中文摘要 | 第10-12页 |
ABSTRACT | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第14-22页 |
1.1 游仆虫中发生编程性移码的基因 | 第15-17页 |
1.1.1 游仆虫 | 第15页 |
1.1.2 游仆虫中的编程性移码基因 | 第15-17页 |
1.2 影响编程性翻译移码的因素 | 第17-19页 |
1.2.1 tRNA | 第17-18页 |
1.2.2 刺激因子(Upstream stimulatory factor) | 第18-19页 |
1.2.3 肽链释放因子 | 第19页 |
1.3 编程性翻译移码的研究方法 | 第19-20页 |
1.3.1 双荧光素酶报告体系 | 第19页 |
1.3.2 Western Blot分析 | 第19页 |
1.3.3 质谱分析 | 第19-20页 |
1.3.4 体外翻译体系 | 第20页 |
1.4 本课题研究思路及意义 | 第20-22页 |
第二章 八肋游仆虫中蛋白激酶CK2家族的分析 | 第22-31页 |
2.1 材料 | 第22-24页 |
2.1.1 菌株和质粒 | 第22页 |
2.1.2 实验试剂 | 第22页 |
2.1.3 实验仪器 | 第22-23页 |
2.1.4 实验引物 | 第23-24页 |
2.2 方法 | 第24-26页 |
2.2.1 八肋游仆虫基因组的提取 | 第24页 |
2.2.2 感受态DH5α的制备 | 第24-25页 |
2.2.3 试剂配制 | 第25页 |
2.2.4 CK2七个序列的获得 | 第25页 |
2.2.5 分析比对CK2序列并预测移码基因 | 第25-26页 |
2.3 结果 | 第26-29页 |
2.3.1 游仆虫CK2基因扩增及核苷酸序列分析 | 第26-27页 |
2.3.2 游仆虫CK2氨基酸序列分析及移码基因预测 | 第27-29页 |
2.4 讨论 | 第29-31页 |
第三章 编程性翻译移码基因CK2 α-1的鉴定 | 第31-42页 |
3.1 材料 | 第31-32页 |
3.1.1 菌株和质粒 | 第31页 |
3.1.2 实验试剂 | 第31-32页 |
3.1.3 实验仪器 | 第32页 |
3.1.4 实验引物 | 第32页 |
3.2 方法 | 第32-38页 |
3.2.1 八肋游仆虫基因组的提取 | 第32-33页 |
3.2.2 感受态DH5α的制备 | 第33页 |
3.2.3 试剂配制 | 第33页 |
3.2.4 双荧光素酶报告质粒的构建 | 第33-36页 |
3.2.5 利用质粒洗牌技术筛选酵母菌株YDB447/pDB967 | 第36页 |
3.2.6 双荧光素酶移码效率实验 | 第36-38页 |
3.3 结果 | 第38-40页 |
3.3.1 双荧光素酶报告质粒的构建 | 第38-40页 |
3.3.2 双荧光素酶移码效率测定 | 第40页 |
3.4 讨论 | 第40-42页 |
第四章 编程性翻译移码基因MAPK1的鉴定 | 第42-48页 |
4.1 材料 | 第42-43页 |
4.1.1 菌株和质粒 | 第42-43页 |
4.1.2 实验引物 | 第43页 |
4.2 方法 | 第43-44页 |
4.2.1 八肋游仆虫基因组的提取 | 第43页 |
4.2.2 感受态DH5α的制备 | 第43页 |
4.2.3 试剂配制 | 第43页 |
4.2.4 双荧光素酶报告质粒的构建 | 第43-44页 |
4.2.5 双荧光素酶移码实验 | 第44页 |
4.3 结果 | 第44-46页 |
4.3.1 TGA的定点突变 | 第44页 |
4.3.2 重组质粒pDB722-MAPK1-1和pDB722-MAPK1-2的构建 | 第44-46页 |
4.3.3 双荧光素酶移码效率测定 | 第46页 |
4.4 讨论 | 第46-48页 |
总结与展望 | 第48-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
附录 | 第56-58页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
个人简况与联系方式 | 第60-62页 |