| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 前言 | 第14-23页 |
| 1. Hedgehog信号通路概述 | 第14-17页 |
| 2. Hedgehog信号通路与肿瘤 | 第17-18页 |
| 3. Hedgehog抑制剂研究进展 | 第18-22页 |
| 3.1 Smo抑制剂 | 第18-20页 |
| 3.2 Gli抑制剂 | 第20-21页 |
| 3.3 Shh抑制剂 | 第21-22页 |
| 4. 研究目的和内容 | 第22-23页 |
| 第二章 Hedgehog抑制剂的筛选 | 第23-33页 |
| 1. 实验材料 | 第23-26页 |
| 2. 实验方法 | 第26-29页 |
| 2.1 细胞培养 | 第26-27页 |
| 2.2 双萤光素酶检测模型筛选化合物 | 第27-29页 |
| 3. 实验结果 | 第29-31页 |
| 4. 讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 新型Hedgehog抑制剂Bxl-7-15作用位点和抗耐药作用研究 | 第33-44页 |
| 1. 实验材料 | 第33-35页 |
| 2. 实验方法 | 第35-40页 |
| 2.1 质粒转化 | 第35-36页 |
| 2.2 质粒提取 | 第36页 |
| 2.3 细胞转染 | 第36-37页 |
| 2.4 蛋白免疫印迹实验(Western blot) | 第37-39页 |
| 2.5 荧光环巴胺结合竞争实验 | 第39-40页 |
| 2.6 Bxl-7-15抗耐药作用研究 | 第40页 |
| 2.7 统计学分析 | 第40页 |
| 3. 实验结果 | 第40-43页 |
| 3.1 转染后HEK293细胞高表达Smo蛋白 | 第40-41页 |
| 3.2 化合物Bxl-7-15结合于Smo蛋白 | 第41-42页 |
| 3.3 化合物Bxl-7-15可以克服Smo突变引起的耐药作用 | 第42-43页 |
| 4. 讨论 | 第43-44页 |
| 第四章 构建Ptch~(+/-)p53~(+/-)转基因小鼠自发髓母细胞瘤肿瘤模型 | 第44-52页 |
| 1. 实验材料 | 第44-46页 |
| 2. 实验方法 | 第46-48页 |
| 2.1 小鼠繁育 | 第46页 |
| 2.2 提取转基因小鼠DNA | 第46页 |
| 2.3 PCR检测小鼠基因型 | 第46-47页 |
| 2.4 获取Ptch~(+/-)p53~(+/-)转基因小鼠自发髓母细胞瘤 | 第47-48页 |
| 2.5 裸鼠肿瘤瘤块接种法 | 第48页 |
| 2.6 髓母细胞瘤X-Gal染色 | 第48页 |
| 3. 实验结果 | 第48-50页 |
| 3.1 转基因小鼠基因检测 | 第48-49页 |
| 3.2 获得小鼠自发脑部肿瘤 | 第49-50页 |
| 3.3 获得的肿瘤可以被X-Gal染色 | 第50页 |
| 4. 讨论 | 第50-52页 |
| 第五章 Bxl-7-15的体内外抗肿瘤作用 | 第52-58页 |
| 1. 实验材料 | 第52页 |
| 2. 实验方法 | 第52-54页 |
| 2.1 MTT法检测Bxl-7-15体外细胞生长抑制作用 | 第52-53页 |
| 2.2 Bxl-7-15体内抑瘤作用检测 | 第53-54页 |
| 3. 实验结果 | 第54-56页 |
| 3.1 Bxl-7-15对髓母细胞瘤细胞的体外抑制作用 | 第54页 |
| 3.2 Bxl-7-15抑制裸鼠内髓母细胞瘤的生长 | 第54-56页 |
| 4. 讨论 | 第56-58页 |
| 第六章 总结 | 第58-60页 |
| 附录 | 第60-64页 |
| 缩略词 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
