| 本文所用缩略词中英文对照 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一部分 引言 | 第12-18页 |
| 1 细胞外基质磷酸糖蛋白/成骨细胞/骨细胞因子(MEPE/OF45) | 第12-13页 |
| 2 丝氨酸或半胱氨酸蛋白酶抑制剂分化体 B2(SERPINB2) | 第13-14页 |
| 3 视网膜母细胞瘤肿瘤抑制蛋白（retinoblastoma，RB） | 第14-15页 |
| 4 RNAi 技术 | 第15-17页 |
| 本研究的目的及意义 | 第17-18页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第18-25页 |
| 1 材料 | 第18-20页 |
| ·细胞株与菌株 | 第18页 |
| ·质粒 | 第18-19页 |
| ·分子生物学工具酶 | 第19页 |
| ·常用分子生物学试剂盒 | 第19页 |
| ·细胞培养试剂与耗材 | 第19页 |
| ·免疫印迹试剂 | 第19页 |
| ·抗体 | 第19页 |
| ·其他免疫印迹试剂 | 第19页 |
| ·蛋白质纯化及抗体制备、纯化相关试剂及材料 | 第19-20页 |
| ·其它常规试剂 | 第20页 |
| ·大型仪器 | 第20页 |
| 2 实验方法与步骤 | 第20-25页 |
| ·重组质粒构建 | 第20-22页 |
| ·PCR 扩增目的基因 | 第20-21页 |
| ·PCR 产物回收、酶切和连接 | 第21页 |
| ·宿主感受态细胞的转化 | 第21页 |
| ·重组克隆鉴定 | 第21-22页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第22-23页 |
| ·融合蛋白在大肠杆菌中的表达纯化 | 第22页 |
| ·动物免疫 | 第22页 |
| ·血清抗体效价检测（ELISA） | 第22-23页 |
| ·用protein A 纯化多克隆抗体 | 第23页 |
| ·细胞培养与转染 | 第23-24页 |
| ·培养条件 | 第23页 |
| ·细胞传代 | 第23-24页 |
| ·细胞冻存 | 第24页 |
| ·细胞转染 | 第24页 |
| ·筛选稳定克隆 | 第24页 |
| ·免疫印迹(Western-blotting) | 第24-25页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第25-39页 |
| 第一章 大鼠 SERPINB2 与人 MEPE/OF45 多克隆抗血清的制备 | 第25-33页 |
| 1 结果 | 第25-31页 |
| ·SerpinB2 基因的克隆 | 第25-26页 |
| ·融合蛋白在大肠杆菌中的表达纯化 | 第26-28页 |
| ·抗血清的制备 | 第28页 |
| ·血清抗体效价检测（ELISA） | 第28-29页 |
| ·血清抗体的纯化 | 第29页 |
| ·抗血清的特异性测定 | 第29-31页 |
| ·抗 SERPINB2 抗血清的特异性测定 | 第29-30页 |
| ·抗MEPE/OF45 抗血清的特异性测定 | 第30-31页 |
| 2 讨论 | 第31-33页 |
| 第二章 SerpinB2 小干扰 RNA 的筛选及干扰效果检测 | 第33-37页 |
| 1. | 第33-35页 |
| ·SerpinB2 的信息学分析 | 第33页 |
| ·SerpinB2-siRNA 的载体构建 | 第33-34页 |
| ·SerpinB2-siRNA 在293T 细胞中的基因抑制作用 | 第34-35页 |
| ·SerpinB2-siRNA 转染297T 细胞检测RB 蛋白的表达 | 第35页 |
| 2. 讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 MEPE/OF45、SERPINB2、RB 的表达相关性研究 | 第37-39页 |
| 1. | 第37-38页 |
| ·MEPE/OF45 对RB 蛋白表达水平影响的研究 | 第37页 |
| ·MEPE/OF45 与 SERPINB2、RB 蛋白水平相关性检测 | 第37-38页 |
| 2. 讨论 | 第38-39页 |
| 总结 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-45页 |
| 致谢 | 第45页 |
