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两种芋兰分枝发育相关基因LS及其调控区的克隆与表达分析

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
引言第12-13页
第一章 文献研究第13-19页
    1 植物分枝发育的研究进展第13-15页
        1.1 植物分枝形成的研究进展第13页
        1.2 植物分枝相关基因LS的研究进展第13-15页
    2 植物基因启动子的研究概况第15-18页
        2.1 植物启动子的结构第15-16页
        2.2 植物启动子的类型及特点第16-17页
        2.3 启动子的分离与研究方法第17-18页
    3 3'端非翻译区(3'UTR)与转录后调控第18-19页
第二章 两种芋兰LS基因组序列的克隆及分析第19-30页
    1 材料与方法第19-22页
        1.1 实验材料第19-20页
        1.2 基因组DNA提取第20页
        1.3 LS基因组序列的克隆第20-22页
        1.4 两种芋兰中LS基因的分析第22页
    2 结果与分析第22-28页
        2.1 LS基因组序列的扩增第22-23页
        2.2 T-A克隆菌液PCR检测及测序第23页
        2.3 广布芋兰NaLS基因的生物信息学分析第23-28页
    3 小结与讨论第28-30页
第三章 两种芋兰LS基因调控区的克隆和序列分析第30-44页
    1 材料与方法第30-34页
        1.1 实验材料第30页
        1.2 LS基因5’端和3’端特异性引物设计第30-31页
        1.3 NfLS和NaLS启动子序列的克隆及序列分析第31-34页
        1.4 NfLS和NaLS 3'UTR的克隆及序列分析第34页
    2 结果与分析第34-42页
    3 小结与讨论第42-44页
第四章 NaLS时空表达分析第44-51页
    1 材料与方法第44-47页
        1.1 实验材料第44-45页
        1.2 广布芋兰组织总RNA的提取及第一链cDNA的合成第45-46页
        1.3 广布芋兰NaLS和β-tubulin的qRT-PCR分析第46-47页
    2 结果与分析第47-49页
        2.1 内参及目的基因扩增效率和特异性第47-49页
        2.2 广布芋兰不同发育时期各器官NaLS基因的表达分析第49页
    3 小结与讨论第49-51页
第五章 携带LS-EGFP融合基因植物表达载体的构建及表达分析第51-62页
    1 材料与方法第51-58页
        1.1 实验材料第51-52页
        1.2 携带LS-EGFP融合基因植物表达载体的构建第52-56页
        1.3 转化农杆菌第56-57页
        1.4 LS-EGFP融合基因的瞬时表达第57页
        1.5 烟草的遗传转化第57-58页
    2 结果与分析第58-61页
        2.1 融合基因的构建第58-59页
        2.2 表达载体pRI 101-EGFP、pRI 101-NfLS/NaLS-EGFP的构建和鉴定第59页
        2.3 农杆菌的转化和鉴定第59-60页
        2.4 LS-EGFP融合基因的瞬时表达第60-61页
        2.5 农杆菌介导转化烟草第61页
    3 小结与讨论第61-62页
第六章 LS启动子和3'UTR功能分析第62-73页
    1 材料与方法第62-66页
        1.1 实验材料第62-63页
        1.2 GUS报告基因瞬时表达载体pCA1381-LSp/3'utr::GUS的构建第63-65页
        1.3 农杆菌介导烟草叶片的瞬时表达第65-66页
    2 结果与分析第66-72页
        2.1 GUS瞬时表达载体构建第66-68页
        2.2 农杆菌的转化和鉴定第68页
        2.3 启动子和3'UTR功能初步鉴定第68-72页
    3 小结与讨论第72-73页
第七章 结论与展望第73-75页
    1 结论第73-74页
        1.1 获得两种芋兰LS的基因组序列第73页
        1.2 获得NfLS、NaLS的上下游调控序列第73页
        1.3 NaLS时空表达分析第73页
        1.4 LS亚细胞定位分析第73-74页
        1.5 LS启动子和3'UTR活性分析第74页
    2 展望第74-75页
        2.1 遗传转化研究第74页
        2.2 LS基因调控模式研究第74页
        2.3 LS基因上游调控基因的研究第74-75页
参考文献第75-79页
附录第79-89页
    附录1:植物基因组DNA提取试剂盒(离心管型)说明书第79-80页
    附录2:多功能DNA纯化回收试剂盒说明书第80-81页
    附录3:植物表达载体pRI101 AN-DNA图谱信息第81-82页
    附录4:pGEM-T Easy载体图谱信息第82-83页
    附录5:pLB零背景快速克隆试剂盒第83-85页
    附录6:天根质粒提取试剂盒第85-86页
    附录7:英文缩略语第86-87页
    附录8:表格目录第87-88页
    附录9:图表目录第88-89页
硕士期间发表的论文第89-90页
致谢第90-91页
附件第91页

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