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牛乳头瘤病毒13型海南株的全基因组克隆及E5蛋白的真核表达

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
第一章 引言第9-17页
 1 BPV的基因型、基因结构及其功能第9-14页
   ·BPV的基因型第9-11页
   ·BPV的基因结构第11-12页
   ·BPV基因的功能第12-14页
 2 BPV的致病机制第14-16页
   ·病毒诱导基因突变第14-15页
   ·环境协同因素第15页
   ·外周血淋巴细胞旁路途经第15-16页
 3 研究目的及意义第16-17页
第二章 牛乳头瘤病毒基因分型及全基因组的克隆第17-31页
 1 材料第17-18页
   ·病料的采集第17页
   ·试剂第17页
   ·仪器第17-18页
 2 方法第18-22页
   ·病灶组织处理及牛乳头瘤病毒基因组的提取第18页
   ·PCR检测第18-21页
   ·序列分析第21-22页
 3 结果第22-29页
   ·牛乳头状瘤临床症状第22页
   ·PCR检测结果及序列分析第22-24页
   ·序列分析第24-29页
 4 讨论第29-31页
第三章 BPV-13-HN E5蛋白在HEK293细胞中的表达第31-43页
 1 材料第31-32页
   ·细胞和载体第31页
   ·试剂第31-32页
   ·仪器第32页
 2 方法第32-37页
   ·BPV-13-HNE5基因引物设计第32-33页
   ·BPV-13-HNE5基因的PCR扩增第33页
   ·真核表达质粒pEGFP-N1-E5的构建及测序第33-34页
   ·HEK293细胞的培养第34-35页
   ·重组真核表达载体pEGFP-N1-E5的大量提取第35页
   ·pEGFP-N1-E5转染HEK293细胞第35-36页
   ·荧光显微镜观察EGFP-E5融合蛋白表达第36页
   ·FCM分析EGFP-E5融合蛋白表达第36页
   ·Western Blot检测EGFP-E5融合蛋白表达第36-37页
 3 结果第37-41页
   ·BPV-13-HN E5基因PCR扩增第37页
   ·重组真核表达载体pEGFP-N1-E5的构建和鉴定第37-39页
   ·荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达第39页
   ·FCM分析融合蛋白表达第39-40页
   ·Western Blot检测融合蛋白表达第40-41页
 4 讨论第41-43页
全文总结第43-44页
参考文献第44-48页
致谢第48-49页
附录第49-56页

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