| 中文摘要 | 第12-14页 |
| ABSTRACT | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-28页 |
| 1 核糖体与蛋白质合成 | 第17-18页 |
| 1.1 核糖体的基本类型与化学组成 | 第17页 |
| 1.2 核糖体RNA与核糖体蛋白 | 第17-18页 |
| 2 酸性核糖体磷酸化蛋白 | 第18-24页 |
| 2.1 酸性核糖体磷酸化蛋白的组成与结构 | 第19-22页 |
| 2.1.1 N端结构域 | 第19-20页 |
| 2.1.2 中间连接区 | 第20页 |
| 2.1.3 C端结构域 | 第20-22页 |
| 2.2 柄状复合物的组成 | 第22-23页 |
| 2.3 酸性核糖体蛋白的功能 | 第23-24页 |
| 2.3.1 主要功能 | 第23页 |
| 2.3.2 核糖体外功能 | 第23-24页 |
| 3 CK2与核糖体蛋白 | 第24-25页 |
| 3.1 CK2的结构与功能 | 第24-25页 |
| 3.2 酸性核糖体磷酸化蛋白的磷酸化作用 | 第25页 |
| 4 八肋游仆虫 | 第25-26页 |
| 5 本课题研究思路及意义 | 第26-28页 |
| 5.1 本研究的设计思路 | 第26-27页 |
| 5.2 本研究的意义 | 第27-28页 |
| 第二章 八肋游仆虫核糖体蛋白P1基因的克隆与序列分析 | 第28-39页 |
| 1 引言 | 第28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第28-29页 |
| 2.1.1 材料及菌株 | 第28页 |
| 2.1.2 引物及主要酶和化学试剂 | 第28页 |
| 2.1.3 主要试剂的配制 | 第28-29页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-32页 |
| 2.2.1 八肋游仆虫的培养及收集 | 第29页 |
| 2.2.2 八肋游仆虫基因的克隆 | 第29-32页 |
| 2.2.3 序列分析 | 第32页 |
| 3 实验结果 | 第32-38页 |
| 3.1 八肋游仆虫P1基因的克隆与序列分析 | 第32-34页 |
| 3.2 游仆虫核糖体蛋白P1氨基酸序列比对分析 | 第34-35页 |
| 3.3 游仆虫核糖体蛋白P1二级结构的模拟 | 第35-38页 |
| 4 讨论 | 第38-39页 |
| 第三章 八肋游仆虫核糖体蛋白EoP1A和EoP1B的表达纯化及相互作用的检测 | 第39-48页 |
| 1 引言 | 第39页 |
| 2 材料与方法 | 第39-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第39-40页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第39页 |
| 2.1.2 主要酶 | 第39页 |
| 2.1.3 主要生化试剂和器材 | 第39-40页 |
| 2.2 实验方法 | 第40-42页 |
| 2.2.1 重组质粒的构建 | 第40页 |
| 2.2.2 重组蛋白的表达纯化 | 第40-42页 |
| 2.2.3 Pull-down分析 | 第42页 |
| 3 实验结果 | 第42-46页 |
| 3.1 重组质粒pET28a-P1A和pGEX-6P-1-P1B的构建 | 第42-43页 |
| 3.2 EoP1A和EoP1B的表达与纯化 | 第43-45页 |
| 3.3 Pull-down检测EoP1A与EoP1B之间的相互作用 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-48页 |
| 第四章 八肋游仆虫核糖体蛋白EoP1A磷酸化位点分析 | 第48-55页 |
| 1 引言 | 第48页 |
| 2 材料与方法 | 第48-50页 |
| 2.1 实验材料 | 第48页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第48页 |
| 2.1.2 主要酶及试剂 | 第48页 |
| 2.2 实验方法 | 第48-50页 |
| 2.2.1 磷酸化位点的预测 | 第48-49页 |
| 2.2.2 定点突变 | 第49页 |
| 2.2.3 突变体的表达纯化 | 第49页 |
| 2.2.4 蛋白激酶CK2的表达纯化 | 第49页 |
| 2.2.5 体外磷酸化作用的检测 | 第49-50页 |
| 3 实验结果 | 第50-54页 |
| 3.1 P1A磷酸化位点的预测 | 第50-51页 |
| 3.2 定点突变 | 第51-52页 |
| 3.3 蛋白激酶CK2的表达纯化 | 第52页 |
| 3.4 NMR检测磷酸化反应 | 第52-54页 |
| 4 讨论 | 第54-55页 |
| 总结与展望 | 第55-57页 |
| 总结 | 第55-56页 |
| 展望 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 附录1 略语表 | 第61-62页 |
| 附录2 本研究构建的重组表达质粒表 | 第62-63页 |
| 附录3 常用试剂配制 | 第63-65页 |
| 附录4 主要仪器设备 | 第65-66页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 个人简况及联系方式 | 第68-70页 |
