| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 第一章 综述 | 第10-15页 |
| 1 我国水产生物研究现状 | 第10页 |
| 2 鱼类生殖研究 | 第10-13页 |
| ·鱼类性腺结构及类型 | 第11页 |
| ·鱼类性别决定机制 | 第11-13页 |
| ·遗传因素 | 第11-12页 |
| ·染色体 | 第11-12页 |
| ·性别决定基因 | 第12页 |
| ·外源性激素 | 第12页 |
| ·外界环境影响 | 第12-13页 |
| 3 LGR8、CSW3基因的研究进展 | 第13-14页 |
| ·LGR8基因的研究进展 | 第13页 |
| ·CSW3基因的研究进展 | 第13-14页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第14-15页 |
| 第二章 LGR8基因的克隆及表达分析 | 第15-33页 |
| 1 实验材料与试剂 | 第15-16页 |
| ·实验材料 | 第15页 |
| ·实验试剂和器材 | 第15-16页 |
| 2 试验方法 | 第16-27页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第16-17页 |
| ·基因组RNA提取 | 第17页 |
| ·RNA反转录 | 第17-18页 |
| ·LGR8基因克隆 | 第18-27页 |
| ·LGR8序列验证 | 第19-22页 |
| ·PCR反应 | 第19页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第19-20页 |
| ·纯化回收 | 第20页 |
| ·连接、转化、涂板 | 第20-21页 |
| ·挑取单克隆、菌液检测分析 | 第21-22页 |
| ·3’末端和 5’末端c DNA序列克隆 | 第22-24页 |
| ·5’和 3’RACE-Ready c DNA的合成 | 第22-23页 |
| ·5’和 3’RACE反应 | 第23-24页 |
| ·序列拼接分析及系统进化树的分析 | 第24页 |
| ·性别鉴定 | 第24-26页 |
| ·性腺切片观察生理性别 | 第25-26页 |
| ·PCR验证遗传性别 | 第26页 |
| ·LGR8基因实时定量PCR表达分析 | 第26-27页 |
| 3 结果 | 第27-31页 |
| ·半滑舌鳎LGR8基因DNA序列及系统进化树 | 第27-29页 |
| ·实时定量PCR结果 | 第29-31页 |
| 4 分析和讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 半滑舌鳎性腺发育过程 | 第33-48页 |
| 1 实验材料与试剂 | 第33页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·实验试剂和器材 | 第33页 |
| 2 试验方法 | 第33-39页 |
| ·CSW3真核蛋白制备 | 第33-35页 |
| ·脂质体制备 | 第35-36页 |
| ·蛋白注射 | 第36页 |
| ·DNA和RNA的提取以及切片的制作 | 第36页 |
| ·半定量分析 | 第36-38页 |
| ·实时荧光定量分析 | 第38-39页 |
| 3 实验结果 | 第39-44页 |
| ·体长、体重、体宽分析结果 | 第39-41页 |
| ·组织切片观察结果 | 第41页 |
| ·定量及半定量结果 | 第41-44页 |
| 4.讨论 | 第44-48页 |
| 论文小结 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 个人简历 | 第59-60页 |
| 发表的学术论文 | 第60页 |