| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-16页 |
| ·酵母HOG应答途径研究进展 | 第7-10页 |
| ·产甘油假丝酵母研究现状 | 第7页 |
| ·促有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导途径 | 第7-8页 |
| ·高渗甘油转导途径MAPK-HOG的研究现状 | 第8-10页 |
| ·甘油积累相关途径及关键基因启动子研究现状 | 第10-13页 |
| ·EMP途径与PGI基因 | 第10-11页 |
| ·HMP途径与ZWF基因 | 第11页 |
| ·甘油合成代谢与TPI基因 | 第11-13页 |
| ·甘油转运与STL1 基因 | 第13页 |
| ·启动子研究方法进展 | 第13-15页 |
| ·生物信息学预测法 | 第13页 |
| ·转化表达分析法 | 第13-14页 |
| ·利用调控蛋白与调控元件结合特性分析法 | 第14-15页 |
| ·立题背景与意义 | 第15页 |
| ·研究内容与技术路线 | 第15-16页 |
| 第二章 材料与方法 | 第16-27页 |
| ·材料 | 第16-18页 |
| ·菌株与质粒 | 第16页 |
| ·培养基 | 第16-17页 |
| ·主要试剂及工具酶 | 第17-18页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| ·方法 | 第18-27页 |
| ·菌体的培养 | 第18页 |
| ·酵母染色体DNA的提取 | 第18-19页 |
| ·扩增引物的设计与合成 | 第19-20页 |
| ·备选启动子扩增体系及反应条件 | 第20页 |
| ·PCR产物的回收 | 第20-21页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第21页 |
| ·转化大肠杆菌 | 第21页 |
| ·大肠杆菌中质粒DNA的提取 | 第21页 |
| ·序列测定 | 第21页 |
| ·质粒的酶切 | 第21页 |
| ·重组载体的构建 | 第21-22页 |
| ·C. glycerinogenes感受态的制备与电转化 | 第22页 |
| ·重组菌gfp整合拷贝数检测 | 第22页 |
| ·酵母荧光显微镜观察 | 第22页 |
| ·酵母总RNA的提取 | 第22-23页 |
| ·酵母总RNA的纯化及反转录 | 第23页 |
| ·实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及数据分析 | 第23-24页 |
| ·ChIP条件优化 | 第24-25页 |
| ·染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第25-26页 |
| ·菌株保存 | 第26-27页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第27-41页 |
| ·产甘油假丝酵母渗透压调控启动子的筛选 | 第27-31页 |
| ·备选启动子克隆及序列测定 | 第27页 |
| ·备选启动子结构分析 | 第27-28页 |
| ·备选渗透压调控启动子染色质免疫沉淀分析 | 第28-31页 |
| ·渗透压调控启动子验证载体构建及转化 | 第31-36页 |
| ·渗透压调控启动子验证载体构建 | 第31-34页 |
| ·重组酵母gfp整合拷贝数检测 | 第34-35页 |
| ·渗透压启动子验证载体整合效率分析 | 第35-36页 |
| ·渗透压调控启动子功能分析 | 第36-41页 |
| ·备选启动子胞外渗透压的应答转录 | 第36-37页 |
| ·重组菌荧光表达强度观察及分析 | 第37-40页 |
| ·酿酒酵母中PCgSTL3 启动子表达性能 | 第40-41页 |
| 结论与展望 | 第41-42页 |
| 主要结论 | 第41页 |
| 展望 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 附录 1：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第47-48页 |
| 附录 2：启动子测序结果及元件分析 | 第48-49页 |