| 中文摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-21页 |
| 1.1 蛋白酶抑制剂概述 | 第15-16页 |
| 1.1.1 蛋白酶抑制剂的分类 | 第15页 |
| 1.1.2 蛋白酶抑制剂的生物功能 | 第15-16页 |
| 1.2 细胞自噬研究概述 | 第16-18页 |
| 1.2.1 自噬的分类及形态学特征 | 第16-17页 |
| 1.2.2 PI3K/AKT/mTOR信号通路与自噬 | 第17-18页 |
| 1.3 PTEN的研究概述 | 第18-19页 |
| 1.4 研究目的及意义 | 第19-21页 |
| 第二章 rBTI对Hep G2细胞增殖的影响 | 第21-32页 |
| 2.1 引言 | 第21页 |
| 2.2 材料、试剂及仪器 | 第21-22页 |
| 2.3 实验方法 | 第22-24页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第22页 |
| 2.3.2 MTT实验 | 第22-23页 |
| 2.3.3 免疫荧光分析 | 第23页 |
| 2.3.4 细胞总RNA提取及qRT-PCR | 第23页 |
| 2.3.5 细胞周期检测 | 第23-24页 |
| 2.3.6 Western印迹检测 | 第24页 |
| 2.3.7 统计学分析 | 第24页 |
| 2.4 结果 | 第24-30页 |
| 2.4.1 rBTI对Hep G2细胞增殖抑制作用 | 第24-25页 |
| 2.4.2 rBTI诱导Hep G2细胞周期阻滞 | 第25页 |
| 2.4.3 rBTI对PTEN和p-PTEN亚细胞定位的影响 | 第25-26页 |
| 2.4.4 p-PTEN定位于细胞核仁 | 第26-28页 |
| 2.4.5 rBTI对周期蛋白表达的影响 | 第28-30页 |
| 2.5 讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 活性氧在rBTI上调PTEN表达中的作用 | 第32-39页 |
| 3.1 引言 | 第32页 |
| 3.2 材料、试剂及仪器 | 第32页 |
| 3.3 实验方法 | 第32-33页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第32页 |
| 3.3.2 细胞总RNA提取及qRT-PCR | 第32页 |
| 3.3.3 流式细胞术检测细胞ROS水平 | 第32-33页 |
| 3.3.4 荧光显微镜观察ROS变化 | 第33页 |
| 3.3.5 Western blot检测蛋白表达 | 第33页 |
| 3.3.6 统计学分析 | 第33页 |
| 3.4 实验结果 | 第33-36页 |
| 3.4.1 rBTI对PTEN基因表达的影响 | 第33-34页 |
| 3.4.2 Hep G2细胞内ROS的变化 | 第34-36页 |
| 3.4.3 PTEN与ROS的关系 | 第36页 |
| 3.5 讨论 | 第36-39页 |
| 第四章 rBTI诱导Hep G2细胞自噬与PTEN蛋白的关系 | 第39-47页 |
| 4.1 引言 | 第39页 |
| 4.2 材料、试剂及仪器 | 第39页 |
| 4.3 实验方法 | 第39-40页 |
| 4.3.1 细胞培养 | 第39页 |
| 4.3.2 MTT实验 | 第39-40页 |
| 4.3.3 pEGFP-LC3转染 | 第40页 |
| 4.3.4 Western blot检测 | 第40页 |
| 4.3.5 统计学分析 | 第40页 |
| 4.4 实验结果 | 第40-45页 |
| 4.4.1 rBTI和3-MA对Hep G2细胞增殖的影响 | 第40页 |
| 4.4.2 rBTI在Hep G2细胞中诱导自噬的发生 | 第40-41页 |
| 4.4.3 rBTI抑制PI3K/AKT/mTOR通路 | 第41页 |
| 4.4.4 PTEN蛋白对Hep G2细胞自噬的影响 | 第41-42页 |
| 4.4.5 PTEN蛋白对PI3K/AKT/mTOR通路的影响 | 第42-45页 |
| 4.5 讨论 | 第45-47页 |
| 小结与展望 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 个人简介及联系方式 | 第57-59页 |
