摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-34页 |
·前言 | 第13-14页 |
·无脊椎动物的免疫系统 | 第14-23页 |
·细胞免疫 | 第14-15页 |
·体液免疫 | 第15-23页 |
·抗脂多糖因子的研究进展 | 第23-27页 |
·抗脂多糖因子的发现及结构分析 | 第23-24页 |
·抗脂多糖因子在甲壳动物中研究现状 | 第24-26页 |
·研究抗脂多糖因子的意义及其应用前景 | 第26-27页 |
·水产养殖对虾的重要病害 | 第27-29页 |
·对虾白斑症病毒病 | 第27页 |
·桃拉综合症病毒病 | 第27-28页 |
·鳗弧菌诱发的对虾疾病 | 第28-29页 |
·分子生物学在研究中的应用 | 第29-33页 |
·实时荧光定量PCR技术分析基因转录变化 | 第29-30页 |
·体外重组表达功能基因蛋白的功能验证 | 第30-31页 |
·cDNA文库构建及分析 | 第31页 |
·RACE全长扩增技术 | 第31-33页 |
·本论文研究的目的及意义 | 第33-34页 |
第二章 凡纳滨对虾血细胞ALF-AVK基因的克隆及序列分析 | 第34-49页 |
·凡纳滨对虾ALF-AVK基因的克隆 | 第34-48页 |
·实验材料与仪器 | 第34页 |
·实验方法 | 第34-41页 |
·实验结果 | 第41-47页 |
·讨论 | 第47-48页 |
小结 | 第48-49页 |
第三章 凡纳滨对虾ALF-AVK基因的表达差异研究 | 第49-58页 |
·实验材料及仪器 | 第49页 |
·实验方法 | 第49-53页 |
·健康凡纳滨对虾不同组织总RNA抽提 | 第49-50页 |
·感染WSSV和鳗弧菌后凡纳滨对虾鳃组织RNA抽提 | 第50-51页 |
·实时荧光定量PCR分析ALF-AVK基因不同组织和WSSV及鳗弧菌感染后差异表达情况 | 第51-52页 |
·Dot blotting 检测凡纳滨对虾 WSSV 感染情况 | 第52-53页 |
·实验结果 | 第53-55页 |
·凡纳滨对虾ALF-AVK基因mRNA的组织差异表达特征 | 第53-54页 |
·注射感染鳗弧菌或WSSV后凡纳滨对虾ALF-AVK基因mRNA表达水平在血细胞中的变化情况 | 第54页 |
·Dot-blot法检测凡纳滨对虾注射WSSV后感染情况检测 | 第54-55页 |
·讨论 | 第55-57页 |
小结 | 第57-58页 |
第四章 凡纳滨对虾ALF-AVK蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备研究 | 第58-78页 |
·凡纳滨对虾ALF-AVK蛋白的原核表达及纯化 | 第58-69页 |
·实验试剂及仪器 | 第58-60页 |
·实验方法 | 第60-66页 |
·实验结果 | 第66-68页 |
·讨论 | 第68-69页 |
·重组蛋白rALF-AVK鼠源多克隆抗体的制备 | 第69-72页 |
·实验材料与仪器 | 第69-70页 |
·实验方法 | 第70-71页 |
·实验结果 | 第71页 |
·讨论 | 第71-72页 |
·免疫印迹法(Westernblotting)检测ALF-AVK重组蛋白以及血细胞中ALF蛋白 | 第72-77页 |
·实验试剂及仪器 | 第72-73页 |
·实验方法 | 第73-74页 |
·实验结果 | 第74-76页 |
·讨论 | 第76-77页 |
小结 | 第77-78页 |
第五章 凡纳滨对虾ALF-AVK重组蛋白的活性研究 | 第78-85页 |
·实验方法 | 第78-79页 |
·间接ELISA检测rALF-AVK与LPS的结合试验 | 第78页 |
·鳗弧菌与rALF-AVK结合实验 | 第78-79页 |
·凡纳滨对虾体内检测重组蛋白ALF-AVK的结合活性 | 第79页 |
·实验结果 | 第79-82页 |
·ALF-AVK重组蛋白与LPS结合活性检测 | 第79-80页 |
·细菌-蛋白结合沉淀实验 | 第80-81页 |
·ALF-AVK重组蛋白与鳗弧菌中和实验 | 第81-82页 |
·讨论 | 第82-84页 |
小结 | 第84-85页 |
第六章 免疫组化法研究凡纳滨对虾抗脂多糖因子ALF的组织分布特点 | 第85-93页 |
·实验试剂及仪器 | 第85-86页 |
·实验方法 | 第86-88页 |
·处理防脱载玻片 | 第86页 |
·实验动物的组织固定 | 第86页 |
·石蜡处理及组织包埋 | 第86-87页 |
·修正组织蜡块及切片 | 第87页 |
·组织脱蜡复水 | 第87页 |
·组织抗原热修复反应及内源酶的清除 | 第87-88页 |
·背景封闭及抗原抗体反应 | 第88页 |
·衬染及封片 | 第88页 |
·实验结果 | 第88-91页 |
·讨论 | 第91-92页 |
小结 | 第92-93页 |
总结 | 第93-95页 |
参考文献 | 第95-107页 |
致谢 | 第107-108页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第108-109页 |