| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 引言 | 第9-12页 |
| 1 实验材料 | 第12-15页 |
| 1.1 主要仪器 | 第12页 |
| 1.2 主要实验材料和试剂 | 第12-13页 |
| 1.3 主要溶液的配制 | 第13页 |
| 1.4 大肠杆菌培养基的配制 | 第13-14页 |
| 1.5 miRNA agomir/antagomir储存液 | 第14-15页 |
| 2 实验内容和方法 | 第15-24页 |
| 2.1 miR-103-3p对H9C2细胞ERG基因的调控 | 第15-21页 |
| 2.1.1 pcDNA3-hERG质粒的扩增 | 第15-16页 |
| 2.1.2 H9C2细胞的复苏、培养、传代和冻存 | 第16页 |
| 2.1.3 实验分组 | 第16-17页 |
| 2.1.4 细胞的瞬时转染 | 第17页 |
| 2.1.5 提取各组细胞总RNA、逆转录、SYBR Green Real-time PCR反应 | 第17-19页 |
| 2.1.6 Western Blot检测ERG蛋白表达 | 第19-21页 |
| 2.1.7 激光共聚焦定位检测ERG蛋白分布 | 第21页 |
| 2.2 AMO-103-3p对乳鼠原代心肌细胞ERG基因的调控 | 第21-24页 |
| 2.2.1 乳鼠原代心肌细胞的分离和培养 | 第21-22页 |
| 2.2.2 乳鼠原代心肌细胞的转染 | 第22-23页 |
| 2.2.3 提取各组细胞总RNA、逆转录、SYBR Green Real-time PCR反应 | 第23页 |
| 2.2.4 Western Blot检测ERG蛋白表达 | 第23-24页 |
| 3 统计学处理 | 第24-25页 |
| 4 实验结果 | 第25-31页 |
| 4.1 miR1033P对H9C2细胞ERG基因的调控 | 第25-27页 |
| 4.1.1 qRT-PCR法检测各组心肌细胞中ERG mRNA的表达 | 第25页 |
| 4.1.2 Western blot法检测ERG蛋白的表达 | 第25-26页 |
| 4.1.3 免疫细胞化学检测ERG蛋白的定位 | 第26-27页 |
| 4.2 AMO1033P对乳鼠心肌细胞ERG基因的调控 | 第27-31页 |
| 4.2.1 乳鼠原代心肌细胞的形态学观察 | 第27-28页 |
| 4.2.2 台盼蓝染色检测乳鼠原代心肌细胞成活率和细胞计数 | 第28页 |
| 4.2.3 鉴定乳鼠原代心肌细胞的纯度 | 第28页 |
| 4.2.4 慢病毒表达载体转染乳鼠原代心肌细胞的结果 | 第28-29页 |
| 4.2.5 SYBR Green Real-time PCR法检测乳鼠原代心肌细胞miR-103-3p的表达的表达水平 | 第29页 |
| 4.2.6 Western blot法检测乳鼠原代心肌细胞ERG蛋白的表达 | 第29-31页 |
| 5 讨论 | 第31-33页 |
| 参考文献 | 第33-36页 |
| 在学研究成果 | 第36-37页 |
| 致谢 | 第37-38页 |
| miRNA 和 siRNA 在hERG 基因相关疾病中的研究进展 | 第38-45页 |
| 参考文献 | 第42-45页 |
