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水产病原菌快速检测技术及灭活疫苗开发

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第1章 文献综述第11-21页
   ·鳗弧菌第11-15页
     ·鳗弧菌的分类第11-12页
     ·鳗弧菌流行病学第12页
     ·鳗弧菌的致病机制第12-13页
     ·鳗弧菌的检测方法第13-15页
   ·海豚链球菌第15-16页
     ·海豚链球菌的致病机制第15-16页
     ·海豚链球菌的诊断第16页
     ·海豚链球菌的防治第16页
   ·水产疫苗第16-20页
     ·水产疫苗的应用第17页
     ·疫苗的接种途径第17页
     ·疫苗佐剂第17-20页
   ·本论文的主要内容和意义第20-21页
第2章 基于量子点标记抗体的改良斑点杂交法检测鳗弧菌第21-36页
   ·前言第21页
   ·材料第21-22页
     ·实验试剂第21-22页
     ·细菌、细胞及实验动物第22页
   ·实验方法第22-25页
     ·制备灭活菌液第22页
     ·鳗弧菌单克隆抗体的制备第22-24页
     ·量子点与抗体的结合与验证第24页
     ·制备量子点标记斑点杂交分析膜第24页
     ·量子点斑点杂交法的特异性检测第24-25页
     ·量子点斑点杂交法检测鳗弧菌菌液的灵敏度检测第25页
     ·量子点斑点杂交法检测鳗弧菌人工感染的大菱鲆组织样品第25页
     ·胶体金试纸条检测鳗弧菌第25页
   ·实验结果第25-34页
     ·小鼠的免疫第25-26页
     ·融合细胞及克隆的杂交瘤细胞的去交叉反应结果第26页
     ·单克隆抗体的纯化及亚型测定第26-27页
     ·单克隆抗体效价测定第27页
     ·单克隆抗体特异性检测第27页
     ·量子点-抗体结合荧光光谱验证第27-29页
     ·量子点-抗体结合琼脂糖凝胶电泳验证第29-30页
     ·量子点标记斑点杂交法的特异性检测第30页
     ·量子点斑点杂交法检测鳗弧菌菌液第30-31页
     ·量子点斑点杂交法检测鳗弧菌人工感染的大菱鲆组织样本第31-33页
     ·与胶体金试纸条检测方法的比较第33-34页
   ·讨论第34-35页
   ·本章小结第35-36页
第3章 鳗弧菌灭活疫苗佐剂的筛选第36-45页
   ·前言第36页
   ·实验材料第36-38页
     ·菌株、质粒、引物和培养基第36页
     ·实验动物及饲养环境第36-38页
   ·实验方法第38-40页
     ·细菌培养第38页
     ·动物回感试验第38页
     ·半数致死量(LD_(50))测定第38页
     ·鳗弧菌V.anguillarum MVM425的灭活第38页
     ·灭活疫苗的制备第38-39页
     ·灭活疫苗的免疫及鳗弧菌攻毒第39页
     ·佐剂筛选第39-40页
   ·实验结果第40-44页
     ·动物回感实验第40页
     ·半数致死量(LD_(50))第40-41页
     ·佐剂筛选第41-42页
     ·安全性检验第42-43页
     ·免疫保护期实验第43-44页
   ·讨论第44页
   ·本章小结第44-45页
第4章 海豚链球菌的分离鉴定及其灭活疫苗制备第45-64页
   ·前言第45页
   ·实验材料第45-47页
     ·实验用鱼及饲养环境第45页
     ·菌种、质粒、引物和培养基第45-46页
     ·主要试剂第46-47页
   ·实验方法第47-51页
     ·病原菌的分离第47页
     ·海豚链球菌的鉴定第47页
     ·动物回感实验第47页
     ·S.iniae HT701抗原性蛋白菌株构建、表达及纯化第47-48页
     ·SDS-PAGE蛋白电泳第48-49页
     ·免疫方案的确定第49-50页
     ·罗非鱼血清中抗体水平的分析第50页
     ·罗非鱼组织中基因转录水平的分析第50-51页
   ·实验结果第51-62页
     ·海豚链球菌的鉴定第51-54页
     ·S.iniae HT701抗原性蛋白表达菌株的构建及蛋白诱导纯化第54-55页
     ·动物回感实验第55页
     ·半数致死量(LD_(50))第55-56页
     ·免疫方案的确定第56-59页
     ·安全性检验第59页
     ·免疫保护期实验第59-60页
     ·免疫后免疫罗非鱼血清免疫分析第60页
     ·免疫后罗非鱼MHC Ⅰ与MHC Ⅱ转录水平的变化第60-62页
   ·讨论第62-63页
   ·本章小结第63-64页
第5章 结论与展望第64-66页
   ·结论第64页
   ·创新点第64-65页
   ·展望第65-66页
参考文献第66-71页
攻读硕士学位期间研究成果第71-72页
致谢第72页

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