摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
英文縮写词 | 第11-12页 |
第一章 小RNA病毒科病毒VLPs及嵌合型VLPs的研究进展 | 第12-20页 |
·口蹄疫病毒属VLPs疫苗的研究现状 | 第15-16页 |
·肠道病毒属VLPs疫苗的研究现状 | 第16-18页 |
·71型肠病毒VLPs的研究现状 | 第16-17页 |
·脊髓灰质炎病毒VLPs的研究现状 | 第17页 |
·柯萨奇病毒VLPs的研究现状 | 第17-18页 |
·猪水泡病毒VLPs的研究现状 | 第18页 |
·心病毒属VLPs苗的研究现状 | 第18页 |
·嵌合型VLPs苗的研究现状 | 第18-20页 |
第二章 南非2型口蹄疫病毒样颗粒的体外组装 | 第20-33页 |
·材料 | 第20-21页 |
·质粒、菌种、表达载体及抗体 | 第20页 |
·主要生物学试剂 | 第20页 |
·仪器和设备 | 第20-21页 |
·方法 | 第21-26页 |
·引物设计 | 第21页 |
·原核表达载体构建 | 第21-24页 |
·VPO、VP3、VP1片段克隆 | 第21-22页 |
·VPO、VP3、VP1片段的胶回收 | 第22页 |
·载体及片段酶切 | 第22-23页 |
·连接反应 | 第23页 |
·转化JM109克隆菌 | 第23页 |
·克隆质粒的抽提 | 第23-24页 |
·重组质粒鉴定 | 第24页 |
·pSMK-VPOVP3表达载体构建 | 第24页 |
·衣壳蛋白VPO、VP3、VP1原核表达 | 第24-25页 |
·His标签融合蛋白的纯化 | 第25页 |
·免疫印迹实验(Western Blotting) | 第25页 |
·His-SUMO标签的切除及病毒样颗粒体外组装 | 第25页 |
·VLPs的特点及鉴定 | 第25-26页 |
·动态光散射实验(DLS) | 第25-26页 |
·蔗糖密度梯度离心 | 第26页 |
·透射电镜(TEM) | 第26页 |
·VLPs稳定性检验 | 第26页 |
·结果 | 第26-32页 |
·表达载体的构建及PCR与酶切鉴定 | 第26-28页 |
·重组融合蛋白的表达与纯化 | 第28-29页 |
·免疫印迹实验 | 第29页 |
·His-SUMO标签切除 | 第29-30页 |
·VLPs特点及鉴定结果 | 第30-32页 |
·讨论 | 第32-33页 |
第三章 南非2型口蹄疫VP1 GH-loop插入或替换FLAG多肽对VLPs组装的影响 | 第33-43页 |
·材料 | 第33-34页 |
·毒株、菌种、表达载体及抗体 | 第33-34页 |
·主要生物学试剂 | 第34页 |
·仪器和设备 | 第34页 |
·方法 | 第34-38页 |
·引物设计 | 第34-35页 |
·原核表达载体构建 | 第35-36页 |
·融合PCR扩增FLAGVP1片段 | 第35页 |
·载体及片段酶切 | 第35-36页 |
·连接反应 | 第36页 |
·重组质粒鉴定 | 第36页 |
·融合蛋白原核表达及纯化 | 第36-37页 |
·免疫印迹实验(Western Blotting) | 第37页 |
·嵌合型病毒样颗粒(VLPs)体外组装 | 第37页 |
·病毒样颗粒(VLPs)鉴定 | 第37-38页 |
·动态光散射实验(DLS) | 第37页 |
·蔗糖密度梯度离心 | 第37页 |
·透射电镜(TEM) | 第37-38页 |
·结果 | 第38-42页 |
·质粒pSMA-FLAGVP1-S/I酶切鉴定 | 第38-39页 |
·重组融合蛋白的表达与纯化 | 第39页 |
·免疫印迹实验 | 第39-41页 |
·嵌合型VLPs组装 | 第41-42页 |
·讨论 | 第42-43页 |
第四章 全文结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
作者简介 | 第50页 |