摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-23页 |
1 引言 | 第11页 |
2 中华鳖养殖现状 | 第11-12页 |
3 中华鳖病原研究现状 | 第12-15页 |
·传染性病 | 第12-13页 |
·细菌病 | 第12页 |
·病毒病 | 第12-13页 |
·真菌病 | 第13页 |
·寄生虫病 | 第13页 |
·支原体病和霉形体病 | 第13页 |
·非传染性病 | 第13页 |
·诊断 | 第13-14页 |
·预防 | 第14-15页 |
·环境 | 第14页 |
·机体 | 第14-15页 |
·病原 | 第15页 |
4 爬行动物免疫的研究进展 | 第15-17页 |
·爬行动物的淋巴组织 | 第15页 |
·爬行动物的天然免疫 | 第15-16页 |
·爬行动物的获得性免疫 | 第16页 |
·影响爬行动物免疫应答的因素 | 第16-17页 |
5 嗜水气单胞菌 | 第17页 |
6 CCL20研究进展 | 第17-19页 |
·CCL20的由来 | 第17-18页 |
·趋化因子的分类和CCL20的结构 | 第18页 |
·CCL20的功能 | 第18-19页 |
·展望 | 第19页 |
7 技术路线 | 第19-22页 |
·嗜水气单胞菌诱导的中华鳖cDNA文库构建 | 第19-20页 |
·CCL20的部分序列克隆和验证 | 第20-21页 |
·CCL20 mRNA组织表达分析(A)和应激实验(B) | 第21-22页 |
8 研究目的和意义 | 第22-23页 |
第二章 温度对中华鳖胚胎发育和初生幼体形态特征及活动能力的影响 | 第23-29页 |
1 材料 | 第23页 |
2 实验方法 | 第23-24页 |
·孵化 | 第23页 |
·指标测定 | 第23页 |
·数据处理 | 第23-24页 |
3 结果与分析 | 第24-26页 |
·温度对胚胎发育和孵化成活率的影响 | 第24-25页 |
·孵化温度对孵出稚鳖形态特征的影响 | 第25页 |
·温度对新生幼体运动表现的影响 | 第25-26页 |
4 讨论 | 第26-29页 |
·孵化温度对鳖卵孵化率的影响 | 第26页 |
·温度对新生体大小及运动能力的影响 | 第26-29页 |
第三章 嗜水气单胞菌诱导的中华鳖SMART cDNA文库构建及相关基因的鉴定 | 第29-41页 |
1 材料 | 第29页 |
2 实验方法 | 第29-30页 |
·细菌复壮及人工感染 | 第29页 |
·总RNA的提取 | 第29页 |
·单、双链cDNA的合成 | 第29-30页 |
·cDNA的连接 | 第30页 |
·连接产物电转化 | 第30页 |
·cDNA文库的容量和重组率测定 | 第30页 |
·DNA测序和序列分析 | 第30页 |
3 结果与分析 | 第30-38页 |
·中华鳖总RNA的质量检测 | 第30-31页 |
·cDNA的合成 | 第31-32页 |
·cDNA文库的库容及重组率 | 第32页 |
·插入片段长度分析 | 第32-33页 |
·测序结果和分析 | 第33-38页 |
4 讨论 | 第38-41页 |
第四章 中华鳖CCL20序列的特征分析 | 第41-49页 |
1 材料与试剂 | 第41页 |
·实验材料 | 第41页 |
·试剂 | 第41页 |
2 实验方法 | 第41-43页 |
·cDNA的ORF区序列验证 | 第41-43页 |
·cDNA的ORF区序列分析 | 第43页 |
3 结果与分析 | 第43-47页 |
·CCL20的cDNA的ORF区序列分析 | 第43-45页 |
·CCL20结构分析 | 第45-47页 |
4 讨论 | 第47-49页 |
第五章 中华鳖CCL20基因组织表达分析 | 第49-57页 |
1 材料与试剂 | 第49页 |
·材料 | 第49页 |
·主要试剂 | 第49页 |
2 实验方法 | 第49-52页 |
·RNA提取及cDNA的合成 | 第49-51页 |
·CCL20基因组织表达分析 | 第51页 |
·CCL20基因在嗜水气单胞菌刺激下的表达特征分析 | 第51页 |
·统计学分析 | 第51-52页 |
3 结果 | 第52-55页 |
·目的基因和内参基因的扩增曲线 | 第52页 |
·目的基因和内参基因的溶解曲线 | 第52-53页 |
·正常组中华鳖CCL20基因组织表达特征 | 第53-54页 |
·嗜水气单胞菌刺激组中华鳖CCL20基因组织表达特征 | 第54-55页 |
4 讨论 | 第55-57页 |
全文总结 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
学术论文发表情况 | 第67页 |