| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 前言 | 第9-19页 |
| 第一部分 滇西亚种树鼩肠道病毒浓缩方法的比较 | 第19-25页 |
| 1 实验材料 | 第19-20页 |
| 1.1 实验动物与病毒 | 第19页 |
| 1.2 主要试剂与耗材 | 第19页 |
| 1.3 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2 实验方法 | 第20-21页 |
| 2.1 粪便上清的制备 | 第20页 |
| 2.2 病毒浓缩方法 | 第20页 |
| 2.3 病毒RNA的提取 | 第20-21页 |
| 2.4 TaqMan荧光定量RT-PCR方法检测病毒载量 | 第21页 |
| 3 结果 | 第21-23页 |
| 3.1 TRV RNA标准品的标准曲线 | 第21-22页 |
| 3.2 TRV和浓缩方法回收的病毒载量 | 第22-23页 |
| 3.3 TRV病毒浓缩率的计算 | 第23页 |
| 4 讨论 | 第23-24页 |
| 5 小结 | 第24-25页 |
| 第二部分 滇西亚种树鼩肠道病毒宏基因的初步研究 | 第25-42页 |
| 1 实验材料 | 第25-26页 |
| 1.1 实验动物 | 第25页 |
| 1.2 主要试剂及耗材 | 第25页 |
| 1.3 主要仪器 | 第25-26页 |
| 2 实验方法 | 第26-31页 |
| 2.1 样品制备 | 第26页 |
| 2.2 核酸的提取 | 第26-28页 |
| 2.3 1st-Strand cDNA合成反应 | 第28页 |
| 2.4 cDNA二链的合成 | 第28-29页 |
| 2.5 随机PCR | 第29页 |
| 2.6 酶切 | 第29页 |
| 2.7 核酸回收 | 第29-30页 |
| 2.8 DNA样品检测 | 第30页 |
| 2.9 文库构建及库检 | 第30页 |
| 2.10 上机测序 | 第30页 |
| 2.11 信息分析流程 | 第30-31页 |
| 3 结果 | 第31-36页 |
| 3.1 SISPA扩增产物 | 第31页 |
| 3.2 MiSeq测序结果 | 第31-36页 |
| 4 讨论 | 第36-41页 |
| 5 小结 | 第41-42页 |
| 第三部分 树鼩鞭毛虫的形态学观察及其18S rRNA基因分析 | 第42-53页 |
| 1 实验材料 | 第42-43页 |
| 1.1 采集样品 | 第42页 |
| 1.2 试剂材料 | 第42页 |
| 1.3 实验设备 | 第42-43页 |
| 2 实验方法 | 第43-45页 |
| 2.1 引物设计 | 第43页 |
| 2.2 直接涂片观察 | 第43页 |
| 2.3 碘液染色观察 | 第43页 |
| 2.4 DNA提取 | 第43-44页 |
| 2.5 18 S rRNA基因扩增与序列分析 | 第44页 |
| 2.6 5.8S rRNA基因扩增与序列分析 | 第44-45页 |
| 3 结果 | 第45-50页 |
| 3.1 鞭毛虫感染及形态观察 | 第45-46页 |
| 3.2 基因测序结果与序列分析 | 第46-50页 |
| 4 讨论 | 第50-52页 |
| 5 小结 | 第52-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 展望 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 附录一 缩写词中英文对照 | 第60-61页 |
| 附录二 主要溶液配方 | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63-65页 |
| 研究生简历 | 第65-66页 |