首页--农业科学论文--植物保护论文--病虫害及其防治论文--园艺作物病虫害及其防治论文--果树病虫害论文--柑桔类病虫害论文

柑橘黄化脉明病毒诱导尤力克柠檬细胞程序性死亡研究

摘要第7-9页
Abstract第9-10页
缩略词与中英对照第11-12页
第一章 文献综述第12-22页
    1.1 柑橘黄化脉明病毒研究进展第12-13页
        1.1.1 发生与分布第12页
        1.1.2 寄主范围与症状第12页
        1.1.3 分子生物学特性第12-13页
        1.1.4 检测方法第13页
    1.2 植物细胞程序性死亡研究进展第13-22页
        1.2.1 PCD的特征第14页
        1.2.2 PCD的检测技术第14-17页
            1.2.2.1 形态学检测第14-15页
            1.2.2.2 染色质DNA断裂检测方法第15-17页
            1.2.2.3 其他检测方法第17页
        1.2.3 PCD的调控机制第17-22页
            1.2.3.1 基因调控第17-18页
            1.2.3.2 蛋白调控第18-19页
            1.2.3.3 信号调控第19-22页
第二章 引言第22-24页
    2.1 研究背景及意义第22-23页
    2.2 技术路线第23-24页
第三章 CYVCV在尤力克柠檬叶片中的分布第24-36页
    3.1 材料第24-25页
        3.1.1 供试材料第24页
        3.1.2 取样方法第24页
        3.1.3 主要仪器第24-25页
        3.1.4 主要试剂第25页
    3.2 实验方法第25-30页
        3.2.1 总RNA提取第25-26页
        3.2.2 引物的合成第26页
        3.2.3 cDNA的合成第26-28页
            3.2.3.1 普通RT-PCR cDNA的合成第26-27页
            3.2.3.2 实时荧光定量RT-PCR cDNA的合成第27-28页
        3.2.4 普通RT-PCR检测第28页
        3.2.5 实时荧光定量RT-PCR检测CYVCV含量第28-29页
        3.2.6 尤力克柠檬叶片的DTBIA检测第29页
        3.2.7 LRWhite树脂样品包埋块制作第29-30页
        3.2.8 免疫荧光标记抗体标记及荧光显微镜观察第30页
    3.3 结果与分析第30-34页
        3.3.1 总RNA质量检测第30-31页
        3.3.2 不同时期尤力克柠檬叶片CYVCV含量测定第31页
        3.3.3 感病尤力克柠檬叶片的DTBIA检测第31-32页
        3.3.4 CYVCV在尤力克柠檬叶片中的免疫荧光定位第32-34页
            3.3.4.1 CYVCV在侧脉中荧光定位第32-33页
            3.3.4.2 CYVCV在主脉中荧光定位第33-34页
    3.4 讨论第34-36页
第四章 CYVCV诱导尤力克柠檬细胞程序性死亡鉴定第36-52页
    4.1 材料第36-39页
        4.1.1 供试材料第36页
        4.1.2 取样方法第36页
        4.1.3 主要仪器第36页
        4.1.4 主要试剂(盒)第36页
        4.1.5 常用储备液及缓冲液第36-39页
    4.2 实验方法第39-42页
        4.2.1 TUNEL原位末端标记检测第39-40页
        4.2.2 Spurr树脂样品制备固定及包埋第40页
        4.2.3 切片步骤第40页
        4.2.4 半薄切片染色第40-41页
        4.2.5 超薄切片染色第41页
        4.2.6 感病不同时期叶片DNA ladder检测第41-42页
            4.2.6.1 DNA的提取第41页
            4.2.6.2 琼脂糖凝胶电泳检测第41-42页
    4.3 实验结果第42-50页
        4.3.1 TUNEL原位末端标记检测第42-46页
            4.3.1.1 CYVCV胁迫下不同时期尤力克柠檬叶片的TUNEL检测第42-44页
            4.3.1.2 CYVCV胁迫下尤力克柠檬不同部位的TUNEL检测第44-46页
        4.3.2 CYVCV侵染后柑橘叶片的超微结构变化第46-50页
            4.3.2.1 普通光学显微镜观察第46-47页
            4.3.2.2 叶绿体病变第47-48页
            4.3.2.3 线粒体病变第48-49页
            4.3.2.4 细胞核病变第49-50页
        4.3.3 DNA ladder的检测第50页
    4.4 讨论第50-52页
第五章 尤力克柠檬PCD相关基因与代谢酶活性变化第52-64页
    5.1 材料第52-53页
        5.1.1 供试材料第52页
        5.1.2 取样方法第52页
        5.1.3 主要试剂(盒)第52页
        5.1.4 主要仪器第52-53页
    5.2 方法第53-57页
        5.2.1 柑橘总RNA的提取第53页
        5.2.2 第一链cDNA合成第53页
        5.2.3 引物的筛选与设计第53页
        5.2.4 RT-PCR扩增与克隆鉴定第53-54页
            5.2.4.1 RT-PCR扩增第53页
            5.2.4.2 PCR产物的克隆与测序第53-54页
        5.2.5 定量PCR反应第54页
        5.2.6 酶活力测定第54-56页
            5.2.6.1 酶粗提液的提取第54-55页
            5.2.6.2 CAT活性的测定第55页
            5.2.6.3 POD酶活性的测定第55页
            5.2.6.4 SOD酶活性的测定第55页
            5.2.6.5 类Caspase-3 蛋白酶活性的测定第55-56页
        5.2.7 丙二醛含量的测定第56-57页
    5.3 结果与分析第57-62页
        5.3.1 各基因引物的扩展效率和特异性分析第57页
        5.3.2 CYVCV胁迫下PCD相关基因定量的差异表达分析第57-59页
        5.3.3 CYVCV胁迫下不同时期Caspase3like活性变化第59页
        5.3.4 CYVCV胁迫下不同时期MDA活性变化第59-60页
        5.3.5 CYVCV胁迫下不同时期抗氧化酶活性变化第60-62页
    5.4 讨论第62-64页
第六章 主要结论、创新点和展望第64-66页
    6.1 主要结论第64页
    6.2 创新点第64页
    6.3 展望第64-66页
参考文献第66-72页
攻读学位期间发表论文及参加科研项目第72-74页
致谢第74页

论文共74页,点击 下载论文
上一篇:柑橘溃疡病菌hfq基因克隆与功能研究
下一篇:柑橘黄化脉明病毒对柠檬、柚和甜橙叶绿素代谢影响的研究