| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-19页 |
| 1 禾谷镰刀菌 | 第12页 |
| 2 禾谷镰刀菌基因功能研究 | 第12-14页 |
| 3 真菌中Rho族蛋白研究 | 第14-17页 |
| ·酿酒酵母中的Rho族蛋白 | 第15-16页 |
| ·丝状真菌中的Rho族蛋白 | 第16-17页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第17-19页 |
| 第二章 禾谷镰刀菌中FgRho家族蛋白的功能分析 | 第19-49页 |
| 1 材料与方法 | 第19-21页 |
| ·菌株与培养条件 | 第19-20页 |
| ·基因敲除、互补与点突变 | 第20页 |
| ·RNA的提取和荧光定量PCR | 第20-21页 |
| ·小麦接种实验 | 第21页 |
| ·DON毒素含量的检测 | 第21页 |
| 2 结果与分析 | 第21-45页 |
| ·禾谷镰刀菌中存在6个Rho族小GTP酶蛋白 | 第21-24页 |
| ·禾谷镰刀菌Rho族蛋白基因缺失突变体的获得 | 第24-26页 |
| ·FgRho1对于禾谷镰刀菌的存活是必需的 | 第26页 |
| ·FgRho族蛋白调控禾谷镰刀菌的营养生长 | 第26-31页 |
| ·FgRho4调控禾谷镰刀菌色素的产生 | 第31页 |
| ·FgRac1、FgRho2和FgRho4与禾谷镰刀菌细胞壁完整性相关 | 第31-34页 |
| ·FgRho家族蛋白调控禾谷镰刀菌的产孢 | 第34-38页 |
| ·FgRac1、FgCdc42、FgRho2和FgRho4是禾谷镰刀菌有性发育所必需的 | 第38-39页 |
| ·FgRho4调控禾谷镰刀菌隔膜的形成和细胞核的分裂 | 第39-44页 |
| ·FgRac1、FgCdc42、FgRho2和FgRho4影响禾谷镰刀菌的致病力 | 第44页 |
| ·FgRho蛋白与禾谷镰刀菌调节DON毒素的合成 | 第44-45页 |
| 3 小结与讨论 | 第45-49页 |
| 第三章 禾谷镰刀菌FgRac1下游互作蛋白的验证与功能分析 | 第49-68页 |
| 1 材料与方法 | 第49-52页 |
| ·菌株与培养条件 | 第49-50页 |
| ·基因缺失突变体等相关禾谷镰刀菌菌株的获得 | 第50-51页 |
| ·接种实验 | 第51页 |
| ·DON毒素含量的检测 | 第51页 |
| ·酵母双杂交实验 | 第51-52页 |
| ·免疫共沉淀实验(Co-immunoprecipitation assay,Co-IP) | 第52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-66页 |
| ·FgRac1与蛋白激酶FgCla4相互作用 | 第52-53页 |
| ·FgCLA4缺失突变体的获得 | 第53-54页 |
| ·FgCLA4缺失突变体的表型分析 | 第54-56页 |
| ·FgRac1通过与FgCla4互作调节禾谷镰刀菌的营养生长和无性发育 | 第56-57页 |
| ·FgRac1与NADPH氧化酶调节亚基FgNoxR相互作用 | 第57-58页 |
| ·FgNOXR缺失突变体的获得 | 第58-59页 |
| ·FgNOXR缺失突变体的表型分析 | 第59-63页 |
| ·FgNoxR参与禾谷镰刀菌的分生孢子的产生和萌发 | 第59-61页 |
| ·FgNoxR是禾谷镰刀菌雌性发育所必需的 | 第61-62页 |
| ·FgNoxR是禾谷镰刀菌致病力所需 | 第62-63页 |
| ·FgNoxR的亚细胞定位 | 第63-65页 |
| ·FgRac1、FgNoxR和FgNox1共同调控禾谷镰刀菌的雌性发育 | 第65-66页 |
| 3 小结与讨论 | 第66-68页 |
| 附录1 甘蔗梢腐病菌FvBck1蛋白的功能分析 | 第68-90页 |
| 1 材料与方法 | 第69-72页 |
| ·菌株与培养条件 | 第69-70页 |
| ·CAT和POX的过量表达 | 第70-71页 |
| ·MCK1的异源互补 | 第71页 |
| ·RNA的提取和荧光定量PCR | 第71页 |
| ·接种甘蔗杆和玉米杆实验 | 第71-72页 |
| ·FB1毒素含量的检测 | 第72页 |
| 2 结果与分析 | 第72-87页 |
| ·串珠镰刀菌野生型菌株接种甘蔗杆的致病情况 | 第72-73页 |
| ·FvBCK1的缺失影响菌丝的正常生长 | 第73-74页 |
| ·FvBCK1缺失突变体对细胞壁抑制剂以及高温敏感 | 第74页 |
| ·FvBck1是串珠镰刀菌致病性所必需的 | 第74-78页 |
| ·适当的渗透压胁迫能够部分恢复FvBCKl缺失突变体的营养生长缺陷 | 第78-81页 |
| ·FvBck调节过氧化氢酶和过氧化物酶的表达 | 第81-85页 |
| ·表达稻瘟病菌Mck1蛋白能够恢复FvBCK1缺失突变体的部分表型缺陷 | 第85-87页 |
| 3 小结与讨论 | 第87-90页 |
| 附录2 本论文中所使用的引物序列 | 第90-95页 |
| 附录3 攻博期间发表的论文 | 第95-96页 |
| 本研究的主要创新点 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-108页 |
| 致谢 | 第108-109页 |
