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转基因抑制PEPC对三角褐指藻油脂含量影响的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-8页
缩略词第8-11页
第一章 绪论第11-17页
 1、生物柴油的研究进展第11-12页
 2、三角褐指藻及其脂肪酸代谢第12-14页
 3、PEPC的功能研究第14-17页
   ·PEPC与光合作用第14-15页
   ·PEPC与环境胁迫第15页
   ·PEPC与蛋白质和脂类代谢第15-17页
第二章 pepc反义表达载体的构建及遗传转化第17-39页
 1、实验材料第18-22页
   ·实验藻种及载体质粒第18页
   ·主要试剂第18-20页
   ·主要实验仪器第20页
   ·培养基及主要试剂的配制第20-22页
 2、实验方法第22-30页
   ·三角褐指藻的培养第22页
   ·三角褐指藻总基因组的提取第22-23页
   ·pepc基因的扩增和提取第23-25页
   ·载体质粒的扩增和提取第25-26页
   ·反义表达载体的构建第26-27页
   ·基因枪法转化三角褐指藻第27-29页
   ·草丁膦(Basta)筛选及扩大化培养第29页
   ·阳性转基因藻的筛选第29-30页
 3、实验结果第30-37页
   ·三角褐指藻总基因组的提取第30-31页
   ·pepc1及pepc2各片段的PCR扩增及纯化第31-32页
   ·载体质粒pfcp A-MCS/fcp B-Bar提取第32页
   ·重组质粒双酶切验证第32-33页
   ·除草剂(Basta)抗性筛选第33-34页
   ·转基因藻的PCR筛选第34-37页
 4、分析与讨论第37-39页
第三章 转基因三角褐指藻pepc基因表达及油脂分析第39-61页
 1、实验材料第39-40页
   ·主要试剂第39-40页
   ·主要仪器第40页
   ·主要试剂配制第40页
 2、实验方法第40-45页
   ·生长曲线的绘制及比生长速率计算第40-41页
   ·Real-Time PCR检测第41-43页
   ·脂肪酸组分及含量检测第43-44页
   ·生物柴油品质指标评价第44-45页
 3、数据分析第45-46页
 4、实验结果第46-58页
   ·吸光度-细胞密度曲线绘制第46页
   ·生长曲线绘制及比生长速率计算第46-50页
   ·转基因藻的Real-Time PCR检测第50-52页
   ·转基因藻油脂总量及脂肪酸组成第52-55页
   ·转基因藻的生物柴油品质指标评价第55-58页
 5、分析与讨论第58-61页
   ·转基因藻油脂含量与m RNA相对表达水平关系第58-59页
   ·转基因藻比生长速率与油脂含量的关系第59-60页
   ·脂肪酸组分的分析第60-61页
结论第61-62页
参考文献第62-69页
致谢第69-70页

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