| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-29页 |
| ·前言 | 第14页 |
| ·海因酶的研究现状 | 第14-17页 |
| ·海因酶的来源 | 第14-15页 |
| ·海因酶的性质 | 第15-16页 |
| ·海因酶的反应机理 | 第16页 |
| ·海因酶的应用 | 第16-17页 |
| ·海因酶的分离纯化 | 第17-24页 |
| ·海因酶的前处理 | 第19-20页 |
| ·材料的选择 | 第19页 |
| ·细胞抽提液的制备 | 第19-20页 |
| ·海因酶的粗分级 | 第20-21页 |
| ·海因酶的细分级 | 第21-24页 |
| ·疏水层析 | 第22-23页 |
| ·离子交换层析 | 第23-24页 |
| ·固定化酶研究进展 | 第24-27页 |
| ·固定化酶简介 | 第24-25页 |
| ·固定化酶方法 | 第25-27页 |
| ·非共价结合法 | 第25-26页 |
| ·结晶法 | 第25页 |
| ·分散法 | 第25-26页 |
| ·物理吸附法 | 第26页 |
| ·离子结合法 | 第26页 |
| ·化学结合法 | 第26-27页 |
| ·共价结合法 | 第26-27页 |
| ·交联法 | 第27页 |
| ·包埋法 | 第27页 |
| ·本论文主要研究内容及意义 | 第27-29页 |
| 第二章 D-海因酶的分离纯化研究 | 第29-39页 |
| ·前言 | 第29-30页 |
| ·材料与方法 | 第30-33页 |
| ·试剂与仪器 | 第30-31页 |
| ·实验试剂 | 第30-31页 |
| ·实验仪器 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-33页 |
| ·酶活检测 | 第31页 |
| ·蛋白浓度检测 | 第31页 |
| ·配制菌悬液 | 第31-32页 |
| ·超声波细胞破碎 | 第32页 |
| ·(NH_4)_2SO_4分级沉淀 | 第32页 |
| ·Phenyl CL-48 疏水层析 | 第32页 |
| ·DEAE Sepharose Fast Flow 阴离子交换层析 | 第32-33页 |
| ·SDS-PAGE 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第33页 |
| ·结果与讨论 | 第33-38页 |
| ·超声波细胞破碎 | 第33页 |
| ·(NH)SO分级沉淀 | 第33-35页 |
| ·Phenyl CL-48 疏水层析 | 第35页 |
| ·DEAE Sepharose Fast Flow 阴离子交换层析 | 第35-36页 |
| ·D-海因酶纯化结果 | 第36-37页 |
| ·SDS-PAGE 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38页 |
| ·本章小结 | 第38-39页 |
| 第三章 D-海因酶的酶学性质研究 | 第39-46页 |
| ·前言 | 第39-40页 |
| ·材料与方法 | 第40-41页 |
| ·试剂与仪器 | 第40页 |
| ·实验试剂 | 第40页 |
| ·实验仪器 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-41页 |
| ·D-海因酶最适底物浓度 | 第40页 |
| ·温度对酶活力的影响 | 第40-41页 |
| ·D-海因酶最适温度 | 第40-41页 |
| ·D-海因酶温度稳定性 | 第41页 |
| ·pH 对酶活力的影响 | 第41页 |
| ·D-海因酶最适pH | 第41页 |
| ·D-海因酶pH 稳定性 | 第41页 |
| ·D-海因酶动力学常数k_m和r_(max) | 第41页 |
| ·结果与讨论 | 第41-45页 |
| ·D-海因酶最适底物浓度 | 第41-42页 |
| ·D-海因酶最适温度 | 第42-43页 |
| ·D-海因酶温度稳定性 | 第43页 |
| ·D-海因酶最适pH | 第43-44页 |
| ·D-海因酶pH 稳定性 | 第44页 |
| ·D-海因酶动力学常数k_m和r_(max) | 第44-45页 |
| ·本章小结 | 第45-46页 |
| 第四章 D-海因酶的固定化条件研究 | 第46-58页 |
| ·前言 | 第46-48页 |
| ·材料与方法 | 第48-51页 |
| ·试剂与仪器 | 第48页 |
| ·实验试剂 | 第48页 |
| ·实验仪器 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-51页 |
| ·酶活检测 | 第48-49页 |
| ·蛋白浓度检测 | 第49页 |
| ·Eupergit C和Eupergit C_(250L)树脂氨基化 | 第49页 |
| ·EDC 溶液配制 | 第49页 |
| ·酶液pH的影响 | 第49页 |
| ·酶液蛋白浓度的影响 | 第49-50页 |
| ·环氧基树脂(Eupergit C和Eupergit C_(250L)) | 第49-50页 |
| ·氨基树脂(Eupergit C(-NH_2)和Eupergit C_(250L)(-NH_2)) | 第50页 |
| ·固定化时间的影响 | 第50页 |
| ·环氧基树脂(Eupergit C和Eupergit C_(250L)) | 第50页 |
| ·氨基树脂(Eupergit C(-NH_2)和Eupergit C_(250L)(-NH_2)) | 第50页 |
| ·EDC量对氨基树脂固定化的影响 | 第50-51页 |
| ·结果与讨论 | 第51-56页 |
| ·酶液pH的影响 | 第51-52页 |
| ·酶液蛋白浓度的影响 | 第52-53页 |
| ·环氧基树脂(Eupergit C和Eupergit C_(250L)L) | 第52页 |
| ·氨基树脂(Eupergit C(-NH_2)和Eupergit C_(250L)(-NH_2)) | 第52-53页 |
| ·固定化时间的影响 | 第53-55页 |
| ·环氧基树脂(Eupergit C和Eupergit C_(250L)L) | 第53-54页 |
| ·氨基树脂(Eupergit C(-NH_2)和Eupergit C_(250L)(-NH_2)) | 第54-55页 |
| ·EDC 量对氨基树脂固定化的影响 | 第55-56页 |
| ·本章小节 | 第56-58页 |
| 第五章 固定化D-海因酶的基本性质研究 | 第58-65页 |
| ·前言 | 第58-59页 |
| ·材料与方法 | 第59-60页 |
| ·试剂与仪器 | 第59页 |
| ·实验试剂 | 第59页 |
| ·实验仪器 | 第59页 |
| ·实验方法 | 第59-60页 |
| ·固定化D-海因酶最适pH | 第59页 |
| ·固定化D-海因酶最适温度 | 第59页 |
| ·固定化D-海因酶表观动力学常数k_m~(app)和r_(max)~(app) | 第59页 |
| ·固定化D-海因酶贮存稳定性 | 第59-60页 |
| ·结果与讨论 | 第60-64页 |
| ·固定化D-海因酶最适pH | 第60-61页 |
| ·固定化D-海因酶最适温度 | 第61-62页 |
| ·固定化D-海因酶表观动力学常数k_m~(app)和r_(max)~(app) | 第62-63页 |
| ·环氧基树脂固定化D-海因酶表观动力学常数k_m~(app)和r_(max)~(app) | 第62-63页 |
| ·固定化D-海因酶贮存稳定性 | 第63-64页 |
| ·本章小节 | 第64-65页 |
| 第六章 结论与展望 | 第65-69页 |
| ·结论 | 第65-67页 |
| ·展望 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-73页 |
| 论文发表 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
