| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-17页 |
| 引言 | 第17-19页 |
| 第一章 文献综述 | 第19-31页 |
| ·海洋贝类先天性免疫 | 第19页 |
| ·海洋贝类的免疫防御机制 | 第19-22页 |
| ·细胞免疫 | 第19-20页 |
| ·体液免疫 | 第20-22页 |
| ·凝集素 | 第20-21页 |
| ·抗菌肽 | 第21页 |
| ·溶酶体酶 | 第21页 |
| ·化学递质 | 第21-22页 |
| ·免疫防御过程 | 第22-26页 |
| ·免疫识别 | 第22-25页 |
| ·病原相关分子模式(Pathogen-associated molecular patterns， PAMPs) | 第22-23页 |
| ·模式识别受体(Pattern recognition receptors, PRRs) | 第23-25页 |
| ·免疫信号的传导 | 第25-26页 |
| ·Toll/dif途径 | 第25页 |
| ·Imd/Relish途径 | 第25-26页 |
| ·病原体的清除(Pathogen elimination) | 第26页 |
| ·溶菌酶的分类和功能 | 第26-29页 |
| ·溶菌酶的分类 | 第26-28页 |
| ·c型溶菌酶 | 第26-27页 |
| ·g型溶菌酶 | 第27页 |
| ·i型溶菌酶 | 第27-28页 |
| ·溶菌酶的功能 | 第28-29页 |
| ·溶菌酶的免疫功能 | 第28页 |
| ·溶菌酶的消化功能 | 第28-29页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第29-31页 |
| ·研究目的 | 第29页 |
| ·研究的意义 | 第29-31页 |
| 第二章 短蛸溶菌酶(Oo Lys)基因的克隆及表达分析 | 第31-46页 |
| ·实验材料 | 第31-33页 |
| ·实验动物和菌株 | 第31页 |
| ·实验仪器 | 第31-32页 |
| ·实验试剂和引物 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-37页 |
| ·短蛸溶菌酶(Oo Lys)基因的c DNA全长克隆 | 第33-34页 |
| ·短蛸溶菌酶(Oo Lys)基因的序列分析 | 第34页 |
| ·短蛸总RNA的提取和c DNA的合成 | 第34-35页 |
| ·组织的采集 | 第34页 |
| ·总RNA的提取 | 第34-35页 |
| ·c DNA的合成 | 第35页 |
| ·Oo Lys定量引物的设计 | 第35-36页 |
| ·短蛸不同组织Oo Lys的m RNA的表达分析 | 第36页 |
| ·鳗弧菌和藤黄微球菌刺激后Oo Lys的m RNA在血细胞中的表达规律 | 第36-37页 |
| ·实验结果 | 第37-43页 |
| ·Oo Lys的c DNA全长及氨基酸序列特征 | 第37页 |
| ·Oo Lys的同源分析和进化树的构建 | 第37-39页 |
| ·Oo Lys的三级结构 | 第39-40页 |
| ·Oo Lys的m RNA在各组织中的表达规律 | 第40-41页 |
| ·细菌刺激后Oo Lys的m RNA在血细胞中的表达规律 | 第41-43页 |
| ·讨论 | 第43-46页 |
| 第三章 重组质粒的构建及蛋白的纯化复性 | 第46-60页 |
| ·实验材料 | 第46-50页 |
| ·实验样品 | 第46页 |
| ·实验仪器 | 第46-47页 |
| ·实验试剂和引物 | 第47-48页 |
| ·实验试剂的配制 | 第48-50页 |
| ·实验方法 | 第50-57页 |
| ·Oo Lys目的片段的获取 | 第50-51页 |
| ·切胶回收 | 第51页 |
| ·重组质粒的构建 | 第51-53页 |
| ·质粒抽提 | 第53页 |
| ·Oo Lys基因的表达转化 | 第53页 |
| ·重组蛋白的表达与检测 | 第53-54页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第54-55页 |
| ·重组蛋白的复性和浓度测定 | 第55页 |
| ·重组蛋白的复性 | 第55页 |
| ·重组蛋白的浓缩和浓度测定 | 第55页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第55-56页 |
| ·多克隆抗体特异性的检测 | 第56-57页 |
| ·实验结果 | 第57-58页 |
| ·原核表达系统 | 第57页 |
| ·纯化与复性的r Oo Lys | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| 第四章 rOo Lys的活性分析 | 第60-71页 |
| ·实验材料 | 第60页 |
| ·实验样品 | 第60页 |
| ·实验仪器 | 第60页 |
| ·实验试剂 | 第60页 |
| ·实验方法 | 第60-62页 |
| ·r Oo Lys的溶菌活性分析 | 第60-61页 |
| ·热处理r Oo Lys后的溶菌活性分析 | 第61页 |
| ·r Oo Lys的胞壁酸酶活性分析 | 第61页 |
| ·r Oo Lys对鳗弧菌的抑菌作用分析 | 第61-62页 |
| ·实验结果 | 第62-68页 |
| ·r Oo Lys的溶菌活性 | 第62-64页 |
| ·热处理后r Oo Lys的活性 | 第64-65页 |
| ·r Oo Lys的胞壁酸酶活性 | 第65-66页 |
| ·r Oo Lys对鳗弧菌的抑菌作用 | 第66-68页 |
| ·讨论 | 第68-71页 |
| 结论 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-80页 |
| 已完成文章 | 第80-81页 |
| 项目支持 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
