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重要双壳贝类细胞遗传图谱构建及基因组特征分析

摘要第1-8页
Abstract第8-16页
第一章 文献综述第16-37页
 1 细胞遗传学技术的发展第16-27页
   ·核型和带型分析——经典细胞遗传学技术第16-17页
   ·荧光原位杂交——分子细胞遗传学技术第17-27页
     ·荧光原位杂交原理第17-19页
     ·荧光原位杂交技术的发展第19-24页
       ·探针类型第19-22页
       ·靶DNA的分辨率不断提高第22-23页
       ·标记技术的发展第23-24页
     ·荧光原位杂交的应用第24-27页
       ·基因物理定位第24页
       ·染色体区分鉴定第24-25页
       ·图谱构建与整合第25-26页
       ·进化关系分析、亲缘关系分析和外源染色质鉴定第26页
       ·临床诊断第26-27页
 2 细胞遗传图第27-30页
   ·定义第27-28页
     ·遗传图谱第27页
     ·细胞学图第27-28页
     ·细胞遗传图第28页
   ·细胞遗传图的构建方法第28-29页
   ·细胞遗传图的构建意义第29-30页
 3 双壳贝类分子细胞遗传学研究进展第30-33页
   ·多拷贝基因的定位第30-31页
   ·重复序列的定位第31-32页
   ·单低拷贝序列定位第32-33页
 4 双壳贝类分子遗传学和基因组学研究进展第33-37页
   ·分子标记筛选和分子遗传图谱研究进展第33-34页
   ·基因组与功能基因组学研究进展第34-37页
第二章 长牡蛎染色体鉴别及染色体图谱构建第37-71页
 第一节 长牡蛎BAC克隆的染色体定位第37-59页
  0 引言第37-38页
  1 材料与方法第38-43页
   ·实验材料第38页
   ·主要试剂第38-39页
   ·主要仪器第39页
   ·染色体制备第39-40页
   ·探针制备第40-41页
     ·BAC单克隆DNA提取第40页
     ·BAC探针标记第40页
     ·ITS1探针标记第40-41页
   ·Cot-1 DNA制备第41-42页
   ·荧光原位杂交第42-43页
     ·变性及杂交第42页
     ·杂交后洗脱及复染第42-43页
     ·荧光信号检测第43页
   ·顺序-荧光原位杂交和共杂交第43页
  2 结果与分析第43-54页
   ·制备的探针质量检验第43-44页
   ·BAC克隆的染色体定位结果第44-48页
   ·共杂交和顺序原位杂交分析结果第48-49页
   ·长牡蛎染色体的命名第49-54页
  3 讨论第54-59页
   ·利用BAC-FISH对长牡蛎染色体进行鉴别的可行性第54-57页
   ·长牡蛎染色体特异性探针的应用展望第57-59页
     ·在多倍体及非整倍体牡蛎中的应用展望第57-58页
     ·在牡蛎比较基因组学的应用第58页
     ·在图谱构建和整合中的应用展望第58-59页
 第二节 用于长牡蛎染色体鉴定的BAC克隆的序列特征分析第59-71页
  0 引言第59页
  1 材料和方法第59-60页
   ·BAC克隆末端测序第59-60页
   ·BAC序列分析第60页
     ·长牡蛎基因的筛查第60页
     ·微卫星的筛查第60页
     ·BAC在长牡蛎基因组序列的定位第60页
  2 实验结果第60-68页
   ·BAC末端测序结果第60页
   ·BAC克隆中长牡蛎基因的分析结果第60-65页
   ·BAC序列中微卫星的筛查结果第65页
   ·BAC序列在长牡蛎基因组拼接版本v9的定位结果第65-68页
  3 讨论第68-71页
第三章 长牡蛎染色体图谱与遗传连锁图谱的整合第71-93页
 0 引言第71-72页
 1 材料与方法第72-74页
   ·实验材料第72页
   ·主要试剂第72页
   ·染色体制备第72页
   ·SSR-BAC克隆的筛选第72-73页
     ·连锁图及SSR标记的选择第72-73页
     ·SSR标记在BAC文库中的PCR筛选第73页
   ·探针制备第73-74页
   ·Cot-1 DNA制备第74页
   ·荧光原位杂交第74页
   ·SSR标记在长牡蛎基因组序列的定位第74页
 2 实验结果第74-88页
   ·SSR-BAC克隆在染色体的定位结果第74-79页
   ·染色体图谱与遗传连锁图谱的整合结果第79-87页
   ·SSR标记序列在长牡蛎基因组拼接版本v9的定位结果第87-88页
 3 讨论第88-93页
   ·长牡蛎遗传图谱和染色体图谱的整合中的一些发现第88-90页
   ·探针的选择及FISH分辨率对整合图谱的影响第90-93页
     ·包含遗传标记的探针选择第90-91页
     ·使用的靶DNA的分辨率第91-93页
第四章 栉孔扇贝转录组测序及分析第93-121页
 0 引言第93-95页
 第一节 栉孔扇贝cDNA文库的构建及454测序分析第95-112页
  1 材料与方法第95-101页
   ·栉孔扇贝材料的选取及总RNA的提取第95页
   ·全长cDNA的制备第95-97页
     ·反转录:cDNA一链合成第95-96页
     ·扩增全长cDNA第96-97页
   ·全长cDNA的均一化处理第97-98页
   ·测序cDNA文库的构建第98-100页
     ·随机打断全长cDNA第98页
     ·cDNA片段的末端修复及连接接头第98-99页
     1) cDNA片段的末端修复第98-99页
     2) cDNA片段的接头连接第99页
     ·cDNA片段PCR扩增第99-100页
     1) 接头连接效果的检测第99-100页
     2) cDNA片段扩增第100页
   ·cDNA文库的测序及拼接第100-101页
   ·序列的功能注释、分类和代谢途径分析第101页
  2 结果与讨论第101-112页
   ·栉孔扇贝cDNA文库的测序和拼接第101-103页
   ·拼接序列的功能注释第103-108页
   ·栉孔扇贝重要经济性状相关的候选基因的筛查第108-112页
 第二节 栉孔扇贝和虾夷扇贝的比较转录组分析第112-121页
  1 方法第112-113页
   ·序列拼接及功能注释第112页
   ·同源序列的聚类和分析第112页
   ·SNP及SSR的预测第112-113页
  2 结果与讨论第113-121页
   ·两种扇贝测序和拼接结果比较第113页
   ·两种扇贝功能注释的比较第113-116页
   ·同源序列的比较第116-118页
   ·SNP和SSR的分布特征比较第118-121页
参考文献第121-138页
附录1第138-141页
附录2第141-146页
致谢第146-147页
个人简历第147-148页
学术成果第148-149页

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