| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第1章 绪论 | 第15-22页 |
| 1.1 决明的生物学特性 | 第15-16页 |
| 1.2 决明子的药理学作用 | 第16-18页 |
| 1.2.1 降血脂作用 | 第16页 |
| 1.2.2 降压作用 | 第16-17页 |
| 1.2.3 保肝作用 | 第17页 |
| 1.2.4 抑菌作用 | 第17页 |
| 1.2.5 对免疫系统作用 | 第17页 |
| 1.2.6 明目作用 | 第17-18页 |
| 1.2.7 其它作用 | 第18页 |
| 1.3 决明的生物活性成分 | 第18-19页 |
| 1.3.1 蒽醌 | 第18页 |
| 1.3.2 黄酮类 | 第18页 |
| 1.3.3 蛋白质和氨基酸 | 第18页 |
| 1.3.4 脂肪和脂肪酸 | 第18-19页 |
| 1.3.5 胰蛋白酶抑制剂 | 第19页 |
| 1.3.6 其它成分 | 第19页 |
| 1.4 决明的生物活性成分相关基因 | 第19-20页 |
| 1.5 转录组测序 | 第20页 |
| 1.6 本文的研究目的和意义 | 第20-22页 |
| 第2章 决明种子转录组学分析 | 第22-51页 |
| 2.1 材料与方法 | 第22-24页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第22页 |
| 2.1.2 决明种子RNA的提取 | 第22页 |
| 2.1.3 转录组测序 | 第22-23页 |
| 2.1.4 序列组装 | 第23页 |
| 2.1.5 基因表达分析 | 第23页 |
| 2.1.6 基因功能注释、GO分类和代谢路径分析 | 第23-24页 |
| 2.1.7 SSR检测与引物设计 | 第24页 |
| 2.2 结果与讨论 | 第24-49页 |
| 2.2.1 决明种子RNA提取 | 第24-25页 |
| 2.2.2 决明种子转录组组装 | 第25-26页 |
| 2.2.3 基于对公共数据库检索的功能注释 | 第26-31页 |
| 2.2.4 决明转录组中蒽醌生物合成及调控相关基因 | 第31-38页 |
| 2.2.5 萜类生物合成基因 | 第38-42页 |
| 2.2.6 黄酮类化合物生物合成基因 | 第42-45页 |
| 2.2.7 脂类生物合成相关基因 | 第45-48页 |
| 2.2.8 脂转移蛋白 | 第48页 |
| 2.2.9 SSR | 第48-49页 |
| 2.4 本章小结 | 第49-51页 |
| 第3章 决明定量PCR内参基因的选择与评价 | 第51-69页 |
| 3.1 材料与方法 | 第51-53页 |
| 3.1.1 植物组织的准备 | 第51-52页 |
| 3.1.2 生长激素和非生物胁迫 | 第52页 |
| 3.1.3 决明总RNA的提取与cDNA的制备 | 第52页 |
| 3.1.4 引物设计和标准曲线分析 | 第52页 |
| 3.1.5 qPCR扩增 | 第52-53页 |
| 3.1.6 决明候选内参基因稳定性分析 | 第53页 |
| 3.1.7 WRKY基因在不同组织和不同胁迫条件下的表达水平分析 | 第53页 |
| 3.2 结果与分析 | 第53-67页 |
| 3.2.1 RNA的提取 | 第53-54页 |
| 3.2.2 候选内参基因的选择和引物设计 | 第54页 |
| 3.2.3 决明内参候选基因的引物特异性与扩增效率 | 第54-57页 |
| 3.2.4 决明内参基因的初步筛选 | 第57-58页 |
| 3.2.5 决明内参候选基因的表达谱 | 第58-59页 |
| 3.2.6 内参候选基因表达稳定性分析 | 第59-66页 |
| 3.2.7 WRKY基因在不同决明组织以及不同胁迫条件下的表达水平分析 | 第66-67页 |
| 3.3 本章小结 | 第67-69页 |
| 第4章 决明胰蛋白酶抑制剂基因CoTI1的克隆、结构建模及功能鉴定 | 第69-93页 |
| 4.1 材料与方法 | 第69-74页 |
| 4.1.1 CoTI1的3'RACE | 第69-70页 |
| 4.1.2 CoTI1 CDS全长克隆 | 第70-71页 |
| 4.1.3 CoTI1序列分析与分子建模 | 第71页 |
