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南非2型口蹄疫病毒样颗粒体外组装及嵌合病毒样颗粒的初步研究

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
英文縮写词第11-12页
第一章 小RNA病毒科病毒VLPs及嵌合型VLPs的研究进展第12-20页
   ·口蹄疫病毒属VLPs疫苗的研究现状第15-16页
   ·肠道病毒属VLPs疫苗的研究现状第16-18页
     ·71型肠病毒VLPs的研究现状第16-17页
     ·脊髓灰质炎病毒VLPs的研究现状第17页
     ·柯萨奇病毒VLPs的研究现状第17-18页
     ·猪水泡病毒VLPs的研究现状第18页
   ·心病毒属VLPs苗的研究现状第18页
   ·嵌合型VLPs苗的研究现状第18-20页
第二章 南非2型口蹄疫病毒样颗粒的体外组装第20-33页
   ·材料第20-21页
     ·质粒、菌种、表达载体及抗体第20页
     ·主要生物学试剂第20页
     ·仪器和设备第20-21页
   ·方法第21-26页
     ·引物设计第21页
     ·原核表达载体构建第21-24页
       ·VPO、VP3、VP1片段克隆第21-22页
       ·VPO、VP3、VP1片段的胶回收第22页
       ·载体及片段酶切第22-23页
       ·连接反应第23页
       ·转化JM109克隆菌第23页
       ·克隆质粒的抽提第23-24页
       ·重组质粒鉴定第24页
       ·pSMK-VPOVP3表达载体构建第24页
     ·衣壳蛋白VPO、VP3、VP1原核表达第24-25页
     ·His标签融合蛋白的纯化第25页
     ·免疫印迹实验(Western Blotting)第25页
     ·His-SUMO标签的切除及病毒样颗粒体外组装第25页
     ·VLPs的特点及鉴定第25-26页
       ·动态光散射实验(DLS)第25-26页
       ·蔗糖密度梯度离心第26页
       ·透射电镜(TEM)第26页
       ·VLPs稳定性检验第26页
   ·结果第26-32页
     ·表达载体的构建及PCR与酶切鉴定第26-28页
     ·重组融合蛋白的表达与纯化第28-29页
     ·免疫印迹实验第29页
     ·His-SUMO标签切除第29-30页
     ·VLPs特点及鉴定结果第30-32页
   ·讨论第32-33页
第三章 南非2型口蹄疫VP1 GH-loop插入或替换FLAG多肽对VLPs组装的影响第33-43页
   ·材料第33-34页
     ·毒株、菌种、表达载体及抗体第33-34页
     ·主要生物学试剂第34页
     ·仪器和设备第34页
   ·方法第34-38页
     ·引物设计第34-35页
     ·原核表达载体构建第35-36页
       ·融合PCR扩增FLAGVP1片段第35页
       ·载体及片段酶切第35-36页
       ·连接反应第36页
       ·重组质粒鉴定第36页
     ·融合蛋白原核表达及纯化第36-37页
     ·免疫印迹实验(Western Blotting)第37页
     ·嵌合型病毒样颗粒(VLPs)体外组装第37页
     ·病毒样颗粒(VLPs)鉴定第37-38页
       ·动态光散射实验(DLS)第37页
       ·蔗糖密度梯度离心第37页
       ·透射电镜(TEM)第37-38页
   ·结果第38-42页
     ·质粒pSMA-FLAGVP1-S/I酶切鉴定第38-39页
     ·重组融合蛋白的表达与纯化第39页
     ·免疫印迹实验第39-41页
     ·嵌合型VLPs组装第41-42页
   ·讨论第42-43页
第四章 全文结论第43-44页
参考文献第44-49页
致谢第49-50页
作者简介第50页

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