| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 缩略词 | 第8-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-17页 |
| 1、生物柴油的研究进展 | 第11-12页 |
| 2、三角褐指藻及其脂肪酸代谢 | 第12-14页 |
| 3、PEPC的功能研究 | 第14-17页 |
| ·PEPC与光合作用 | 第14-15页 |
| ·PEPC与环境胁迫 | 第15页 |
| ·PEPC与蛋白质和脂类代谢 | 第15-17页 |
| 第二章 pepc反义表达载体的构建及遗传转化 | 第17-39页 |
| 1、实验材料 | 第18-22页 |
| ·实验藻种及载体质粒 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18-20页 |
| ·主要实验仪器 | 第20页 |
| ·培养基及主要试剂的配制 | 第20-22页 |
| 2、实验方法 | 第22-30页 |
| ·三角褐指藻的培养 | 第22页 |
| ·三角褐指藻总基因组的提取 | 第22-23页 |
| ·pepc基因的扩增和提取 | 第23-25页 |
| ·载体质粒的扩增和提取 | 第25-26页 |
| ·反义表达载体的构建 | 第26-27页 |
| ·基因枪法转化三角褐指藻 | 第27-29页 |
| ·草丁膦(Basta)筛选及扩大化培养 | 第29页 |
| ·阳性转基因藻的筛选 | 第29-30页 |
| 3、实验结果 | 第30-37页 |
| ·三角褐指藻总基因组的提取 | 第30-31页 |
| ·pepc1及pepc2各片段的PCR扩增及纯化 | 第31-32页 |
| ·载体质粒pfcp A-MCS/fcp B-Bar提取 | 第32页 |
| ·重组质粒双酶切验证 | 第32-33页 |
| ·除草剂(Basta)抗性筛选 | 第33-34页 |
| ·转基因藻的PCR筛选 | 第34-37页 |
| 4、分析与讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 转基因三角褐指藻pepc基因表达及油脂分析 | 第39-61页 |
| 1、实验材料 | 第39-40页 |
| ·主要试剂 | 第39-40页 |
| ·主要仪器 | 第40页 |
| ·主要试剂配制 | 第40页 |
| 2、实验方法 | 第40-45页 |
| ·生长曲线的绘制及比生长速率计算 | 第40-41页 |
| ·Real-Time PCR检测 | 第41-43页 |
| ·脂肪酸组分及含量检测 | 第43-44页 |
| ·生物柴油品质指标评价 | 第44-45页 |
| 3、数据分析 | 第45-46页 |
| 4、实验结果 | 第46-58页 |
| ·吸光度-细胞密度曲线绘制 | 第46页 |
| ·生长曲线绘制及比生长速率计算 | 第46-50页 |
| ·转基因藻的Real-Time PCR检测 | 第50-52页 |
| ·转基因藻油脂总量及脂肪酸组成 | 第52-55页 |
| ·转基因藻的生物柴油品质指标评价 | 第55-58页 |
| 5、分析与讨论 | 第58-61页 |
| ·转基因藻油脂含量与m RNA相对表达水平关系 | 第58-59页 |
| ·转基因藻比生长速率与油脂含量的关系 | 第59-60页 |
| ·脂肪酸组分的分析 | 第60-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |