| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-14页 |
| 第1章 绪论 | 第14-25页 |
| ·研究背景 | 第14-16页 |
| ·生物柴油的发展 | 第14-15页 |
| ·微藻油脂合成路径的探究 | 第15-16页 |
| ·三酰甘油合成路径的改造 | 第16-22页 |
| ·微藻中CO2的固定 | 第17页 |
| ·自由脂肪酸合成路径的改造 | 第17-19页 |
| ·TAG组装路径（kennedy路径）的改造 | 第19-22页 |
| ·旁路代谢路径的调控 | 第22-23页 |
| ·脂肪酸分解代谢路径 | 第23-24页 |
| ·莱茵衣藻的研究优势 | 第24-25页 |
| 第2章 转c-lpaat和c-gpd1 基因衣藻的获得及其分析 | 第25-40页 |
| ·材料与方法 | 第25-26页 |
| ·实验藻株及菌株 | 第25页 |
| ·实验室仪器及试剂 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-30页 |
| ·目的基因的改造与合成 | 第26-27页 |
| ·莱茵衣藻表达载体的构建 | 第27页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第27页 |
| ·质粒的提取 | 第27-28页 |
| ·莱茵衣藻的遗传转化及转化率计算 | 第28-29页 |
| ·转基因藻的DNA-PCR检测 | 第29-30页 |
| ·衣藻基因组DNA的提取 | 第29页 |
| ·转基因衣藻的PCR检测 | 第29-30页 |
| ·实验结果 | 第30-38页 |
| ·目的基因的改造与合成 | 第30-33页 |
| ·莱茵衣藻表达载体的构建 | 第33-36页 |
| ·转基因衣藻的抗性平板筛选 | 第36-38页 |
| ·本章小结 | 第38-40页 |
| 第3章 转基因藻lpaat和gpd1 基因的表达及脂肪酸积累的的初步分析 | 第40-54页 |
| ·实验材料与方法 | 第40页 |
| ·实验藻株 | 第40页 |
| ·实验室仪器及试剂 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-45页 |
| ·莱茵衣藻总RNA的提取 | 第40-41页 |
| ·莱茵衣藻RNA的定量反转 | 第41页 |
| ·目的基因半定量PCR | 第41-42页 |
| ·总脂肪酸含量的测定 | 第42-44页 |
| ·脂肪酸标准曲线的绘制 | 第42-43页 |
| ·脂肪酸含量的GC-MS检测 | 第43页 |
| ·脂肪酸的甲酯化 | 第43-44页 |
| ·尼罗红染色法的建立与应用 | 第44-45页 |
| ·PBS磷酸盐缓冲液的配置 | 第44页 |
| ·尼罗红染色法步骤 | 第44页 |
| ·尼罗红染色最适浓度探索 | 第44-45页 |
| ·尼罗红染色最适时间探索 | 第45页 |
| ·实验结果 | 第45-52页 |
| ·转基因衣藻的RT-PCR分析 | 第45-48页 |
| ·转基因衣藻脂肪酸含量的初步分析 | 第48-50页 |
| ·尼罗红染色法观察转基因藻的油脂滴 | 第50-52页 |
| ·尼罗红染色法的建立 | 第50-51页 |
| ·热激对转基因衣藻脂肪酸积累的影响 | 第51-52页 |
| ·本章小结 | 第52-54页 |
| 第4章 c-lpaat和c-gpd1 基因在莱茵衣藻中的转录调控研究 | 第54-63页 |
| ·实验材料 | 第54页 |
| ·实验藻株 | 第54页 |
| ·实验仪器及试剂 | 第54页 |
| ·实验方法 | 第54-55页 |
| ·转化子的热激处理 | 第54-55页 |
| ·RNA提取和定量反转 | 第55页 |
| ·目的基因和内参SYBR green实时定量PCR检测 | 第55页 |
| ·β-actin和目的片段溶解曲线的测定 | 第55页 |
| ·实验结果 | 第55-61页 |
| ·RNA的提取及质量检测 | 第55-56页 |
| ·荧光定量PCR分析方法的建立 | 第56-61页 |
| ·热激一次对转基因藻c-lpaat和c-gpd1 基因表达的影响 | 第57-59页 |
| ·反复热激三次对转基因藻c-lpaat和c-gpd1 基因表达的影响 | 第59-61页 |
| ·本章小结与讨论 | 第61-63页 |
| 第5章 热激对转基因衣藻脂肪酸含量和组分的影响 | 第63-76页 |
| ·实验材料 | 第63页 |
| ·实验藻株 | 第63页 |
| ·实验仪器及试剂 | 第63页 |
| ·实验方法 | 第63-64页 |
| ·莱茵衣藻生长曲线的绘制 | 第63页 |
| ·脂肪酸总量和成分的分析 | 第63页 |
| ·统计学分析 | 第63页 |
| ·蛋白提取方法及含量测定 | 第63-64页 |
| ·实验结果 | 第64-73页 |
| ·转基因衣藻生长情况的分析 | 第64-65页 |
| ·转基因藻脂肪酸含量检测方法的建立 | 第65-68页 |
| ·热激条件下转基因藻脂肪酸含量及组分的分析 | 第68-72页 |
| ·转基因衣藻蛋白含量的测定 | 第72-73页 |
| ·本章小结与讨论 | 第73-76页 |
| 第6章 结论与展望 | 第76-79页 |
| ·c-lpaat和c-gpd1 基因的导入可促进莱茵衣藻油脂的积累 | 第76-77页 |
| ·本研究的优势 | 第77-78页 |
| ·微藻脂肪酸调控与新策略 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 攻读硕士期间的研究成果 | 第88-89页 |
