| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-13页 |
| 引言 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-19页 |
| 1 单核苷酸多态性（SNP） | 第14-16页 |
| ·SNP的特点 | 第14页 |
| ·SNP的检测方法 | 第14-15页 |
| ·SNP在水产动物遗传育种中的应用 | 第15-16页 |
| ·构建高密度遗传连锁图谱 | 第15-16页 |
| ·性状关联分析 | 第16页 |
| ·群体遗传多样性研究及亲缘关系鉴定 | 第16页 |
| 2 Nramp基因的研究进展 | 第16-19页 |
| ·Nramp基因多态性与疾病的相关性 | 第17页 |
| ·Nramp基因疾病抗性作用机制 | 第17-19页 |
| 第二章 半滑舌鳎抗病相关基因SNP标记的初步筛选 | 第19-29页 |
| ·实验材料 | 第19-20页 |
| ·实验样品 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19-20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-23页 |
| ·基因组DNA制备 | 第20-21页 |
| ·引物设计 | 第21页 |
| ·基因池构建及SNP筛选验证 | 第21-22页 |
| ·PCR扩增 | 第22-23页 |
| ·数据分析 | 第23页 |
| ·实验结果 | 第23-27页 |
| ·基因组DNA提取情况 | 第23-24页 |
| ·PCR扩增产物检测 | 第24页 |
| ·SNP位点多态性分析 | 第24-27页 |
| ·讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 半滑舌鳎Nramp基因克隆与表达分析 | 第29-50页 |
| ·材料与方法 | 第29-32页 |
| ·实验用鱼 | 第29页 |
| ·病原准备 | 第29-30页 |
| ·组织样本获取 | 第30页 |
| ·半滑舌鳎Nramp基因在健康鱼组织中的表达 | 第30页 |
| ·半滑舌鳎Nramp基因在哈维氏弧菌感染鱼组织中的表达 | 第30页 |
| ·总RNA提取（Trizol法） | 第30-31页 |
| ·反转录cDNA第一链合成 | 第31-32页 |
| ·主要仪器及试剂 | 第32页 |
| ·半滑舌鳎 Nramp 基因克隆 | 第32-39页 |
| ·引物设计及PCR扩增 | 第32-34页 |
| ·连接和转化 | 第34页 |
| ·重组质粒的鉴定与测序 | 第34-35页 |
| ·Nramp基因 3’RACE和 5’RACE | 第35-38页 |
| ·序列分析 | 第38页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第38-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-48页 |
| ·半滑舌鳎Nramp基因全长cDNA的克隆 | 第39页 |
| ·半滑舌鳎Nramp蛋白的结构分析 | 第39-42页 |
| ·Nramp序列比对和系统进化分析 | 第42-44页 |
| ·半滑舌鳎Nramp基因在正常组织及感染后组织中的表达分析 | 第44-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 半滑舌鳎IL-10 基因克隆及原核表达初步研究 | 第50-69页 |
| ·材料与方法 | 第50-52页 |
| ·主要仪器及试剂 | 第50页 |
| ·总RNA提取 | 第50页 |
| ·cDNA合成 | 第50-51页 |
| ·试剂配制 | 第51-52页 |
| ·半滑舌鳎IL-10 基因克隆 | 第52-57页 |
| ·半滑舌鳎IL-10 基因全长cDNA克隆及组织表达 | 第52页 |
| ·半滑舌鳎IL-10 原核表达 | 第52-57页 |
| ·引物设计及PCR扩增 | 第52-53页 |
| ·原核表达PCR产物制备 | 第53页 |
| ·IL-10 基因与原核表达载体连接与转化 | 第53-54页 |
| ·重组质粒的诱导表达及SDS-PAGE检测 | 第54-55页 |
| ·重组蛋白Western blot鉴定 | 第55-56页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第56页 |
| ·重组蛋白的复性 | 第56-57页 |
| ·结果与分析 | 第57-66页 |
| ·半滑舌鳎IL-10 基因全长及序列分析 | 第57-59页 |
| ·IL-10 序列比对及系统进化分析 | 第59-60页 |
| ·半滑舌鳎IL-10 基因在正常组织及感染后组织中的表达分析 | 第60-63页 |
| ·半滑舌鳎IL-10 原核表达载体构建及重组质粒检测 | 第63-64页 |
| ·半滑舌鳎IL-10 重组蛋白的诱导表达及纯化 | 第64-65页 |
| ·IL-10 表达产物Western blot检测 | 第65-66页 |
| ·讨论 | 第66-69页 |
| 总结与展望 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-77页 |
| 硕士期间已完成论文 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
