻吩类小分子抗肿瘤活性 | 第54-55页 |
| 2.4.4 苯并噻唑类小分子抗肿瘤作用 | 第55-57页 |
| 2.5 讨论 | 第57-58页 |
| 2.6 小结 | 第58-59页 |
| 第三章 苯并噻唑类Rosline抑制细胞生长及诱导凋亡机制研究 | 第59-89页 |
| 3.1 引言 | 第59-60页 |
| 3.2 实验方法材料 | 第60页 |
| 3.2.1 主要试剂 | 第60页 |
| 3.2.2 主要仪器设备 | 第60页 |
| 3.3 实验方法 | 第60-71页 |
| 3.3.1 MTT实验 | 第60-61页 |
| 3.3.2 细胞克隆形成实验 | 第61页 |
| 3.3.3 Rosline对A549细胞周期检测 | 第61-62页 |
| 3.3.4 Rosline对A549细胞凋亡影响检测 | 第62页 |
| 3.3.5 Bradford蛋白浓度测定 | 第62-63页 |
| 3.3.6 细胞总RNA提取 | 第63-65页 |
| 3.3.7 Caspase-8、9活性检测 | 第65-66页 |
| 3.3.8 Caspase-3/7活性检测 | 第66-67页 |
| 3.3.9 线粒体膜电位检测试剂盒 | 第67页 |
| 3.3.10 活性氧检测 | 第67-68页 |
| 3.3.11 Fluo-3AM钙离子荧光探针 | 第68页 |
| 3.3.12 蛋白电泳 | 第68-71页 |
| 3.3.13 实验结果统计学分析 | 第71页 |
| 3.4 实验结果 | 第71-82页 |
| 3.4.1 小分子Rosline A549及MRC-5的抑制作用剂量图 | 第71-72页 |
| 3.4.2 小分子对细胞凋亡和周期的影响 | 第72-74页 |
| 3.4.3 Rosline作用细胞后对MMP及Caspase家族活性影响 | 第74-75页 |
| 3.4.4 RT-PCR检测小分子作用细胞后基因表达水平的变化 | 第75-77页 |
| 3.4.5 Rosline作用细胞后ROS活性检测 | 第77-78页 |
| 3.4.6 细胞内Ca~(2+)离子浓度的变化 | 第78-79页 |
| 3.4.7 ROS活性抑制后对细胞死亡、MMP及Caspase活性的影响 | 第79-80页 |
| 3.4.8 ROS活性抑制后Rosline作用A549后相关基因及细胞周期的变化 | 第80-81页 |
| 3.4.9 Rosline作用细胞后PI3K-Akt信号通路的影响 | 第81-82页 |
| 3.5 讨论 | 第82-87页 |
| 3.6 本章小结 | 第87-89页 |
| 第四章 哌啶并噻吩类Rosbin抗肿瘤作用机制研究 | 第89-111页 |
| 4.1 引言 | 第89-90页 |
| 4.2 实验方法材料 | 第90-93页 |
| 4.2.1 主要试剂 | 第90页 |
| 4.2.2 主要仪器设备 | 第90-91页 |
| 4.2.3 试剂配制 | 第91-93页 |
| 4.3 实验方法 | 第93-101页 |
| 4.3.1 MTT实验 | 第93-94页 |
| 4.3.2 Rosbin对A549细胞周期检测 | 第94页 |
| 4.3.3 Rosbin对A549细胞凋亡影响检测 | 第94-95页 |
| 4.3.4 Bradford蛋白浓度测定 | 第95页 |
| 4.3.5 Caspase-8、9活性检测 | 第95-96页 |
| 4.3.6 Caspase-3/7活性检测 | 第96-97页 |
| 4.3.7 线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1) | 第97页 |
| 4.3.8 活性氧检测 | 第97-98页 |
| 4.3.9 Fluo-3AM钙离子荧光探针 | 第98页 |
| 4.3.10 蛋白电泳 | 第98-101页 |
| 4.3.11 实验结果统计学分析 | 第101页 |
| 4.4 实验结果与讨论 | 第101-109页 |
| 4.4.1 rosbin对A549细胞的抑制作用 | 第101-102页 |
| 4.4.2 rosbin对A549细胞的凋亡及周期的作用 | 第102-103页 |
| 4.4.3 rosbin对Caspase家族及线粒体膜电位的影响 | 第103-105页 |
| 4.4.4 rosbin处理细胞后细胞内Ca~(2+)及ROS水平的变化 | 第105-107页 |
| 4.4.5 ROS在rosbin诱导A549细胞凋亡中的作用 | 第107-108页 |
| 4.4.6 rosbin对细胞内PI3K/Akt及P38/MAPK信号通路的影响 | 第108-109页 |
| 4.5 本章小结 | 第109-111页 |
| 第五章 两种植物提取物体外抗肿瘤活性研究 | 第111-130页 |
| 5.1 引言 | 第111-112页 |
| 5.2 实验材料与仪器 | 第112-113页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第112页 |
| 5.2.2 实验试剂 | 第112页 |
| 5.2.3 仪器设备 | 第112-113页 |
| 5.3 实验方法 | 第113-117页 |
| 5.3.1 植物提取物提取物的制备 | 第113页 |
| 5.3.2 细胞培养 | 第113-115页 |
| 5.3.3 MTT实验 | 第115页 |
| 5.3.4 细胞克隆形成实验 | 第115-116页 |
| 5.3.5 两种提取物对A549细胞周期检测 | 第116页 |
| 5.3.6 两种提取物对A549细胞凋亡影响检测 | 第116-117页 |
| 5.3.7 实验结果统计学分析 | 第117页 |
| 5.4 实验结果 | 第117-126页 |
| 5.4.1 植物混合物库的构建 | 第117页 |
| 5.4.2 植物萃取相生长抑制初筛 | 第117-118页 |
| 5.4.3 土荆芥及灰灰菜抗肿瘤活性筛选 | 第118-119页 |
| 5.4.4 两种萃取相抑制活性与作用时间的关系 | 第119-121页 |
| 5.4.5 克隆形成实验检测提取物对A549细胞的抑制作用 | 第121-122页 |
| 5.4.6 提取物对细胞细胞形态的影响 | 第122-123页 |
| 5.4.7 PI单染检测提取物对细胞周期的影响 | 第123-125页 |
| 5.4.8 Annxive/FITC和PI双染检测提取物对A549细胞凋亡的影响 | 第125-126页 |
| 5.5 讨论 | 第126-128页 |
| 5.6 小结 | 第128-130页 |
| 第六章 结论与展望 | 第130-132页 |
| 致谢 | 第132-133页 |
| 参考文献 | 第133-149页 |
| 附录A 攻读博士期间发表论文目录 | 第149页 |
