摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
引言 | 第12-13页 |
第一章 文献研究 | 第13-19页 |
1 植物分枝发育的研究进展 | 第13-15页 |
1.1 植物分枝形成的研究进展 | 第13页 |
1.2 植物分枝相关基因LS的研究进展 | 第13-15页 |
2 植物基因启动子的研究概况 | 第15-18页 |
2.1 植物启动子的结构 | 第15-16页 |
2.2 植物启动子的类型及特点 | 第16-17页 |
2.3 启动子的分离与研究方法 | 第17-18页 |
3 3'端非翻译区(3'UTR)与转录后调控 | 第18-19页 |
第二章 两种芋兰LS基因组序列的克隆及分析 | 第19-30页 |
1 材料与方法 | 第19-22页 |
1.1 实验材料 | 第19-20页 |
1.2 基因组DNA提取 | 第20页 |
1.3 LS基因组序列的克隆 | 第20-22页 |
1.4 两种芋兰中LS基因的分析 | 第22页 |
2 结果与分析 | 第22-28页 |
2.1 LS基因组序列的扩增 | 第22-23页 |
2.2 T-A克隆菌液PCR检测及测序 | 第23页 |
2.3 广布芋兰NaLS基因的生物信息学分析 | 第23-28页 |
3 小结与讨论 | 第28-30页 |
第三章 两种芋兰LS基因调控区的克隆和序列分析 | 第30-44页 |
1 材料与方法 | 第30-34页 |
1.1 实验材料 | 第30页 |
1.2 LS基因5’端和3’端特异性引物设计 | 第30-31页 |
1.3 NfLS和NaLS启动子序列的克隆及序列分析 | 第31-34页 |
1.4 NfLS和NaLS 3'UTR的克隆及序列分析 | 第34页 |
2 结果与分析 | 第34-42页 |
3 小结与讨论 | 第42-44页 |
第四章 NaLS时空表达分析 | 第44-51页 |
1 材料与方法 | 第44-47页 |
1.1 实验材料 | 第44-45页 |
1.2 广布芋兰组织总RNA的提取及第一链cDNA的合成 | 第45-46页 |
1.3 广布芋兰NaLS和β-tubulin的qRT-PCR分析 | 第46-47页 |
2 结果与分析 | 第47-49页 |
2.1 内参及目的基因扩增效率和特异性 | 第47-49页 |
2.2 广布芋兰不同发育时期各器官NaLS基因的表达分析 | 第49页 |
3 小结与讨论 | 第49-51页 |
第五章 携带LS-EGFP融合基因植物表达载体的构建及表达分析 | 第51-62页 |
1 材料与方法 | 第51-58页 |
1.1 实验材料 | 第51-52页 |
1.2 携带LS-EGFP融合基因植物表达载体的构建 | 第52-56页 |
1.3 转化农杆菌 | 第56-57页 |
1.4 LS-EGFP融合基因的瞬时表达 | 第57页 |
1.5 烟草的遗传转化 | 第57-58页 |
2 结果与分析 | 第58-61页 |
2.1 融合基因的构建 | 第58-59页 |
2.2 表达载体pRI 101-EGFP、pRI 101-NfLS/NaLS-EGFP的构建和鉴定 | 第59页 |
2.3 农杆菌的转化和鉴定 | 第59-60页 |
2.4 LS-EGFP融合基因的瞬时表达 | 第60-61页 |
2.5 农杆菌介导转化烟草 | 第61页 |
3 小结与讨论 | 第61-62页 |
第六章 LS启动子和3'UTR功能分析 | 第62-73页 |
1 材料与方法 | 第62-66页 |
1.1 实验材料 | 第62-63页 |
1.2 GUS报告基因瞬时表达载体pCA1381-LSp/3'utr::GUS的构建 | 第63-65页 |
1.3 农杆菌介导烟草叶片的瞬时表达 | 第65-66页 |
2 结果与分析 | 第66-72页 |
2.1 GUS瞬时表达载体构建 | 第66-68页 |
2.2 农杆菌的转化和鉴定 | 第68页 |
2.3 启动子和3'UTR功能初步鉴定 | 第68-72页 |
3 小结与讨论 | 第72-73页 |
第七章 结论与展望 | 第73-75页 |
1 结论 | 第73-74页 |
1.1 获得两种芋兰LS的基因组序列 | 第73页 |
1.2 获得NfLS、NaLS的上下游调控序列 | 第73页 |
1.3 NaLS时空表达分析 | 第73页 |
1.4 LS亚细胞定位分析 | 第73-74页 |
1.5 LS启动子和3'UTR活性分析 | 第74页 |
2 展望 | 第74-75页 |
2.1 遗传转化研究 | 第74页 |
2.2 LS基因调控模式研究 | 第74页 |
2.3 LS基因上游调控基因的研究 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-79页 |
附录 | 第79-89页 |
附录1:植物基因组DNA提取试剂盒(离心管型)说明书 | 第79-80页 |
附录2:多功能DNA纯化回收试剂盒说明书 | 第80-81页 |
附录3:植物表达载体pRI101 AN-DNA图谱信息 | 第81-82页 |
附录4:pGEM-T Easy载体图谱信息 | 第82-83页 |
附录5:pLB零背景快速克隆试剂盒 | 第83-85页 |
附录6:天根质粒提取试剂盒 | 第85-86页 |
附录7:英文缩略语 | 第86-87页 |
附录8:表格目录 | 第87-88页 |
附录9:图表目录 | 第88-89页 |
硕士期间发表的论文 | 第89-90页 |
致谢 | 第90-91页 |
附件 | 第91页 |