| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-22页 |
| ·谷氧还蛋白 | 第12-14页 |
| ·谷氧还蛋白系统概述 | 第12-13页 |
| ·谷氧还蛋白的催化机理 | 第13-14页 |
| ·植物谷氧还蛋白的分类 | 第14页 |
| ·硫氧还蛋白 | 第14-16页 |
| ·硫氧还蛋白系统概述 | 第14-16页 |
| ·硫氧还蛋白的催化机理 | 第16页 |
| ·硫氧还蛋白的分类方法 | 第16页 |
| ·谷氧还蛋白和硫氧还蛋白的关系 | 第16-17页 |
| ·谷氧还蛋白和硫氧还蛋白的应用前景 | 第17-18页 |
| ·在食品行业中的应用前景 | 第17页 |
| ·在医药行业和化妆品行业中的应用前景 | 第17-18页 |
| ·蛋白质结构的研究方法 | 第18-21页 |
| ·结构的研究方法 | 第18-19页 |
| ·X射线衍射在解析结构中的应用 | 第19-21页 |
| ·本课题的研究意义及内容 | 第21-22页 |
| ·研究意义 | 第21页 |
| ·研究内容 | 第21-22页 |
| 第二章 重组小麦WGRX和WTRX原核表达载体的构建 | 第22-38页 |
| ·引言 | 第22页 |
| ·实验仪器及材料 | 第22-24页 |
| ·主要菌株和质粒 | 第22页 |
| ·仪器设备 | 第22页 |
| ·实验材料 | 第22页 |
| ·常用试剂配制 | 第22-24页 |
| ·实验方法 | 第24-30页 |
| ·小麦黄化苗叶片总RNA的提取 | 第24页 |
| ·反转录-PCR | 第24-26页 |
| ·wgrx和wtrx的PCR产物胶回收 | 第26页 |
| ·构建wgrx和wtrx的重组克隆载体 | 第26-27页 |
| ·WGRX和WTRX原核表达载体的构建 | 第27-30页 |
| ·结果与讨论 | 第30-37页 |
| ·小麦黄化苗总RNA的提取 | 第30-31页 |
| ·反转录PCR扩增wgrx和wtrx的目的基因 | 第31-33页 |
| ·wgrx和wtrx基因的克隆载体的构建 | 第33页 |
| ·wgrx和wtrx基因的测序结果 | 第33-34页 |
| ·WGRX和WTRX氨基酸序列分析 | 第34页 |
| ·WGRX和WTRX的疏水性分析 | 第34-35页 |
| ·WGRX和WTRX表达载体的构建 | 第35-37页 |
| ·本章小结 | 第37-38页 |
| 第三章 重组小麦WGRX和WTRX的表达与纯化 | 第38-57页 |
| ·引言 | 第38页 |
| ·实验材料及仪器 | 第38-41页 |
| ·主要仪器设备 | 第38页 |
| ·主要试剂 | 第38页 |
| ·常用溶液的配制 | 第38-41页 |
| ·实验方法 | 第41-48页 |
| ·重组WGRX和WTRX的小量诱导表达 | 第41-42页 |
| ·重组WGRX和WTRX的表达条件的优化 | 第42-43页 |
| ·重组WGRX和WTRX的可溶性分析 | 第43页 |
| ·重组WGRX和WTRX的大量发酵 | 第43-44页 |
| ·亲和柱层析分离重组WGRX和WTRX | 第44-45页 |
| ·分子排阻层析纯化重组WGRX和WTRX | 第45-47页 |
| ·浓缩保存 | 第47页 |
| ·WGRX和WTRX在溶液中存在状态的确定 | 第47-48页 |
| ·结果与讨论 | 第48-56页 |
| ·WGRX和WTRX的小量表达 | 第48-49页 |
| ·WGRX和WTRX表达条件的优化 | 第49-51页 |
| ·WTRX和WTRX的可溶性表达分析 | 第51-52页 |
| ·WGRX和WGRX的纯化 | 第52-55页 |
| ·WGRX和WTRX在Tris-HCl溶液中存在状态的确定 | 第55-56页 |
| ·本章小结 | 第56-57页 |
| 第四章 重组小麦WGRX和WTRX的性质 | 第57-72页 |
| ·引言 | 第57-58页 |
| ·实验材料及仪器 | 第58-59页 |
| ·主要仪器设备 | 第58页 |
| ·主要试剂 | 第58页 |
| ·主要溶液的配制 | 第58-59页 |
| ·实验方法 | 第59-62页 |
| ·WGRX的酶学性质 | 第59-60页 |
| ·WTRX的酶学性质 | 第60-61页 |
| ·WGRX还原WTRX | 第61页 |
| ·WTRX和WGRX对面粉品质的影响 | 第61-62页 |
| ·实验结果 | 第62-71页 |
| ·WGRX的酶学性质 | 第62-63页 |
| ·WGRX的活力单位的测定 | 第63-64页 |
| ·WGRX的温度稳定性和pH稳定性 | 第64-65页 |
| ·WTRX的全波长扫描 | 第65页 |
| ·WTRX的最适温度和最适pH | 第65页 |
| ·WTRX活力单位的测定 | 第65-67页 |
| ·WTRX的温度稳定性和pH稳定性 | 第67-68页 |
| ·WGRX还原WTRX | 第68-69页 |
| ·WTRX和WGRX系统对面粉品质的影响 | 第69-71页 |
| ·本章小结 | 第71-72页 |
| 第五章 小麦WGRX的晶体结构解析 | 第72-83页 |
| ·引言 | 第72页 |
| ·实验仪器及材料 | 第72-74页 |
| ·仪器设备 | 第72页 |
| ·主要实验材料与试剂 | 第72-74页 |
| ·实验方法 | 第74-76页 |
| ·结晶样品的制备 | 第74页 |
| ·结晶初筛 | 第74页 |
| ·晶体初步判定 | 第74页 |
| ·蛋白质晶体的优化 | 第74-75页 |
| ·蛋白质晶体的冻存 | 第75页 |
| ·蛋白质晶体数据的采集 | 第75页 |
| ·蛋白质晶体数据处理 | 第75-76页 |
| ·蛋白质晶体结构的确定 | 第76页 |
| ·实验结果与讨论 | 第76-82页 |
| ·结晶初筛和蛋白质晶体的判定 | 第76-77页 |
| ·WGRX蛋白质结晶条件的优化 | 第77页 |
| ·数据的采集和处理 | 第77-78页 |
| ·WGRX的结构解析过程 | 第78-79页 |
| ·WGRX的立体结构分析 | 第79-82页 |
| ·本章小结 | 第82-83页 |
| 结论与展望 | 第83-85页 |
| 一、结论 | 第83页 |
| 二、研究创新点 | 第83-84页 |
| 三、展望 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-92页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
| 附件 | 第94页 |