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植物甾醇合成关键酶基因OsSQS遗传转化水稻的研究

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
1 综述第10-24页
   ·引言第10页
   ·植物甾醇的研究概况第10-16页
     ·植物甾醇的理化性质第10页
     ·植物甾醇毒理安全性第10-11页
     ·植物甾醇的主要功能第11-13页
     ·植物甾醇的生物合成途径第13-15页
     ·角鲨烯合成酶(SQS)基因的研究进展第15-16页
   ·转基因水稻研究概况第16-20页
     ·水稻遗传转方法第16-19页
     ·转基因水稻的筛选和鉴定方法第19-20页
     ·转基因水稻面临的问题第20页
   ·转基因植物的安全性评价第20-22页
     ·转基因植物的食品安全性评价第20-21页
     ·转基因植物的环境安全性评价第21-22页
   ·本研究的目的和意义第22-24页
2、材料与方法第24-39页
   ·材料第24-26页
     ·植物材料第24页
     ·菌株第24页
     ·质粒载体第24页
     ·主要试剂第24-25页
     ·PCR 扩增引物第25页
     ·主要仪器设备第25页
     ·培养基的配制(具体配见附录)第25-26页
   ·实验方法第26-39页
     ·总RNA 的提取和检测第26-27页
     ·目的基因开放阅读框的获得和TA 克隆第27-31页
     ·植物表达载体构建第31-32页
     ·水稻愈伤组织培养第32页
     ·植物表达载体转化根癌农杆菌第32-34页
     ·根癌农杆菌介导转化水稻第34-35页
     ·转基因植株的分子检测第35-37页
     ·转基因植株T0 代种子中β-谷甾醇含量的检测第37-39页
3 结果与分析第39-51页
   ·总RNA 的提取第39页
   ·目的基因编码序列的TA 克隆第39-41页
   ·植物表达载体的构建第41-44页
   ·植物表达载体转化农杆菌第44页
   ·农杆菌介导转化水稻品种“T-9”第44-47页
     ·农杆菌介导的OsSQS 基因转化水稻品种“T-9”第44-46页
     ·转基因水稻T0 代植株的分子检测第46-47页
   ·转基因植株T0 代种子中β-谷甾醇含量检测第47-51页
     ·标准曲线第47-48页
     ·样液测量结果第48-51页
4 讨论第51-54页
   ·转基因受体材料的选择第51页
   ·双T-DNA 植物表达载体的构建第51页
   ·农杆菌与愈伤组织的共培养第51-52页
   ·超声波提取第52页
   ·OsSQS 基因在水稻中超表达对β-谷甾醇含量影响分析第52-54页
5 小结第54页
6 展望第54-55页
参考文献第55-61页
附录第61-64页
致谢第64页

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