| 本论文的创新点 | 第5-6页 |
| 常用缩写 | 第6-10页 |
| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11页 |
| 第一章 前言 | 第13-31页 |
| 1. 自噬的概述 | 第13-27页 |
| 1.1 自噬的分类及其分子机制 | 第13-16页 |
| 1.2 线粒体自噬 | 第16-17页 |
| 1.3 自噬抑制病毒复制 | 第17-19页 |
| 1.4 自噬增加病毒复制 | 第19-23页 |
| 1.5 自噬与先天性免疫的关系 | 第23-24页 |
| 1.6 自噬与获得性免疫的关系 | 第24-27页 |
| 2. 人副流感病毒3型的概述 | 第27-30页 |
| 3. 本论文的研究目的 | 第30-31页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第31-44页 |
| 1 实验材料 | 第31-33页 |
| 1.1 感受态菌种,细胞,HPIV3病毒,质粒 | 第31页 |
| 1.2 主要试剂与耗材,酶类与抗体 | 第31-33页 |
| 2 实验方法 | 第33-44页 |
| 2.1 分子克隆实验技术 | 第33-35页 |
| 2.2 细胞培养及转染技术 | 第35-36页 |
| 2.3 原代细胞HPF(Human Pulmonary Fibroblasts)体外培养 | 第36-37页 |
| 2.4 细胞总RNA的抽提 | 第37页 |
| 2.5 反转录PCR(RT-PCR) | 第37-38页 |
| 2.6 VLPs出芽检测(VLPs Budding assay) | 第38页 |
| 2.7 体内免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation) | 第38-39页 |
| 2.8 酵母双杂交 | 第39页 |
| 2.9 GST Pull-down | 第39页 |
| 2.10 线粒体分离 | 第39-40页 |
| 2.11 膜浮选实验(Membrane flotation assay)和甲醇氯仿抽提蛋白 | 第40页 |
| 2.12 蛋白免疫印迹实验(Western blot) | 第40-41页 |
| 2.13 透射电镜技术(Transmission electron microscopy,TEM) | 第41页 |
| 2.14 自噬分析 | 第41页 |
| 2.15 溶酶体追踪(LysoTracker-Red Staining) | 第41-42页 |
| 2.16 免疫荧光实验(Immunofluorescence) | 第42页 |
| 2.17 细胞毒性实验和台酚蓝染色 | 第42-43页 |
| 2.18 病毒滴度的测定 | 第43页 |
| 2.19 胞外病毒颗粒计数 | 第43页 |
| 2.20 统计分析 | 第43-44页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第44-86页 |
| 1. P蛋白阻止自噬体与溶酶体的融合从而累积自噬体和增加胞外病毒粒子 | 第44-66页 |
| 1.1. 实验结果 | 第44-63页 |
| 1.1.1. HPIV3病毒感染诱导非完全自噬 | 第44-50页 |
| 1.1.2. 自噬体的累积增加HPIV3胞外病毒颗粒 | 第50-54页 |
| 1.1.3. P蛋白表达阻止自噬体与溶酶体融合 | 第54-63页 |
| 1.2. 小结与讨论 | 第63-66页 |
| 2. 泛素化的M蛋白作为受体介导线粒体自噬的发生 | 第66-86页 |
| 2.1. 实验结果 | 第66-83页 |
| 2.1.1. HPIV3感染和M蛋白表达激活线粒体自噬 | 第66-71页 |
| 2.1.2. M蛋白与TUFM相互作用到达线粒体 | 第71-74页 |
| 2.1.3. 泛素化的M蛋白与LC3相互作用介导线粒体自噬 | 第74-81页 |
| 2.1.4. 副粘病毒科M蛋白泛素化介导线粒体自噬 | 第81-83页 |
| 2.2. 小结与讨论 | 第83-86页 |
| 第四章 研究总结和展望 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-101页 |
| 博士期间发表文章 | 第101-102页 |
| 致谢 | 第102-104页 |
