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欧李果实转录组测序及苹果酸积累关键酶基因的克隆与表达分析

摘要第8-11页
第一章 文献综述第11-22页
    1.1 欧李种质资源与育种研究进展第11-13页
        1.1.1 欧李概述第11页
        1.1.2 欧李种质资源分布与收集第11页
        1.1.3 欧李种质资源遗传多样性与分类第11-12页
        1.1.4 欧李品种选育第12-13页
    1.2 果实苹果酸代谢研究第13-18页
        1.2.1 苹果酸的特性与生理功能第13页
        1.2.2 果实中苹果酸代谢途径与积累模式第13-14页
        1.2.3 果实中苹果酸代谢关键酶及其基因研究进展第14-18页
    1.3 转录组学研究第18-20页
        1.3.1 转录组学概念第18页
        1.3.2 转录组学研究方法第18页
        1.3.3 测序技术的发展第18-20页
        1.3.4 转录组测序技术在高等植物上的应用第20页
    1.4 本研究的目的意义第20-22页
第二章 欧李果实转录组测序分析第22-67页
    2.1 试验材料第22页
    2.2 试验方法第22-30页
        2.2.1 试验设计第22页
        2.2.2 欧李果实转录组cDNA文库构建第22-24页
        2.2.3 欧李果实RNA-seq信息分析第24-30页
            2.2.3.1 测序产量统计第24-25页
            2.2.3.2 组装结果分析第25-26页
            2.2.3.3 Unigenes功能注释及COG分类第26-27页
            2.2.3.4 Unigene(KEGG)代谢通路分析第27页
            2.2.3.5 预测编码蛋白框(CDS)第27页
            2.2.3.6 Unigene表达差异分析第27-29页
            2.2.3.7 差异Unigene的GO和Pathway分析第29-30页
    2.3 结果与分析第30-63页
        2.3.1 欧李转录组测序产量统计第30-31页
        2.3.2 欧李转录组测序组装第31-33页
        2.3.3 欧李Unigene功能注释第33-35页
            2.3.3.1 注释结果汇总第33页
            2.3.3.2 NR分类第33-34页
            2.3.3.3 COG分类第34-35页
            2.3.3.4 Unigene的GO分类第35页
        2.3.4 欧李Unigene代谢通路分析第35-40页
        2.3.5 预测编码蛋白框(CDS)第40-42页
            2.3.5.1 CDS核酸序列统计第40-41页
            2.3.5.2 CDS蛋白质序列第41-42页
        2.3.6 不同欧李品种Unigene表达差异分析第42页
        2.3.7 差异表达基因的GO功能分析第42-51页
            2.3.7.1 差异表达基因的GO功能分类第42-44页
            2.3.7.2 差异表达基因的GO功能富集第44-51页
        2.3.8 差异表达基因的Pathway分析第51-60页
        2.3.9 欧李Unigene SSR分析第60-63页
            2.3.9.1 SSR分布第60页
            2.3.9.2 转录组SSR基序重复类型第60-63页
        2.3.10 苹果酸代谢途径的Unigene筛选与表达差异分析第63页
    2.4 讨论第63-67页
第三章 欧李果实苹果酸积累关键酶基因的克隆与序列分析第67-90页
    3.1 试验材料第67-68页
        3.1.1 植物材料第67页
        3.1.2 菌株及主要生化试剂第67页
        3.1.3 试剂的配制第67-68页
    3.2 试验方法第68-72页
        3.2.1 总RNA的提取及检测第68-69页
        3.2.2 RT-PCR扩增目的基因片段第69-71页
        3.2.3 基因全长的克隆第71-72页
    3.3 结果与分析第72-88页
        3.3.1 欧李果实总RNA的提取第72-73页
        3.3.2 欧李MDH基因的克隆和分析第73-77页
        3.3.3 欧李ME基因的克隆和分析第77-82页
        3.3.4 欧李VHA基因的克隆和分析第82-88页
    3.4 讨论第88-90页
第四章 欧李果实苹果酸积累关键酶基因表达与酶活性分析第90-98页
    4.1. 试验材料第90页
    4.2 试验方法第90-93页
        4.2.1 欧李果实酸含量的测定第90-91页
        4.2.2 酶活性测定第91-92页
        4.2.3 苹果酸积累酶基因的荧光定量分析第92-93页
    4.3 结果与分析第93-96页
        4.3.1 欧李果实中苹果酸积累动态第93-94页
        4.3.2 欧李果实苹果酸积累关键酶基因的表达分析第94页
        4.3.3 欧李果实苹果酸积累关键酶活性的变化第94-95页
        4.3.4 欧李果实苹果酸积累关键酶活性、基因表达与苹果酸含量的关系第95-96页
    4.4 讨论第96-98页
研究结论第98-99页
参考文献第99-106页
Abstract第106-108页
附录第110-122页
在读期间发表的学术论文第122-124页
致谢第124页

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