| 4.1.4 CoTI1原核表达载体的构建 | 第71-72页 |
| 4.1.5 CoTI1原核表达 | 第72页 |
| 4.1.6 CoTI1蛋白纯化 | 第72页 |
| 4.1.7 CoTI1活性检测 | 第72-73页 |
| 4.1.8 CoTI1定点突变 | 第73-74页 |
| 4.1.9 CoTI1表达模式分析 | 第74页 |
| 4.2 结果与讨论 | 第74-91页 |
| 4.2.1 CoTI1 cDNA的克隆 | 第74-75页 |
| 4.2.2 CoTI1氨基酸序列分析 | 第75-76页 |
| 4.2.3 CoTI1序列比对分析 | 第76页 |
| 4.2.4 CoTI1系统发育分析 | 第76-77页 |
| 4.2.5 CoTI1的结构建模 | 第77-80页 |
| 4.2.6 CoTI1与胰蛋白酶的相互作用分析 | 第80页 |
| 4.2.7 CoTI1原核表达载体的构建 | 第80-84页 |
| 4.2.8 CoTI1原核表达 | 第84-85页 |
| 4.2.9 CoTI1蛋白纯化 | 第85-86页 |
| 4.2.10 CoTI1原核表达蛋白的活性检测 | 第86-87页 |
| 4.2.11 CoTI1的定点突变 | 第87-90页 |
| 4.2.12 CoTI1的表达模式分析 | 第90-91页 |
| 4.3 本章小结 | 第91-93页 |
| 第5章 决明莽草酸激酶基因CoSK的克隆、结构建模和表达模式 | 第93-109页 |
| 5.1 材料与方法 | 第93-95页 |
| 5.1.1 CoSK的3'RACE | 第93-94页 |
| 5.1.2 CoSK的5'RACE | 第94页 |
| 5.1.3 CoSK的CDS全长克隆 | 第94页 |
| 5.1.4 CoSK序列分析与分子建模 | 第94-95页 |
| 5.1.5 CoSK表达模式分析 | 第95页 |
| 5.2 结果与讨论 | 第95-107页 |
| 5.2.1 CoSK的克隆和序列分析 | 第95-97页 |
| 5.2.2 CoSK氨基酸序列分析 | 第97页 |
| 5.2.3 CoSK系统发育分析 | 第97-98页 |
| 5.2.4 CoSK序列比对分析 | 第98页 |
| 5.2.5 CoSK的转运肽和亚细胞定位 | 第98-99页 |
| 5.2.6 CoSK分子建模 | 第99-101页 |
| 5.2.7 CoSK的不稳定性 | 第101-104页 |
| 5.2.8 CoSK和底物的相互作用分析 | 第104-105页 |
| 5.2.9 CoSK可能的催化机制 | 第105-106页 |
| 5.2.10 CoSK的组织表达模式 | 第106-107页 |
| 5.2.11 CoSK下游代谢产物的转运 | 第107页 |
| 5.3 本章小结 | 第107-109页 |
| 第6章 决明巴豆酰辅酶A羧化酶基因MCCase的克隆、序列分析和表达模式 | 第109-119页 |
| 6.1 材料与方法 | 第109-111页 |
| 6.1.1 决明MCCase的3'RACE | 第109-110页 |
| 6.1.2 决明MCCase的5'RACE | 第110页 |
| 6.1.3 决明MCCase的CDS全长克隆 | 第110-111页 |
| 6.1.4 决明MCCase的序列分析 | 第111页 |
| 6.1.5 决明MCCase的组织差异表达分析 | 第111页 |
| 6.2 结果与讨论 | 第111-118页 |
| 6.2.1 决明MCCase cDNA的克隆 | 第111-112页 |
| 6.2.2 决明MCCase氨基酸序列分析 | 第112-113页 |
| 6.2.3 决明MCCase系统发育分析 | 第113-114页 |
| 6.2.4 决明MCCase序列比对分析 | 第114-115页 |
| 6.2.5 决明MCCase三级结构预测 | 第115-117页 |
| 6.2.6 决明MCCase组织差异表达分析 | 第117-118页 |
| 6.3 本章小结 | 第118-119页 |
| 结论 | 第119-121页 |
| 参考文献 | 第121-130页 |
| 致谢 | 第130-131页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文及科研成果 | 第131页 |
