| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-21页 |
| 1.1 鱼类疫苗研发进展 | 第11-12页 |
| 1.1.1 水产养殖业现状 | 第11页 |
| 1.1.2 鱼类病害现状及防治 | 第11-12页 |
| 1.1.3 水产疫苗研发进展 | 第12页 |
| 1.2 鳗弧菌的研究 | 第12-14页 |
| 1.2.1 鳗弧菌及其致病性 | 第12-13页 |
| 1.2.2 鳗弧菌减毒活疫苗及其应用 | 第13-14页 |
| 1.3 斑马鱼免疫系统 | 第14-17页 |
| 1.3.1 斑马鱼作为模式生物的主要研究手段 | 第14-15页 |
| 1.3.2 先天免疫 | 第15页 |
| 1.3.3 适应性免疫 | 第15-16页 |
| 1.3.4 免疫细胞的早期发育 | 第16-17页 |
| 1.4 蛋白组学在鱼类免疫学中的应用 | 第17-18页 |
| 1.4.1 研究鱼类病原致病机制 | 第17-18页 |
| 1.4.2 研究鱼类免疫系统 | 第18页 |
| 1.5 鱼类母源免疫 | 第18-20页 |
| 1.5.1 母源免疫因子及其传递方式 | 第19页 |
| 1.5.2 母源免疫因子的作用模式 | 第19-20页 |
| 1.5.3 母源免疫的影响因子 | 第20页 |
| 1.5.4 母源免疫的应用前景 | 第20页 |
| 1.6 本论文的研究意义 | 第20-21页 |
| 第2章 鳗弧菌减毒活疫苗母源免疫对子代免疫保护力的影响 | 第21-32页 |
| 2.1 前言 | 第21页 |
| 2.2 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第21页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第21页 |
| 2.2.3 实验动物 | 第21页 |
| 2.2.4 实验耗材 | 第21页 |
| 2.2.5 实验菌株及其培养基 | 第21-22页 |
| 2.3 实验方法 | 第22-26页 |
| 2.3.1 亲鱼交配及取样 | 第22-23页 |
| 2.3.2 亲鱼免疫及免疫后子代样品制备 | 第23页 |
| 2.3.3 子代培育及显微观察样品收集 | 第23页 |
| 2.3.4 子代自然存活率的观察 | 第23页 |
| 2.3.5 子代匀浆杀菌活力检测 | 第23-24页 |
| 2.3.6 幼鱼抑制鳗弧菌野生株体内繁殖能力的检测 | 第24-26页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第26-31页 |
| 2.4.1 斑马鱼子代发育分期的确定 | 第26-27页 |
| 2.4.2 子代存活率曲线 | 第27-28页 |
| 2.4.3 子代匀浆杀菌活力 | 第28-29页 |
| 2.4.4 子代抑菌活力 | 第29-31页 |
| 2.5 本章小结 | 第31-32页 |
| 第3章 鳗弧菌减毒活疫苗母源免疫对子代相关因子转录水平的影响 | 第32-43页 |
| 3.1 前言 | 第32页 |
| 3.2 实验材料 | 第32-33页 |
| 3.2.1 实验仪器 | 第32页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第32页 |
| 3.2.3 实验动物 | 第32页 |
| 3.2.4 实验耗材 | 第32页 |
| 3.2.5 实验菌株及其培养基 | 第32-33页 |
| 3.3 实验方法 | 第33-36页 |
| 3.3.1 亲鱼免疫、交配及取样 | 第33页 |
| 3.3.2 RNA抽提及cDNA模板合成 | 第33-34页 |
| 3.3.3 引物设计 | 第34-35页 |
| 3.3.4 标准曲线的绘制与RT-qPCR检测 | 第35-36页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第36-42页 |
| 3.4.1 引物测试结果 | 第36页 |
| 3.4.2 子代发育相关因子转录水平 | 第36-40页 |
| 3.4.3 子代先天免疫因子及免疫应答相关因子转录水平 | 第40-42页 |
| 3.5 本章小结 | 第42-43页 |
| 第4章 鳗弧菌减毒活疫苗母源免疫对子代相关因子蛋白水平的影响 | 第43-63页 |
| 4.1 前言 | 第43页 |
| 4.2 实验材料 | 第43-44页 |
| 4.2.1 实验仪器 | 第43页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第43-44页 |
| 4.2.3 实验动物 | 第44页 |
| 4.2.4 成像和分析软件 | 第44页 |
| 4.2.5 实验菌株及其培养基 | 第44页 |
| 4.3 实验流程 | 第44-48页 |
| 4.3.1 亲鱼免疫、交配及取样 | 第44-45页 |
| 4.3.2 电泳样品制备 | 第45页 |
| 4.3.3 二维电泳流程 | 第45-46页 |
| 4.3.4 质谱检测 | 第46页 |
| 4.3.5 对应因子RT-qPCR检测 | 第46页 |
| 4.3.6 ELISA检测免疫球蛋白 | 第46-47页 |
| 4.3.7 ELISA检测特异性IgM | 第47-48页 |
| 4.3.8 ELISA检测交叉保护力 | 第48页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第48-61页 |
| 4.4.1 等电聚焦各条件摸索及确定 | 第48-53页 |
| 4.4.2 实验组与对照组0 dpf胚胎蛋白差异谱 | 第53-54页 |
| 4.4.3 实验组与对照组2 dpf胚胎蛋白差异谱 | 第54-57页 |
| 4.4.4 质谱检测鉴定差异蛋白 | 第57页 |
| 4.4.5 差异蛋白点转录水平分析 | 第57-58页 |
| 4.4.6 免疫球蛋白和特异性IgM检测 | 第58-60页 |
| 4.4.7 交叉保护力检测 | 第60-61页 |
| 4.5 本章小结 | 第61-63页 |
| 第5章 结论与展望 | 第63-65页 |
| 5.1 结论 | 第63页 |
| 5.2 展望 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
